人多发性骨髓瘤细胞株RPM18226细胞对共培养内皮细胞的作用

【摘要】目的在体外共培养体系中研究人多发性骨髓瘤（MM）细胞对人正常内皮细胞的作用。方法建立人MM细胞株RPM18226细胞与正常人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的体外共培养体系；以同期单独培养的HUVEC为对照，用电子显微镜和光学显微镜对与RPM18226细胞共培养的HUVEC进行细胞超微结构和细胞形态学观察；用刮痕迁移实验、管状结构形成实验评价体外内皮细胞血管新生的能力；并以Western blot和流式细胞术分别检测脑源性神经营养凶子（BDNF）、Endoglin与TrkB、Tie2、B3整合素、血管细胞黏附分子－1蛋白的表达。结果与同期单独培养的正常内皮细胞对照相比，共培养后的部分内皮细胞胞体伸展并首尾排列成一行；超微结构m现胞核增大、核r增大、核质比例增大，内质网疏松、变形，细胞表面纤毛减少；共培养体系中细胞管状结构形成数量和迁移细胞数较单独培养体系分别增加了112％和136％；BDNF、Endoglin、TrkB、Tie2、B，整合素和血管细胞黏附分子－1蛋白的表达亦明显上调。结论MM细胞与人正常内皮细胞共培养后，内皮细胞有明显的趋瘤特征和较强的血管新生能力，推测MM患者骨髓中骨髓瘤细胞通过对相邻内皮细胞的作用促进血管新生，且新生血管的内皮细胞性质与行为不同于正常内皮细胞。

姜黄素对人多发性骨髓瘤细胞的抑制作用及其机制

目的:探讨姜黄素(curcumin)对人多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞H929、RPMI8226的抑制作用及其机制。方法:姜黄素处理细胞后,采用MTT法检测细胞的增殖抑制作用;FCM分析细胞凋亡和周期的变化;RT-PCR法检测存活蛋白(survivin)、Bcl-2和Bax mRNA表达的变化。结果:姜黄素可抑制细胞H929和RPMI8226的增殖,并呈时间和浓度依赖性。姜黄素诱导RPMI8226细胞凋亡,发生G2/M期阻滞。姜黄素处理H929和RPMI8226细胞后,survivin和Bcl-2 mRNA的表达明显下调,而Bax mRNA的表达明显上调。结论:姜黄素可抑制人MM细胞增殖并诱导其凋亡,推测姜黄素在转录水平影响survivin、Bcl-2、Bax的表达,可能是其抑制肿瘤的作用机制之一。

蛋白酶体抑制剂诱导多发性骨髓瘤RPMI8226细胞凋亡及对Notch1和NF-κB表达的影响

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的发生、发展与骨髓微环境关系密切,有多种信号通路参与。Notch信号是造血微环境调节造血细胞增殖分化的重要信号通路,其中Notch1与血液肿瘤的发生、发展较为密切。骨髓瘤是高度依赖NF-κB的恶性肿瘤,后者与肿瘤细胞的发生和转移、增殖和凋亡、耐药相关。已证实NF-κB2家族是Notch信号通路的一个靶基因。蛋白酶体抑制剂Bortezomib已获美国FDA批准用于治疗难治及复发多发性骨髓瘤,但其诱导骨髓瘤细胞凋亡的机制尚未完全明确。本研究探讨bortezomib诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡和对Notch1、NF-κB表达水平的影响,采用透射电子显微镜检、流式细胞术及原位缺口末端标记技术观察药物对MM细胞凋亡的影响,用RT-PCR法和免疫荧光细胞化学染色分析分别检测细胞凋亡时Notch1及NF-κB的表达情况。结果表明:RPMI8226细胞高表达Notch1和NF-κB;随着bortezomib作用浓度的增高,RPMI8226细胞出现典型的凋亡改变,Notch1的表达逐渐降低,NF-κB在胞核表达减少,胞浆表达增多。这种改变在浓度升高到一定数值时与对照相比具有显著性差异(p<0.05)。结论:bortezomib治疗多发性骨髓瘤机制中有Notch1和NF-κB两条通路的参与,二者可能存在一定的联系,提示Notch1信号可能作为MM治疗的潜在靶点,为相关新药的研发提供一定实验基础。