降钙素基因相关肽衍生物的制备及降血压功能研究

用PCR法将人的降钙素基因相关肽 (calcitoningenerelated peptide ,CGRP)基因克隆到表达载体 pGEX 4T 2的GST基因后 ,构建成一个新的表达质粒pGEX CGRP .另外分别将 2个有降压功能的小肽HHL和RPLKPW的基因克隆到CGRP基因后 ,构建成 2个表达质粒 pGEX CGRP 3AA和 pGEX CGRP 6AA .将此 3个表达质粒转化到大肠杆菌TG1中 ,获得 3个高表达的融合蛋白 :GST CGRP ,GST CGRP HHL ,GST CGRP RPLKPW ;通过GlutathioneSepharose 4B亲和层析纯化融合蛋白 ,测定蛋白浓度 ,利用自发性高血压大鼠 (spon taneouslyhypertensiverat,SHR)来检测蛋白的降血压功能 ,发现融合蛋白GST CGRP HHL具有显著的降压效果 ,能使舒张压下降 8.0kPa ,且降压维持时间延长 ,达到 70min以上 .