双荧光标记小鼠模型研究破骨细胞融合

目的利用双荧光标记小鼠模型观察破骨细胞的融合过程并探讨不同浓度的细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和甲状旁腺激素(PTH)对破骨细胞融合效率的影响。方法使用5周龄CTSK-Cre和的ROSAmt/mg两种转基因小鼠,前者无荧光表达而在其破骨细胞中表达CRE重组酶,后者表达红色荧光(tomato)。处死两种小鼠并冲出骨髓间充质干细胞(BMSCs)且以1∶1的比例混合培养。将不同浓度的RANKL和PTH加入共培养体系,计算绿色荧光的量。结果 CTSKCre和ROSAmt/mg2种转基因小鼠BMSCs共培养第5天观察到绿色荧光阳性的细胞出现;RANKL组:随着RANKL浓度的升高,共培养体系内绿色荧光阳性的细胞数不断增加;PTH组:共培养体系内绿色荧光阳性的细胞数与PTH浓度之间未发现明显的相关性。结论基于cre-loxp系统建立的cre重组酶诱导的双荧光标记小鼠模型可有效用于破骨细胞融合过程的研究;RANKL的浓度越高其诱导破骨细胞融合的效率越高;PTH与破骨细胞的融合效率之间无明显的剂量相关规律。