克唑替尼治疗伴有ROS1基因融合晚期肺鳞癌1例并文献复习

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)分为非鳞状细胞癌和鳞状细胞癌,大约有30%新诊断的NSCLC为鳞状细胞癌[1]。ROS1基因融合主要发生在不吸烟的年轻女性晚期肺腺癌患者中,突变概率仅为1%~2%[2-4],伴有ROS1基因融合的肺鳞癌患者极为罕见[5-9]。多项数据表明[10-13],克唑替尼对ROS1基因融合的NSCLC表现出良好的治疗效果,被推荐为伴有ROS1基因融合的晚期NSCLC的一线治疗方案[14-15]。本文报道1例伴有ROS1基因融合的晚期肺鳞癌患者经克唑替尼治疗后肿瘤病灶得到良好控制,病情稳定时间为9个月,提示伴有ROS1基因融合的肺鳞癌对克唑替尼治疗敏感,为临床中对伴有ROS1基因融合肺鳞癌患者的诊疗提供一定的参考。

晚期非小细胞肺癌中c-MET、ALK、ROS1基因突变的相关性及临床意义

目的探讨晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中发生c-MET扩增、ALK和ROS1基因重排的阳性率、基因变异,及其与临床病理特征的相关性。方法采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测91例晚期NSCLC中c-MET、ALK、ROS1基因,分析发生c-MET扩增、ALK/ROS1基因重排的阳性率及其相互间发生变异的相关性。结果 NSCLC患者c-MET基因的阳性率为8.79%(8/91),女性c-MET扩增率显著高于男性(19.4%vs 1.82%,P=0.006);≥60岁患者c-MET扩增阳性率高于<60岁(8.89%vs 7.5%);Ⅲ期患者阳性率高于Ⅳ期患者(9.62%vs 7.69%);腺癌患者c-MET扩增阳性率为9.2%,鳞癌患者中未发现c-MET扩增。NSCLC中ALK和ROS1融合的阳性率分别为10%和13.3%,且发现1例患者同时存在c-MET扩增和ROS1基因重排。结论 NSCLC中c-MET基因扩增阳性率与患者性别相关,女性患者发生率明显高于男性,而与患者年龄、病理类型和临床分期相关性不明显。c-MET基因扩增与ALK/ROS1基因重排的发生几乎无共存,但并非完全排斥;该实验首次发现1例患者同时存在c-MET扩增和ROS1基因重排。

非小细胞肺癌患者组织原发灶和转移灶中ROS1融合基因的研究

目的:研究晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)原发灶和转移灶ROS1融合基因阳性率,探讨其相关性。方法:收集2013年1月至2015年5月中国人民解放军北京军区总医院、军事医学科学院附属医院、浙江省肿瘤医院、大连大学附属中山医院和山西医学科学院山西大医院原发灶384例,其中配对转移灶246例,统计得出ROS1融合基因阳性率并分析原发灶与转移灶ROS1融合基因的一致性、ROS1融合基因阳性与临床基线资料间的关系。结果:ROS1融合基因阳性率原发灶为2.60%(10/384)。ROS1融合基因阳性率配对原发灶为2.85%(7/246),配对转移灶为1.63%(4/246),配对的246对原发灶、转移灶组织中,转移灶融合基因阳性而对应的原发灶融合基因阴性1例,原发灶融合基因阳性而对应的转移灶融合基因阴性4例,转移灶较原发灶检出ROS1融合基因阳性率高,两者差别有统计学意义(χ2=52.341,P=0.000);转移灶和原发灶ROS1融合基因阳性的一致率好(κ=0.536,P=0.000),通过转移灶判断原发灶融合阳性的情况,敏感性为42.86%(3/7),特异性为99.58%(238/239)。结论:非小细胞肺癌中转移灶可以预测原发灶ROS1融合基因情况,在难以取得原发灶的情况下转移灶可以作为ROS1融合基因测的备选手段。

非小细胞肺癌ROS1融合基因少见融合伙伴的故事

ROS1属于酪氨酸激酶胰岛素受体基因,在多种肿瘤细胞系中高表达。其基因重排最初是1987年在神经胶质细胞瘤中被发现的[1-2]。2007 年Rikova等[3]利用磷酸化蛋白质组学技术证实ROS1重排是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)发生、发展中的驱动基因。现有的研究表明[4-6],ROS1在NSCLC中突变率为1%~2%,因此可以作为一种潜在的靶向治疗分子。在NSCLC 中ROS1最常见的融合伙伴为CD74-、EZR-、SLC34A2-、SDC4-和TPM3-,其余均为ROS1融合基因少见融合伙伴。

