RPMI 1640培养基体外培养结肠小袋纤毛虫的研究

试验旨在建立结肠小袋纤毛虫RPMI 1640培养方法,为进一步研究其生活史及致病机制奠定基础。研究不同淀粉含量、不同血清含量、不同初始pH及不同接种量下RPMI 1640培养结肠小袋纤毛虫的培养效果。结果发现,用RPMI 1640培养结肠小袋纤毛虫,最适宜的淀粉含量为30 mg/安瓿,血清含量为20%,pH为7.0;种群自然增长率和种群所达到的最高种群密度随接种量的不同而明显改变。RPMI 1640培养基可用于结肠小袋纤毛虫的体外培养。

RPMI 1640培养基对水螅体表渗透营养的初步观察

首次选用RPMI 1 64 0培养基培养具较大相对面积的小水生生物水螅 ,以便探讨有关水生动物渗透营养等问题。通过稀释一定倍数的RPMI1 64 0加无机盐补液及新生牛血清等方法培养出体长及生存时间均优于对照组的水螅。通过渗透营养方式培养水螅具有操作简单、易观察 ,能为细胞培养做准备试验 ,为培养无菌动物创造条件等优点。

RPMI 1640、漏出液培养人外周血淋巴细胞的比较研究

目的:筛选一种适宜人淋巴细胞生长的天然培养基。方法:在冰冻漏出液中添加不同浓度的小牛血清为实验组的培养液,以培养基RPMI 1640作为对照组,体外常规培养25例人外周血淋巴细胞。结果:与对照组比较,实验组的淋巴细胞转化率、分裂相质量、有丝分裂指数等指标无显著差异;不含血清的漏出液与含血清的漏出液比较,淋巴细胞转化率、分裂相质量、有丝分裂指数等指标无显著差异。结论:不添加血清的漏出液更适宜淋巴细胞生长。

人芽囊原虫在RPMI1640及LES培养中的比较

寻求一种在人芽囊原虫培养方面比传统的洛克氏液 鸡蛋 血清培养基(Locke′s egg serummedium ,LES)更优越的培养基 ,建立人芽囊原虫的纯培养系 ,为进一步研究人芽囊原虫的各种特性奠定基础 .将从临床获得的腹泻病人粪便标本分别接种于RPMI164 0及LES两种培养基中进行人芽囊原虫的培养 ,观察人芽囊原虫在两种培养基内的生长趋势和形态结构 ,比较两种培养基的优缺点 .结果表明 ,RPMI164 0培养管中的虫体密度比较高 ;RPMI164 0培养基中的虫体存活时间比较长 ;RPMI164 0培养基内可见空泡型、颗粒型、复分裂型和似包囊型 .结论表明 ,RPMI164 0培养基比LES培养基在人芽囊原虫的培养方面更优越 .

人芽囊原虫在RPMI1640培养基中培养条件的优化

目的优化人芽囊原虫(Blastocystishominis)在RPMI1640培养基中的培养条件。方法将B.hominis接种至RPMI1640培养基中,观察酸碱度、接种量、血清种类、浓度、温度、空气中氧与粪便标本的选择对B.hominis生长的影响。结果在RPMI1640培养基中,pH7.5、接种量200000细胞/管、20%小牛血清,37℃,加入青霉素、链霉素为最佳培养条件。结论在RPMI1640中,接种以B.hominis阳性(颗粒型为主)的血粘液便,加入20%小牛血清,青霉素、链霉素,在pH7.5于37℃条件下厌氧培养,每6d转种一次,可达到长期培养B.hominis的目的。

RPMI1640培养液在阴道滴虫培养中的应用

目的：评价ＲＰＭＩ１６４０培养液在阴道滴虫体外培养中的应用效果。方法：在ＲＰＭＩ１６４０培养液中加入其它成份，配制成新的阴道滴虫培养基。观察其对阴道滴虫的培养效果。并与ＣＰＬＭ培养基作比较。结果：滴虫在两种培养基中的增殖倍数有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。在临床标本分离方面与ＣＰＬＭ培养基无明显差异，但在保种时间上比ＣＰＬＭ培养基较长。

恶性胸膜间皮瘤细胞培养条件及CDKN2B对癌细胞的作用

目的探讨不同培养条件(RPMI-1640、DMEM和DMEM/F12培养液)对人恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)组织中分离的MPM细胞传代的影响以及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B(cyclin dependent kinase inhibitor 2B,CDKN2B)对MPM细胞增殖、侵袭和凋亡的作用。方法从MPM组织中分离细胞分别用RPMI-1640、DMEM和DMEM/F12培养液培养。CCK-8检测细胞增殖,细胞核及染色体利用瑞氏-吉姆萨染色观察,免疫荧光实验检测MPM标志物Calretinin、CD141、CK5、EMA和WT-1荧光强度。RT-qPCR和Western blot分别检测CDKN2B的mRNA和蛋白表达能力。Transwell检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果建立的MPM细胞在RPMI-1640、DMEM和DMEM/F12培养液中传至第10代仍具有较好的活力,且MPM标志物Calretinin、CD141、CK5、EMA和WT-1在细胞中均表达,MPM细胞在RPMI-1640培养液中活力较为稳定。CDKN2B在MPM细胞中低表达(P<0.05),过表达CDKN2B显著抑制MPM细胞的增殖(P<0.05)、侵袭(P<0.05)和上皮间质转化(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01)。结论建立的MPM细胞可在RPMI-1640培养液中稳定传代,CDKN2B可作为MPM诊断和治疗的潜在靶标。

