RP-HPLC法快速检测牛奶中7种四环素类药物残留量

目的:建立快速检测牛奶中7种四环素类药物残留的反相高效液相色谱法。方法:用0.1mol/L McIlvaine-EDTA溶液和50%三氯乙酸(TCA)溶液共同处理牛奶样品,通过Waters Oasis HLB固相萃取柱进行净化处理。仪器条件中所用色谱柱为SunfireTMC18(250mm×4.6mm,5μm)柱,以甲醇-乙腈-0.01mol/L草酸(pH2)为流动相,采用梯度洗脱模式。结果:7种四环素类药物线性范围宽,峰面积和样品浓度在0.05～1μg/ml范围内呈很好的线性关系,加标平均回收率为78.66%～106%,最低检测限为0.02μg/ml。结论:该方法操作简单、重现性好、检测限低、灵敏可靠,可在14min内同时将四环素等7种四环素类药物达到基线分离。

RP-HPLC法测定参类保健酒中人参皂甙Rg_l、Re、Rb_l的含量

采用反相液相色谱法同时测定参类保健酒中三种人参皂甙的含量,使用SymmetryCl8柱,乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相,流速1.0ml/min,梯度洗脱,柱温35℃,波长203nm,本法快速准确、分离效果好、回收率大于95.3%。

RP-HPLC梯度洗脱法测定泮托拉唑钠的有关物质及含量

目的:建立泮托拉唑钠及制剂的有关物质及含量的测定方法。方法:采用VP-ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相以0.01 mol/L磷酸氢二钾溶液(用磷酸调节pH至7.0)-乙腈,梯度洗脱,0→30 min(90∶10→60∶40),30→45 min(60∶40→15∶85);柱温为40℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为289 nm。结果:泮托拉唑钠与各中间体及降解产物均良好分离,泮托拉唑钠在6.96～48.72μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 9),最低检测限与最低定量限分别为8.51 ng与17.0 ng。结论:本方法能有效控制泮托拉唑钠有关物质,并可用于含量测定。

RP-HPLC梯度洗脱法测定儿童Ⅱ号口服液中龙胆苦苷,盐酸巴马汀、盐酸小檗碱

目的 :建立儿童Ⅱ号口服液 (黄柏、龙胆草、知母等 )中龙胆苦苷 ,盐酸巴马汀及盐酸小檗碱高效液相色谱测定方法。方法 :以DiamonsilTM C18柱 ( 2 5 0mm× 4 .6mm ,5 μm)为色谱柱 ,以乙腈 磷酸 三乙胺 水为流动相 ,检测波长为 2 70nm ,流速为 1mL·min-1。结果 :龙胆苦苷 ,盐酸巴马汀及盐酸小檗碱的线性范围分别为 72 .8～ 72 8μg·mL-1(r =0 .9998) ,7.5 5～75 .5 μg·mL-1(r =0 .9998) ,12 .4 5～ 12 4 .5 μg·mL-1(r =0 .9999) ,平均加样回收率 (n =6 )分别为 98.17% ,98.78% ,98.6 0 % ;RSD分别为 1.6 0 % ,1.35 % ,1.2 5 %。结论 :该方法准确 ,重复性好 ,专属性好 ,适合于儿童Ⅱ号的质量控制。

RP-HPLC梯度法测定血塞通滴丸中三七皂苷R_1、人参皂苷Rb_1及人参皂苷Rg_1的含量

目的 :用高效液相色谱梯度洗脱法同时检测血塞通滴丸中三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg13种皂苷含量的方法 ,为制定质量标准中含量测定方法及含量限度提供了依据。方法 :用大连SpherisorbC18分析柱 ,乙腈 水线性梯度洗脱 ,0～ 15min(2 0∶80 - 4 0∶6 0 ) ,流速 1.0mL·min-1,检测波长 2 0 3nm。结果 :R1,Rf1和Rb1线性范围分别为 1.0 2～ 9.18μg ,4 .8～ 4 3.4 μg和 4 .6～ 4 1.6 μg。该方法回收率R1为 10 1.0 % (RSD =3.18% ) ,Rb1为 10 0 .0 % (RSD =1.19% ) ,Rg1为 99.5 % (RSD =3.0 2 % )。结论 :HPLC梯度洗脱法能将多种皂苷很好地分离检测 ,提高了时效 ,减少了误差 ,结果表明该方法准确可靠 ,重现性好 。

RP-HPLC梯度洗脱法同时测定通迪胶囊中三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1和人参皂苷Rb_1