晚期非小细胞肺癌原发灶和转移灶ROS1融合基因表达差异分析

目的分析ROS1(c-ros oncogene 1,receptor tyrosine kinase)融合基因在晚期非小细胞肺癌原发灶和转移灶中的差异表达。方法选取非小细胞肺癌原发灶162例,其中配对转移灶139例。采用实时荧光定量PCR检测ROS1融合基因的表达,并分析其在晚期非小细胞肺癌原发灶和转移灶中的表达差异。结果晚期非小细胞肺癌原发灶ROS1融合基因表达阳性率4.3%(7/162),配对原发灶ROS1融合基因表达阳性率2.6%(5/139),配对转移灶融合基因表达阳性率2.2%(3/139);原发灶较转移灶ROS1融合基因检出阳性率显著增高,差异具统计学意义(χ~2=13.517,P=0.000);ROS1融合基因阳性表达在原发灶和转移灶一致性好(κ=0.479,P=0.000)。非小细胞肺癌原发灶中ROS1融合基因表达与病理类型存在密切关系(χ~2=5.195,P=0.031),与患者性别、年龄等不存在明显相关性(P>0.05)。非小细胞肺癌配对原发灶以及转移灶中ROS1融合基因表达与患者性别、年龄、吸烟以及病理类型不存在明显相关性(P>0.05)。结论晚期非小细胞肺癌ROS1融合基因的阳性表达在原发灶中与病理类型有关,其在配对原发灶和转移灶中阳性表达一致性较好,可作为检测ROS1融合基因的备选手段。

非小细胞肺癌治疗的新靶点：ROS1融合基因

随着对晚期非小细胞肺癌（Non—smallcelllungcancer，NSCLC）发病机制及其生物学行为研究的不断深入，针对本病相关靶点的分子靶向治疗已成为一种重要的手段。近年来在部分NSCLC中发现新的靶基因——ROS1。该融合基因常见于不吸娴的肺腺癌患者，并有其独特的病理学特征。ROS1抑制剂能够作用于该基因的下游信号传导通路，拈抗其促肿瘤生成活性。因此，ROSl融合基斟可能成为继EGFR及ALK—EMIA后NSCLC治疗的新靶点。本文主要介绍ROS1融合基因在NSCLC中的研究进展。

ROS1阳性的非小细胞肺癌的检测及靶向治疗进展

ROS1融合基因是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)靶向治疗的又一潜力靶点,随着相应靶向药物的使用,ROS1阳性的NSCLC患者生存期明显改善。越来越多针对ROS1融合基因的治疗药物面世,让这类患者有更多的选择。但持续性用药后的获得性耐药问题仍无法避免。本文就ROS1融合基因的检测方法、靶向治疗情况及耐药的机制和策略进行综述。

非小细胞肺癌新靶点ROS1融合基因

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是造成人类死亡最多的恶性肿瘤之一,其五年生存率一直徘徊在20%以下。自肺癌领域首个分子靶向药物吉非替尼上市以来,靶向药物因其低毒、高效、便于给药的临床特点,己逐渐成为治疗NSCLC的重要选择之一。因此,筛选和证实肿瘤驱动基因已经成为未来靶向药物研发的重中之重。近来,越来越多的学者把焦点转移到ROS1融合基因上,并且已经有相关数据及研究表明ROS1融合基因被证实为NSCLC新的有潜力的治疗靶点,因此我们现就ROS1融合基因在NSCLC中的相关研究进展做一综述。

非小细胞肺癌中不同ROS1融合伴侣对克唑替尼敏感性的研究现状分析

c-ros致癌基因1(ROS1)重排(融合)已被广泛证实是非小细胞肺癌(NSCLC)发生的驱动因素,众多临床研究和临床实践结果证实克唑替尼显示出持久的临床获益。克唑替尼在中国已经纳入医保,是中国ROS1重排阳性NSCLC患者一线治疗的首选药物。目前在NSCLC中至少发现了24种基因可作为ROS1的融合伴侣,不同ROS1融合突变的患者使用克唑替尼的疗效差异巨大,融合伴侣的种类可能是其重要的影响因素。目前很少有研究探讨不同融合伴侣与克唑替尼疗效的相关性。本文通过检索PubMed、ScienceDirect等文献数据库及TCGA、COSMIC和My Cancer Genome等肿瘤基因突变公共数据库,对克唑替尼治疗不同ROS1融合伴侣患者的现有研究成果和数据作一综述性分析,旨在为克唑替尼治疗不同ROS1融合伴侣NSCLC的预后判断提供依据。