改良RPMI1640培养基对CIK细胞增殖的影响

目的探讨改良RPMI1640培养基对CIK细胞体外增殖的影响,为临床治疗提供质量好、数量多的CIK细胞。方法用淋巴细胞分离液提取淋巴细胞,分别采用传统RPMI1640培养基和改良RPMI1640培养基培养,于培养当天及3、6、9、12、15、18d,采用台盼蓝拒染法计数细胞,检测细胞的增殖水平;流式细胞术分析细胞表型;MTT法检测CIK细胞的体外细胞毒活性。结果培养至第12天后,改良培养基培养条件下,CIK细胞的增殖倍数明显高于传统培养基培养的CIK细胞(P<0.05);CD3+CD56+细胞比例达33%以上;培养15d,对BGC-823和SPC-A-1细胞的细胞毒活性均高于传统培养基。结论改良RP-MI1640培养基较传统RPMI1640培养基可更好地促进CIK细胞增殖,为其临床应用提供了试验数据。

人芽囊原虫在不同培养基中生长状况的观察

目的筛选培养人芽囊原虫的最适培养基。方法将同一株人芽囊原虫阳性粪便标本以2×105细胞/管接种至RPMI1640、199和LES培养基中,加入20%小牛血清及青、链霉素,pH值为7.5,放置厌氧罐中于37℃恒温培养,每24h计数,每6d转种1次。观察人芽囊原虫在3种培养基中的存活时间、虫体密度和虫体形态。结果人芽囊原虫在RPMI1640培养基中存活时间最长、虫体密度最高,虫体以空泡型多见;在LES培养基中存活时间最短、虫体密度最低,但虫体形态清晰、规则;在199培养基中存活时间和虫体密度均介于前两者之间。结论RPMI1640培养基适宜人芽囊原虫的生长繁殖,为人芽囊原虫体外培养的首选培养基;LES培养基中虫体形态清晰、规则,可用于人芽囊原虫的形态学研究;199培养基也可用于人芽囊原虫的体外培养,但不作为首选。

MTT肿瘤药敏试验中培养基的选择

目的考察RPMI1640双琼脂培养基(R)对肿瘤细胞培养的选择性,选择适合的MTT法培养基。方法用R和肿瘤细胞选择性培养基(completeassaymedium,CAM)分别进行乳腺、肠、胃癌的MTT药敏试验。结果所试的3个癌种、20个药品总体来说在两种培养基中抑制率无统计学差异(P>0.05),单个药敏在乳腺癌中长春新碱、长春地辛和吡柔比星的CAM培养抑制率大于R培养(P<0.05),在肠、胃癌中无统计学差异。结论R培养肿瘤细胞的选择性和CAM相当,但鉴于R抑制成纤维细胞能力相对比CAM弱,R可能更适合含纤维细胞较少的癌种。

两种培养液对Beagle犬牙龈成纤维细胞生物学活性的影响

目的探讨两种常见培养液:DMEM和RPMI1640对Beagle犬牙龈成纤维细胞生物学活性的影响。方法使用半消化+改良组织块法原代培养Beagle犬牙龈成纤维细胞,了解两种培养液下Beagle犬牙龈成纤维细胞游出成功率的差异;使用MTT、流式细胞仪检测两种培养液下细胞增生的情况;使用免疫细胞化学的方法检测两种培养液下Beagle犬牙龈成纤维细胞体外表达Ⅰ型胶原的差异。结果 DMEM和RPMI1640对Beagle犬牙龈成纤维细胞的游出成功率、增生以及Ⅰ型胶原的表达均无显著性差异。结论 DMEM和RPMI1640两种培养液均适合Beagle犬牙龈成纤维细胞的培养。

不同培养基对人外周血单核细胞来源树突状细胞发育的影响

本研究旨在探讨RPM I1640和IMDM两种培养液对诱导人外周血单核细胞向树突状细胞(DC)发育分化的影响。利用GM-CSF+IL-4细胞因子组合,在培养条件一致的前提下,改变培养液种类,通过对成熟、未成熟DC形态观察,用流式细胞术检测细胞表型和吞噬能力、应用混合淋巴细胞反应(MLR)检测其刺激T细胞的增殖能力,用悬浮芯片技术检测DC与同种异体T细胞共培养后上清中所含细胞因子的变化,分析不同培养液对DC功能的影响。研究结果表明,两种培养液培养所得的DC在形态上无显著差异,DC的吞噬能力以及CD14和CD83的表达亦无显著差异,但应用IMDM培养的DC的CD1a表达明显降低,且对T细胞增殖的刺激能力也显著降低;IMDM培养的DC高表达IL-6、IL-8和IL-10,而IL-12的表达则显著降低。结论:不同的培养体系可获得功能不同的DC,IMDM培养的DC可能与免疫耐受有关,本研究结果为DC在临床上的应用提供了新思路。