目的采用HPLC梯度洗脱法同时测定通迪胶囊(三七、紫金莲、延胡索、七叶莲、鸡矢藤、细辛)中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1。方法用Hypersil ODS-A柱C18(200 mm×5.0 mm5,μm);乙腈-水二元梯度洗脱:0～22min(19:81)2,2～32 min(19→21:81→79),32～75 min(21→38:79→62);柱温室温;检测波长203 nm。结果该方法三七皂苷R1、人参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1的线性范围分别为0.235～2.352μg(r=1.000)、0.805 8～8.058μg(r=1.000)、0.816～8.16μg(r=0.999 96),线性关系良好;平均回收率分别为102.8%(RSD为2.3%)、98.3%(RSD为2.9%)、98.0%(RSD为2.4%)。结论 HPLC梯度洗脱法,结果表明该方法准确可靠,重现性好,结果稳定,可用于通迪胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的测定。

RP-HPLC梯度洗脱法测定四逆汤中乌头类生物碱的含量

[目的]用RP-HPLC梯度洗脱法测定四逆汤中乌头类生物碱的含量。[方法]用Magic C18AQ色谱柱;乙腈-水(0.1%三乙胺)二元梯度洗脱;流速1.0mL.min-1;检测波长235nm。[结果]新乌头碱、乌头碱和次乌头碱的线性范围分别为6.65～665μg.mL-1,6.05～605μg.mL-1和5.80～580μg.mL-1。该方法回收率新乌头碱为98.77%(RSD=0.41%),乌头碱为101.3%(RSD=1.55%),次乌头碱为97.48%(RSD=1.34%)。[结论]RP-HPLC梯度洗脱法能将乌头类生物碱很好地分离检测,提高了时效,减少了误差,结果表明该方法准确可靠,重现性好,结果稳定。

RP-HPLC梯度洗脱法同时测定三七总皂苷及血塞通注射液中3种皂苷的含量

目的 :用高效液相色谱梯度洗脱法同时检测三七总皂苷原料及注射液中三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg13种皂苷含量 ,为重新修订质量标准中含量测定方法及含量限度提供了依据。方法 :用大连SpherisorbC8分析柱 ;乙腈 -水线性梯度洗脱 :0～ 3min (2 4∶76 ) ,3～ 15min (4 5∶5 5 ) ;流速 1 5mL·min-1;检测波长 2 0 3nm。结果 :该方法回收率三七皂苷R1为 99 8% ,人参皂苷Rb1为 10 0 6 % ,人参皂苷Rg1为98 9% ,RSD <1 1%。结论 :高效液相色谱梯度洗脱法能将多种皂苷很好地分离检测 ,提高了时效 ,减少了误差 ,结果表明该方法准确可靠 ,重现性好 ,结果稳定。

RP-HPLC法测定骨健口服液中丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B的含量

目的:建立同时测定骨健口服液中3种水溶性成分—丹参素、原儿茶醛和丹酚酸 B 含量的分析方法。方法:高效液相色谱梯度洗脱法。色谱柱:Zorbax Eclipse SB-C_(18)(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相:0.05%(v/v)磷酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱;检测波长:280 nm;流速:1.0 mL·min^(-1);柱温:25℃;进样量为20 μL。结果:丹参素、原儿茶醛和丹酚酸 B 的线性范围分别在0.375～7.5 μg、0.025～0.5 μg、0.966～19.32 μg,线性关系良好(r≥0.9998)。平均加样回收率(n=5)分别为99.2%,97.6%,98.9%;RSD<2.0%。结论:本方法操作简便、灵敏度高、重现性好,为全面控制和评价骨健口服液制剂的质量提供了可靠的方法。

血液中氨基酸的RP-HPLC测定

目的 建立HPLC法测定人体血液中氨基酸浓度。方法 柱前邻苯二甲醛衍生化应生成荧光衍生物 ,以 4 氨基丁酸为内标。反相高效液相色谱法测定。结果 在本实验条件下 ,正常人血浆中 10种氨基酸 (Ala、Arg、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Ser、Val)均能检出。且干扰因素少 ,基线稳定 ,具有较高的灵敏度。结论 本法无需特殊反应装置 ,具有高效 ,简便 ,快速 。