非小细胞肺癌ROS1突变与EGFR突变及临床病理特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中ROS1融合突变与表皮生长因子受体(EGFR)突变及临床病理特征的关系。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测2014年12月至2017年12月收治的3487例中国西北地区NSCLC患者ROS1基因的突变情况,同时采用ARMS法检测ROS1基因突变患者的EGFR基因突变情况,分析ROS1和EGFR共突变患者的临床病理特征。结果 3487例NSCLC患者中,ROS1基因突变54例(1. 5%)。ROS1基因突变与年龄、性别、吸烟史、病理类型和临床分期有关(P<0. 05)。54例ROS1融合基因突变患者中有3例(5. 6%)同时存在EGFR基因突变,其中19外显子缺失突变(19-del) 2例,L858R突变1例。3例ROS1突变均为突变体2型(R2)。结论中国西北地区NSCLC患者ROS1融合基因突变率为1. 5%,与EGFR基因突变可以共存。

非小细胞肺癌组织中ALK、ROS1、RET融合基因检测方法的比较

非小细胞肺癌在恶性肿瘤中的发病率和死亡率中高居榜首,是中国首要的一个公共卫生问题。近年出现的分子靶向药能显著改善非小细胞肺癌患者的生存质量,因此对患者突变基因的准确检测显得尤为重要。目前临床上检测非小细胞肺癌患者ALK、ROS1、RET融合基因的主要方法有荧光原位杂交、免疫组织化学、逆转录聚合酶链反应以及新兴起的下一代测序,但这4种方法优缺点各异。本文通过比较这几种常见的检测方法,为融合基因检测方法的选择提供参考。

MET扩增非小细胞肺癌患者的临床病理特征及其对克唑替尼的响应分析

目的 探讨非小细胞肺癌患者MET基因扩增与临床病理特征的相关性,揭示MET扩增与其他驱动基因突变共存患者对克唑替尼的敏感性。方法 回顾性分析252例非小细胞肺癌患者的临床病理资料,采用二代测序法检测常见驱动基因EGFR、ALK、ROS1、RET、HER2、BRAF和MET的突变情况,特定突变患者采用Fish法进行验证;根据患者MET基因扩增情况进行分组,比较各组患者年龄、吸烟史、性别、病理类型、疾病阶段及其他驱动基因突变情况;收集MET扩增与其他驱动基因突变共存患者使用克唑替尼后的预后数据。结果 252例患者中,MET扩增发生率为19.4%(49/252),其中原发MET扩增和继发MET扩增突变率分别为16.2%(33/203)和31.2%(15/48)。MET扩增多见于Ⅲ~Ⅳ期肺癌(P=0.02)、骨转移(P=0.02)及ROS1融合阳性(P=0.02)患者,与年龄、性别、吸烟史、病理学分类无明显相关性(P>0.05)。31例MET扩增阳性患者具有其他驱动基因突变,其中5例患者使用克唑替尼进行治疗。5例使用克唑替尼的患者中,2例是原发MET扩增,3例是继发MET扩增;4例使用克唑替尼获得了较好的效果,1例死于重度感染。总结MET扩增在本研究人群中的突变率高于文献报道,且多见于临床分期较晚、骨转移、ROS1融合阳性患者。MET扩增与其他驱动基因突变共存的患者也能在一定程度上从克唑替尼中获益。

