螅状独缩虫(Cachesium polypinum)遗传多样性的RAPD分析

用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对武汉的汉口 (CP_1)、汉阳 (CP_2 )和武昌 (CP_3)三个地区缘毛类的螅状独缩虫 (Cachesiumpolypinum)进行了遗传多样性分析。结果表明 :这种动物存在广泛的变异 ,三个地域群体之间的遗传相似度为 0 .6 52 2～ 0 .7385(平均值为 0 .6 92 1) ,各群体之间遗传相似度大小依次为 :CP_2—CP_3>CP_1—CP_2 >CP_1—CP_3。本文对这些变异与环境的关系和以RAPD技术研究缘毛类等动物遗传多样性的意义作了分析与讨论。

RAPD方法在节瓜种子纯度鉴定中的应用初探

本文以节瓜种子为材料，用8种随机引物（10bP）对节瓜种子父本、母本及杂种一代的染色体组DNA进行RAPD扩增，发现有3条随机引物扩增出DNA片段，其中2条随机引物属于“偏父型”；1条随机引物属于“特异型”随机引物，另外5条随机引物没有扩增出DNA片段。由于随机引物扩增片段多态性的存在，因此可以使用该方法进行种子纯度鉴定。

离子注入诱变选育高产共轭亚油酸植物乳杆菌及RAPD分析

以青贮玉米中选育获得的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)ANCLA01作为出发菌株,采用单粒子精确定位注入技术对其进行离子注入,以筛选高产共轭亚油酸(CLA)的菌株;用30条随机引物对乳杆菌出发株和突变株的基因组DNA进行随机多态性技术(RAPD)分析,从分子水平考察出发菌株与突变菌株之间的差异。出发菌株AN-CLA01经离子注入,筛选获得正向突变菌株ANCLA02,结果显示,氮离子的注入使植物乳酸杆菌的CLA产量从33.44μg/mL提高到66.67μg/mL,且变异菌株经传5代培养后产CLA稳定。RAPD结果显示,有4条引物可以扩增出条带,有2条引物具有多态性,从而为利用单粒子注入技术选育高产CLA的植物乳杆菌提供初步的参考依据。

RAPD技术及其在蚊分类鉴定中的应用

在蚊分类研究中,长期以来大多是以形态特征作为分类的依据。然而许多复合体的相继发现及亲缘种的存在,使得单纯的形态学方法难以对其进行鉴别。分子生物学的发展,为蚊分类研究提供了新的思路和新的方法并已开始应用于蚊分类研究,弥补了传统分类方法的不足,可进行更为精确的蚊分类。随机引物扩增多态性DNA(RAPD)分析技术是90年代发展起来的一种以PCR为基础的DNA分析方法。本文介绍了该技术的原理、特点并综述了其在蚊分类中实际应用的一些例子。

不同土层土壤细菌的遗传多样性及其与环境因子的相关性

利用RAPD技术分析了浙江省天台山次生灌丛群落不同土层（G1层土深0～5cm、G2层土深5～10cm。G3层土深10～15cm）土壤细菌的遗传多样性及遗传分化．结果显示11种随机引物在27个土壤样品中共检测到168个可重复的位点，G1和G2土层的多态位点百分率均为88．10％，G3土层的多态位点百分率为87．50％，总的多态位点百分率达100％．Shannon信息指数和Nei基因多样性指数估算的不同土层的遗传多样性的高低顺序均为G1〉G2〉G3．不同土层细菌的遗传多样性与可培养细菌数量呈极显著的正相关，与土壤pH值呈显著性正相关，与其它土壤因子的相关性不大．Shannon信息指数与Nei基因多样性指数估算的结果都说明不同土层细菌群落大部分的变异存在于土层内，土层间的遗传分化很低．Nei指数估算的土层问的基因分化系数（Gst）为0．0701，不同土层间具有很高的基因流（Nm=6．63）．AMOVA分子变异分析显示在总的遗传变异中，3．90％的变异发生在土层间。96.10％的变异发生于土层内，土层问的遗传分化不显著（Φst=0．039，P〈0．001）．从土层间的遗传相似度来看，G1与G2两土层的遗传相似度最高．根据土壤细菌不同土层群落间的遗传距离，采用uPGMA法进行聚类，G1土层与G2土层先聚在一起，再与G3土层聚在一起．

薰衣草亲缘关系的RAPD分析

研究采用近年来从国外引种成功的10个薰衣草品种,通过RAPD技术进行亲缘关系的分析。结果表明,从20个随机引物中筛选出15个引物共扩增到364条扩增产物,平均每个引物扩增的DNA条带数为20.8条,产生的DNA片段大小分布在0.1～2.0 kb之间,其中309个条带具有遗传多态性,多态性比率高达99.38%;聚类分析结果显示:10个供试材料在遗传距离0.33处聚类为2大类,以穗状薰衣草组和法国薰衣草组聚在第1类,其中穗状薰衣草组的孟士德(L.angustifolia‘Munstead’)、英国(L.angustifolia)、玫瑰(L.angustifolia‘Rosea’)、Spira(L.angustifolia‘Spira’)、Grosso(L.×intermedia‘Grosso’)、未定名薰衣草聚在一起,法国薰衣草组的Helmsdale(L.stoechas‘Helmsdale’)、蝴蝶(L.stoechas pedunculata‘Fragrant Butterfly’)聚在一起;以齿叶(L.dentata)、Creek(L.lannata×L.dentata‘Goodwin Creek’)聚在第2类。证明RAPD分析结果是进行薰衣草种质资源分类评价的重要依据。

用随意扩增的DNA多态性鉴定中国分离的部分旋毛虫虫株

以旋毛虫（Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌａｓｐｉｒａｌｉｓ）国际标准虫种作对照，利用随意扩增的ＤＮＡ多态性技术对国内的部分旋毛虫分离株进行了鉴定与分析。经５条引物的单扩增及复合扩增结果显示，中国的旋毛虫猪株为Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ，犬株为Ｔ．ｎａ－ｔｉｖａ，猫株为Ｔ．ｎｅｌｓｏｎｉ。

核桃DNA的提取及RAPD分析的引物筛选

以核桃叶片为材料,对其DNA提取方法和RAPD引物的筛选进行了研究。结果表明,采用核沉淀法从核桃叶片中能提取到高质量的DNA,可以用于RAPD分析;从120条随机引物中筛选出了14条显示核桃遗传差异的多态性引物。

赤苍藤RAPD-PCR体系的建立与应用

为揭示赤苍藤的遗传变异情况,本研究采用RAPD-PCR技术对来自18个地区的野生赤苍藤品种进行了遗传多样性分析。通过正交试验和单因素试验确定RAPD-PCR扩增体系的总体积为25.0μL,其中:引物2.0μL;DNA 2.0μL;Master Mix 12.5μL。使用优化后的PCR扩增体系筛选出13条多态性好重复性高的引物,共扩增位点95,多态性位点77,多态百分比为80.55%,遗传相似性系数在0.55~0.86之间,遗传距离范围为0.12~0.60,当遗传相似性系数为0.71时可分为5大类,表明赤苍藤遗传多样性较为丰富且种群内存在较大差异,为优异品种的筛选及开发提供理论基础。