RPMI-1640和DMEM/F12培养基对大鼠颈环上皮细胞培养的比较研究

目的:比较大鼠颈环上皮细胞在不同培养基中的生长状况。方法:分离培养大鼠颈环上皮细胞,分别采用RPMI-1640和DMEM/F12两种培养基培养,用倒置显微镜观察细胞的生长状态,MTT比色法检测细胞增殖活性。结果:倒置显微镜下,两组细胞在接种24 h后细胞大量贴壁并伸展,14 d时RPMI-1640组细胞呈现明显的凋亡现象,DMEM/F12组细胞生长状态良好。两种方法培养的颈环上皮细胞增殖活性差异有显著性意义(P﹤0.05)。结论:DMEM/F12培养基较RPMI-1640更适合颈环上皮细胞的贴壁及增殖。

口腔修复非贵金属材料对L-929细胞凋亡的影响

细胞外部因素通过信号传递而影响基因的表达从而间接地调节细胞凋亡。本实验利用流式细胞仪，检测口腔修复非贵金属材料对L-929细胞凋亡的影响。1材料与方法1．1主要试剂与仪器：纯钛（西北有色金属研究院），钛合金（日本），钴铬合金（德国），镍铬合金（德国），铜基合金（四川大学材料成型及控制系），RPMI1640培养基（Invitrogen公司）．胎牛血清（FBS，杭州四季青生物工程材料研究所），胰蛋白酶（Sigma．德国）．AnnexinV—EGFP试剂盒（北京宝赛），

曲古菌素A处理HeLa细胞对其培养基的吸收光谱影响

本研究采集了不同剂量曲古菌素A(TSA)分别处理24h和48h下的人宫颈癌细胞株(HeLa cell)的培养基RPMI1640的紫外吸收光谱。结果显示:细胞培养基分别在233nm和275nm处有特征性的吸收峰。数据的进一步分析发现:不同剂量的TSA在处理细胞时间一致时,培养基的吸收光谱存在明显的差别。即:1)当TSA处理细胞24小时,伴随着用药剂量的增大,细胞培养基在233nm处的吸收值先降后升,275nm处的吸收值同样先降后升:2)当TSA处理细胞48小时,伴随着用药剂量的增大,细胞培养基在233nm处的吸收值越来越低,275nm处的吸收值却越来越高。这一结果反映了培养基中芳香族氨基酸和半胱氨酸残基的含量及比例变化,其变化规律与药物引起细胞的增殖改变有着密切的联系,并为动物实验和临床应用奠定了基础。

原代培养冷冻兔角膜缘上皮细胞的增殖活性研究

为探讨低温保存的兔角膜缘上皮细胞体外培养方法和增殖活性,采用不同的冷冻条件保存兔角膜缘上皮组织;通过若丹明B染色方法定量检查体外培养的原代细胞增殖活性,并对含血清培养和无血清培养、消化培养和组织块培养进行比较性研究。结果表明,二甲基亚砜浓度梯度和降温速率对冷冻角膜缘上皮原代细胞的增殖能力均无显著性影响(P>0.05)。在细胞增殖活性上,血清培养组优于无血清培养组(P<0.05); 组织块培养组优于消化培养组(P<0.05);RPMI 1640组优于MEM组和DMEM组(P<0.05);3T3细胞滋养层组与臣噬细胞滋养层组结果相似(P>0.05)。结论:兔角膜缘上皮细胞具有血清依赖性和低温耐受性。

习惯性流产夫妇的细胞遗传学研究

用RPMI1640培养基，采用微量全血培养法，对58对流产夫妇外周血淋巴细胞染色体不稳定性进行了研究，结果发现有7例核型异常，占受检人数的6.03％，其中男性1例，女性6例，异常核型中平衡易位5例，倒位1例，缺失1例。本研究结果，染色体异常率6．03％稍高于平均值（4．90％），与khudr综述中总结流产夫妇染色体异常发生率的6.20％比较接近，远远高于正常群体染色体异常率0.50％，由此可见，习惯性流产和染色体异常密切相关。

LY294002靶向抑制PI3K／Akt信号通路干预胃癌细胞生长的研究

我们通过体外细胞实验，探讨LY294002特异性靶向抑制胃癌细胞P13K活性，抑制增殖、诱导凋亡的作用及可能机制。 一、材料与方法 1.材料：（1）细胞株：胃癌细胞系SGC7901由本实验室传代培养，含10％小牛血清的RPMI1640培养基，在37℃、5％CO2培养箱中培养，2～3d更换培养基1次。（2）试剂与仪器：P13K抑制剂LY294002为美国Promega公司产品，用前稀释成所需的浓度。