肺癌重症呼吸衰竭ALK抑制剂耐药的基因检测分析

目的分析非小细胞肺癌重症呼吸衰竭患者接受间变性淋巴瘤激酶(ALK)抑制剂治疗后出现耐药的基因情况。方法选取14例接受克唑替尼治疗后出现继发性耐药的非小细胞肺癌重症呼吸衰竭患者,均为ROS1融合基因阳性。采用NGS技术分别对7例外周血样本(提取血浆游离循环肿瘤DNA)、3例胸水样本(提取DNA)及4例组织切片样本(提取DNA)进行基因检测,对其基因突变情况进行分析。结果14例耐药患者中共发现51个基因改变,平均每个患者约出现3.6个基因改变,错义突变(53.0%)及基因融合(25.0%)为最常见的基因突变类型;92.9%的耐药患者存在原基因改变,其中ROS1基因获得性突变阳性患者中,4例患者出现G2032R点基因突变(28.6%),2例患者出现TP53点突变(14.3%),TERT、NEF2L2、PTPRD、OR5L2等罕见驱动基因及K-RAS、EGFR、KIT、BRAF、PIK3CA等常见驱动基因突变在ROS1基因获得性突变阴性患者中发现,14.3%的患者出现信号旁路激活通道CDKN2A基因突变。结论ROS1融合基因阳性的非小细胞肺癌重症呼吸衰竭耐药发生机制相对复杂,可能与信号旁路通道的激活、罕见基因突变及获得性ROS1基因点改变等多种基因突变相关。

肺腺癌 ROS1融合基因的检测及临床病理特征

目的：探讨肺腺癌中ROS1融合基因的存在情况及肺腺癌的临床病理特征。方法采用即时荧光PCR法对369例已知表皮生长因子受体（ EGFR ）突变状态的肺腺癌手术切除标本进行ROS1融合基因检测，分析ROS1融合基因与患者临床病理特征的关系，并应用直接测序法对其中16例阳性病例和20例阴性病例进行验证。结果369例肺腺癌组织中，16例（4.3％，16／369）存在ROS1融合基因；ROS1融合基因与患者性别、年龄、吸烟史、肿块位置、大小、组织学亚型、分化程度、T分期、淋巴结转移、TNM分期及EGFR突变状态均无关（ P均＞0.05）。其中女性患者ROS1融合基因阳性率（4.4％，8／183）与男性（4.3％，8／186）相近，差异无统计学意义（P＝0.973）；年龄≤60岁患者的ROS1融合基因阳性率（5.1％，10／195）高于＞60岁患者（3.4％，6／174），非吸烟者的ROS1融合基因阳性率（4.4％，14／318）略高于吸烟者（3.9％，2／51），差异均无统计学意义（P＞0.05）。阳性、阴性病例的直接测序表明ROS1融合基因阳性检出率与实时荧光PCR法结果一致，总体符合率为100％。结论 ROS1融合基因在青年、非吸烟患者中较为多见，可以与EGFR突变共存，代表了一类新的肺腺癌分子亚型。

非小细胞肺癌ROS1及其融合基因CD74-ROS1逆转录病毒载体的构建

目的:利用逆转录病毒载体pBaba-puro构建携带ROS1基因及其CD74-ROS1融合基因的重组载体pBaba-puro-ROS1,pBaba-puro-CD74-ROS1。方法:设计与合成引物,提取组织标本RNA,反转录和PCR扩增,经BamHI和TaqI双酶切,琼脂糖凝胶电泳,切胶回收进行连接转化,并再次酶切鉴定,测序分析。结果:成功构建携带ROS1基因及其CD74-ROS1融合基因的重组载体pBaba-puro-ROS1,pBaba-puro-CD74-ROS1,并通过双酶切与测序鉴定。结论:利用逆转录病毒载体基因重组技术能够成功构建出携带相应基因的逆转录病毒,可用于后续研究。

ROS1阳性非小细胞肺癌靶向治疗的研究进展

ROS1融合基因作为非小细胞肺癌(NSCLC)分子靶向治疗又一新的潜力靶点,近年来,越来越多的学者将焦点转移到ROS1融合基因上.体外实验和临床研究结果均显示,间变性淋巴瘤激酶(ALK)抑制剂对ROS1阳性NSCLC患者具有明显的抗肿瘤活性,但仍不可避免出现耐药.目前ROS1阳性NSCLC尚无标准化诊疗方案.因此,针对ROS1的ALK抑制剂的进一步研究至关重要,可为NSCLC患者靶向治疗和研究提供新的治疗思路.