RP-HPLC法测定正源方指标成分的梯度洗脱条件优选

目的优选RP-HPLC法测定正源方指标成分的梯度洗脱条件。方法以直观峰形、拖尾情况、保留时间、分离度大小为指标,综合分析比较、优化HPLC法测定人参皂苷Rg1,人参皂苷Re,人参皂苷Rb1含量的梯度洗脱条件。结果以乙腈:0.1%磷酸水梯度洗脱0→25 min 19:81;25→60 min 20:80;60→80 min 28:72;80→90 min40:60;90→100 min 19:81,产生的峰形对称、无拖尾、保留时间适中,三个指标分离度均大于1.5;人参皂苷Rg1,人参皂苷Re,人参皂苷Rb1进样量分别在0.215μg～2.69μg(r=0.9986),0.418μg～5.23μg(r=0.9992),0.677μg～8.46μg(r=0.9993)呈良好的线性关系;平均回收率分别为98.38%,97.98%,98.37%,RSD分别为1.04%,1.02%,1.16%。结论本文优选的梯度洗脱条件重现性好、准确度高,合理可行,适合于正源方的检测分析。

RP-HPLC法测定乌梅不同炮制品及不同部位中枸橼酸含量

目的:采用RP-HPLC法同时测定乌梅不同炮制品及不同部位中枸橼酸(Citric Acid,CA)含量。方法:采用Phenomenex C18 (4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.2%磷酸(B)作为流动相,梯度洗脱,流速:0.6 mL·min-1,柱温:25℃,检测波长:215 nm。结果:枸橼酸的线性方程为Y=1 995.40X+53.49 (r=0.999 7)。质量浓度在0.639~6.39 mg·mL-1范围内线性关系良好。平均加样回收率为99.13%(n=9)。乌梅不同炮制品及不同部位中,乌梅肉所含枸橼酸的含量最高,乌梅炭中枸橼酸的含量最低。结论:该方法准确、快速、可靠,能有效测定乌梅不同炮制品及不同部位中枸橼酸的含量。

RP-HPLC法分离和测定荆花胃康原料药和胶丸中的对-异丙基甲苯和α-萜品烯

建立了分离和测定荆花胃康原料药和胶丸中的主要成分对-异丙基甲苯（ρ-cymene）和α-萜品烯（α-Terpinene）的反相高效液相色谱梯度洗脱的方法.采用Spherisorb ODS1分析柱;甲醇-水梯度洗脱：0～15 min（V（甲醇）：V（水）=75：25）,15～22 min（V（甲醇）：V（水）=85：15）,22～28 min（V（甲醇）：V（水）=75：25）;紫外检测波长220 nm.对-异丙基甲苯在2.0～6.0 mg/mL,α-萜品烯在4.0～12.0 mg/mL范围内,峰面积与其质量浓度呈良好的线性关系;平均加样回收率对-异丙基甲苯为99.6%（RSD=1.3%）,α-萜品烯为98.2%（RSD=1.1%）.该方法灵敏度高,重现性好,结果稳定,可用于同时测定荆花胃康原料药及胶丸中的对-异丙基甲苯和α-萜品烯.

RP-HPLC梯度洗脱法测定桑叶中芦丁和绿原酸的含量

建立了同时测定桑叶中芦丁和绿原酸含量的方法，采用Kromasil C18柱（4．6mm×250mm，5μm），以甲醇-0．5％磷酸的水溶液为流动相，梯度洗脱程序为0min[V（甲醇）＋V（O．5％磷酸）=30＋70]-15min [V（甲醇）＋V（O．5％磷酸）=30＋70]-20min[V]v（甲醇）＋V（0．5％磷酸）-50＋50]-35min[V（甲醇）＋V（0．5％磷酸-50＋50]；流量0．8mL·min^-1;检测波长350nm；柱温25℃；光电二极管阵列检测器（PAD）。结果表明，芦丁线性范围为0．218～1．962μg，r=0．9993，样品的平均加样回收率为101．3％，RSD1．1％；绿原酸线性范围为0．654～5．886μg，r=0．9997，样品的平均加样回收率为98．2％，RSD1．1％；绿原酸线性范围为0．654～5．886μg，r=0．9997，样品的平均加样回收率为98．2％，RSD1．5％。该法快速简便，专属性强，重复性好，可作为桑叶中芦丁的定量分析方法。

RP-HPLC梯度洗脱法测定杏香兔耳风不同部位中绿原酸和芦丁的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定杏香兔耳风不同部位中绿原酸和芦丁的含量。方法:采用KromasilC18柱(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇-水为流动相,梯度洗脱程序为0min(25:75)-13min(25:75)-14min(45:55)-30min(45:55)-40min(75:25);流速0.8ml·min-1;检测波长350nm;柱温25℃;光电二极管阵列检测器(PAD)。结果:绿原酸线性范围为0.430～3.870μg,r=0.9996,样品的平均加样回收率为98.9%(RSD=1.7%);芦丁线性范围为0.252～2.268μg,r=0.9995,样品的平均加样回收率为97.6%(RSD=2.3%)。结论:方法快速简便,专属性强,重复性好,可作为杏香兔耳风中绿原酸和芦丁的定量分析方法。

