喉癌患者血浆及组织中长链非编码RNA的检测及临床意义

为研究长链非编码RNA(Long non-coding RNA,Lnc RNA)RP11-552E20.1-001在喉鳞状细胞癌患者血浆和组织中的表达水平及临床价值,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法,检测67例喉癌患者手术前后一周的血浆,以声带息肉患者血浆作对照,观察喉癌组织、转移的淋巴结和癌旁正常黏膜组织的表达情况,分析其与喉癌临床病理学特征的联系,构建受试者工作特征曲线(Receiver Operating Characteristic Curve,ROC),探讨其诊断价值.研究发现,喉癌患者血浆Lnc RNA表达水平高于声带息肉患者,且术后较术前显著降低;喉癌组织中该链表达较癌旁组织上调,转移的淋巴结比原发病灶表达水平更高;术前血浆及喉癌组织中该链表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移和TNM分期显著相关.ROC曲线下面积为0.734,其敏感性为80.6%,特异性为67.2%.提示该Lnc RNA可能是喉癌诊断的潜在标记物,并在喉癌的侵袭、转移过程中起重要作用.

绵羊肺炎支原体对人肺泡Ⅱ型上皮细胞活性及炎症反应的影响

为探究绵羊肺炎支原体(MO)是否对人体造成潜在影响,本研究以人肺泡Ⅱ型上皮细胞为细胞模型,将MO Y98株荧光染色后感染人肺泡Ⅱ型上皮细胞,于激光共聚焦显微镜下可见MO存在于细胞中;分别利用CCK-8及CellTiter-LumiTM试剂盒检测细胞的增殖及活力,结果显示MO对人肺泡Ⅱ型上皮细胞的增殖及活性均无显著影响;扫描电镜检测细胞形态,结果显示肺泡上皮细胞伪足明显增多;基因芯片分析筛选出3个mRNA及5个lncRNA,荧光定量PCR验证后确定SCNN1G、LOX、ST6GALNAC1及lncRNA RP11-29G8.3-001在MO感染后的转录水平发生显著变化;荧光定量PCR检测肺泡上皮细胞中IL-1β、TNF-α、IFN、IRF7等炎症因子,结果显示这些因子基因的转录水平无明显变化;采用将lncRNA RP11-29G8.3-001过表达的方法对其功能进行研究,结果显示少量lncRNA RP11-29G8.3-001表达增高不会调控细胞免疫相关基因的表达。本研究结果表明MO并不降低人肺泡Ⅱ型上皮细胞的增殖及活性,且MO对人肺泡Ⅱ型上皮细胞炎症因子的表达无显著影响,提示MO对人肺泡Ⅱ型上皮细胞影响较小。本研究为防范MO对人呼吸系统存在的潜在影响提供了实验依据。

lncRNA RP11-169D4.1-001对喉鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)RP11-169D4.1-001对喉鳞状细胞癌(LSCC)细胞增殖、凋亡、迁移等生物学行为的影响。方法使用慢病毒载体构建稳定过表达RP11-169D4.1-001的喉鳞癌细胞系,采用实时细胞分析、细胞克隆形成、流式细胞周期、流式细胞凋亡、细胞划痕实验、Transwell实验检测RP11-169D4.1-001在LSCC细胞增殖、凋亡、迁移中的作用。结果RP11-169D4.1-001在LSCC细胞增殖、迁移过程中发挥抑制作用。过表达RP11-169D4.1-001可抑制LSCC细胞增殖、迁移能力,将细胞周期阻滞在G0/G1期,诱导细胞凋亡。结论RP11-169D4.1-001在LSCC细胞增殖、凋亡、迁移等生物学行为中发挥抑癌作用,有望成为喉癌治疗的分子靶标。