ROS1融合基因在非小细胞肺癌靶向治疗中的研究进展

非小细胞肺癌（NSCLC）的分子靶向治疗已经成为目前医学领域的研究热点，继表皮生长因子受体（EGFR）、鼠类肉瘤病毒癌基因（KRAS）以及间变性淋巴瘤激酶（ALK）等熟知的肿瘤驱动基因被发现之后，越来越多的学者把焦点转移到ROS1融合基因上。ROS1基因编码的蛋白是受体酪氨酸激酶超家族成员之一，对细胞生长和生存起着重要作用。在NSCLC的发生、发展及临床治疗中，ROS1融合基因更是扮演着至关重要的角色。

c-ROS癌基因1融合阳性肺腺癌54例临床特征分析

目的 分析c-ROS癌基因1融合阳性肺腺癌患者的临床特征.方法 选取2014年3月至2017年1月在浙江大学医学院附属第一医院进行基因检测的1 482例肺腺癌患者,根据基因突变的不同分为ROS1融合阳性组、渐变淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)融合阳性组、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变组及3个基因突变均阴性组.另收集2017年2-12月确诊的20例ROS1阳性患者纳入ROS1阳性组.收集并比较ROS1融合阳性组与其余驱动基因突变组间患者的年龄、性别、吸烟史、肿瘤TNM分期、驱动基因突变、胸部CT等临床特征,连续变量比较采用Mann-Whitney检验,分类变量比较采用x2检验.结果 ROS1融合阳性患者共54例,其中男19例,女35例.ALK融合阳性患者共73例,男28例,女45例.EGFR基因突变患者共679例,男293例,女386例.3个基因突变均阴性的患者共676例.ROS1融合阳性组平均发病年龄为(54±12)岁,小于EGFR基因突变组的(60±11)岁,差异有统计学意义(z=-3.982,P<0.001),亦小于3个基因突变均阴性组的(62±10)岁,差异有统计学意义(z=-4.944,P<0.001);ROS1融合阳性组女性患者比例(64.8%,35/54)显著高于3个基因突变均阴性的肺腺癌组(28.4%,192/676),差异有统计学意义(x2=30.94,P<0.001);ROS1融合阳性组不吸烟患者比例(72.2%,39/54)显著高于3个基因突变均阴性肺腺癌组(38.0%,257/676),差异有统计学意义(x2=24.27,P<0.001);ROS1融合和ALK融合阳性肺腺癌患者的性别、年龄、吸烟史均无统计学相关性,各型驱动基因突变腺癌亚型之间TNM分期无统计学差异.ROS1融合阳性肺腺癌在胸部CT上以周围型肺癌表现为主(71.4%,20/28),多为实性密度影(75%,21/28),其中分叶状(75.0%,21/28)和细毛刺(57.1%,16/28)是ROS1融合阳性肺腺癌的常见征象.结论 c-ROS癌基因1融合在肺腺癌患者中发生率低,多见于年轻不吸烟女性患者,可以与EGFR基因突变共存.

实时荧光聚合酶链反应联合检测法检测非小细胞肺癌组织中间变性淋巴瘤激酶和c—ros原癌基因1酪氨酸激酶融合基因的临床价值

目的探讨实时荧光聚合酶链反应（PCR）联合检测法检测非小细胞肺癌（NSCLC）组织中间变性淋巴瘤激酶（ALK）和c－ros原癌基因1酪氨酸激酶（ROS1）融合基因的临床应用价值。方法采用ALK和ROS1融合基因联合检测试剂盒，以实时荧光PCR法对302例NSCLC标本进行ALK和ROS1融合基因的联合检测，并应用Sanger DNA测序法对其进行验证，分析两种检测方法的一致性。结果实时荧光PCR联合检测法检测302例NSCLC标本的成功率为100%。ALK融合基因阳性12例（4.0%），其中ALK－M1融合基因型3例，ALK－M2融合基因型3例，ALK－M3融合基因型3例，ALK－M4融合基因型1例，ALK－M6融合基因型2例。ROS1融合基因阳性12例（4.0%），其中ROS1－M7融合基因型1例，ROS1－M8融合基因型8例，ROS1－M12融合基因型1例，ROS1－M14融合基因型1例，ROS1－M3和ROS1－M8融合基因型双阳性1例。ALK融合基因和ROS1融合基因的阳性总检出率为7.9%（24/302），ALK融合基因和ROS1融合基因阴性278例。Sanger DNA测序法的检测成功率也为100%。实时荧光PCR联合检测法与Sanger DNA测序法检测的阳性率和融合基因类型完全一致。结论经Sanger DNA测序法验证，实时荧光PCR联合检测法对NSCLC组织中ALK和ROS1融合基因的检测具有等效性。在NSCLC患者筛选靶向药物时，实时荧光PCR联合检测法对样本中微量ALK和ROS1融合基因进行同时检测，可以节省时间，避免重复取样，是一种值得推荐的快速、可靠的检测方法。