RP-HPLC法测定阿德福韦酯片中阿德福韦酯含量和有关物质

目的:建立阿德福韦酯片中主药含量及有关物质的测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,Alltech 混合式阴离子交换^(TM)C_8(7μm,250mm×4.6mm)色谱柱,梯度洗脱,流速1.2mL·min^(-1),检测波长260nm。结果:该方法能分离片剂中的阿德福韦酯及其相关杂质,阿德福韦酯在0.0502-0.5020mg·mL^(-1)浓度范围内,线性良好,r=0.9999;最低检测限0.1μg。结论:高效液相色谱法可测定阿德福韦酯片中阿德福韦酯的含量和有关物质,简便快速,稳定可靠。

RP-HPLC测定连蒲双清片中咖啡酸、槲皮素和盐酸小檗碱

目的：建立连蒲双清片（蒲公英,盐酸小檗碱）中咖啡酸、槲皮素和盐酸小檗碱的HPLC测定方法。方法：采用C18柱（AichromBond-1,4.6mm×250mm,5μm）,甲醇-磷酸-三乙胺-水为流动相,检测波长321nm,流速为1mL/min。结果：咖啡酸、槲皮素和盐酸小檗碱的线性范围分别为2.00-30.0μg/mL（r=0.9997）,2.40~16.0μg/mL（r=0.9991）,15.0-90.0μg/mL（r=0.9993）,平均加样回收率（n=5）分别为97.8、100.6和100.4;RSD分别为2.7、1.5和1.4。结论：该方法准确,重复性好,专属性高,适用于连蒲双清片的质量控制。

RP-HPLC梯度洗脱法测定心脑贯通滴丸中三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1及人参皂苷Rb_1的含量

目的：用高效液相色谱梯度洗脱法同时检测心脑贯通滴丸中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1的含量。方法：用YMC-Pack ODS-A柱（C18,150mm×4.6mm,5μm）;乙腈-水二元梯度洗脱;检测波长203nm。结果：该方法三七皂苷R1、人参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1的线性范围分别为0.204-1.836、0.818-7.362、0.858-7.722μg;该方法的平均回收率三七皂苷R1为97.86,人参皂苷Rb1为101.71,人参皂苷Rg1为101.44。结论：高效液相色谱梯度洗脱法能将多种皂苷很好地分离检测,提高了时效,减少了误差,结果表明该方法准确可靠,重现性好,结果稳定。

RP-HPLC法测定枸橼酸托法替尼含量及有关物质

目的建立测定枸橼酸托法替尼含量及有关物质的RP-HPLC法。方法使用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-磷酸盐缓冲液(p H 7.0)为流动相(含量测定采用等度洗脱,体积比25∶75;有关物质测定采用梯度洗脱),流速1.0 m L·min^(-1),检测波长289 nm,柱温30℃。结果在含量测定色谱条件下,托法替尼在质量浓度10.0~60.0 mg·L^(-1)内呈良好线性关系(r=0.999 9),平均回收率为100.5%(n=9);在有关物质测定色谱条件下,托法替尼与各杂质能够得到良好的分离;杂质A^E在质量浓度0.16~1.6 mg·L^(-1),杂质F在质量浓度0.32~1.6 mg·L^(-1)内呈良好的线性关系,杂质A^F的r≥0.999 7。结论该方法可用于枸橼酸托法替尼的含量测定及有关物质的控制。

RP-HPLC二元梯度洗脱法测定鲑降钙素喷鼻剂的含量及有关物质

目的:采用反相高效液相色谱法测定鲑降钙素喷鼻剂的含量及有关物质。方法:采用Vydac C_(18) 300A色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为0.363%氢氧化四甲基铵5H_2O-乙腈(40∶60)(用磷酸调节pH2.5);流动相为0.402%氢氧化四甲基铵5H_2O-乙腈(90∶10)(用磷酸调节pH2.5);进行二元梯度洗脱,流速1.0mL·min^(-1),检测波长220nm,柱温40℃。结果:RP-HPLC测定的线性范围为8.8～44μg·mL^(-1),相关系数r=0.999 7;低、中、高浓度样品的平均回收率(n=3)分别为100.4%(RSD=1.0%),99.5%(RSD=1.2%)和99.9%(RSD=1.6%)。结论:本方法专属性好、准确度高,适合于测定鲑降钙素喷鼻剂的含量及有关物质。