基于ROS/TXNIP/Nlrp3探讨芦荟大黄素对P.g-LPS诱导的小鼠牙周膜成纤维细胞的影响

目的研究芦荟大黄素(aloe-emodin,AE)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)诱导的牙周膜成纤维细胞Nlrp3-inflammasome活化的影响。方法体外培养牙周膜成纤维细胞,采用P.g-LPS作为刺激剂,通过Western blot观察不同浓度芦荟大黄素(aloe-emodin, AE)对Nlrp3、前体caspase-1(pro-caspase-1)、活化caspase-1(cle-caspase-1)、TXNIP蛋白表达量的影响分子活化程度,利用RT-qPCR方法检测其对前体caspase-1、Nlrp3转录水平的影响,并使用荧光探针法评价对ROS生成量的影响。结果与空白对照相比,给予P.g-LPS刺激的小鼠牙周膜成纤维细胞Nlrp3、前体caspase-1、TXNIP的蛋白表达量及ROS的生成量明显增高,活化caspase-1的生成明显增多,AE可以明显降低Nlrp3、前体caspase-1,活化caspase-1,TXNIP在细胞内的蛋白表达量,同时抑制Nlrp3和前体caspase-1的转录水平并且减少ROS在细胞内的生成量。结论 AE能通过抑制Nlrp3相关蛋白的表达及减弱ROS/TXNIP诱导的Nlrp3-inflammasome聚集明显抑制P.g-LPS诱导的小鼠牙周膜成纤维细胞Nlrp3-inflammasome的活化。

芍药苷对哮喘小鼠炎症的作用及其机制研究

目的:探讨芍药苷(PF)治疗哮喘小鼠炎症的作用及其可能机制。方法:将40只BALB/C雌性小鼠,随机分为5组:空白组、模型组、地塞米松组(阳性对照,2 mg/kg)、PF低剂量组(20 mg/kg)和PF高剂量组(40 mg/kg),采用卵清蛋白制备小鼠哮喘模型。测定小鼠肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞、炎症因子和活性氧(ROS)的含量,并检测肺组织中硫氧还蛋白/硫氧还蛋白反应蛋白(TXNIP)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶1(Caspase-1)mRNA的表达。结果:PF可显著降低哮喘小鼠BALF中白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和单核-巨噬细胞、ROS、IL-1β、IL-6和TNF-α的表达,缓解哮喘小鼠肺组织炎性细胞浸润,并降低哮喘小鼠肺组织中TXNIP、NLRP3和Caspase-1 mRNA的表达。结论:PF可改善哮喘小鼠的炎症反应,可能与其抑制ROS/TXNIP/NLRP3/Caspase-1信号通路有关。