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lncRNA RPPH1通过调控miR-326/TCF4信号通路影响胃癌细胞增殖和迁移的机制研究
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作者 符亮 钟静 +1 位作者 邓小康 雷明华 《国际消化病杂志》 CAS 2023年第4期234-240,共7页
目的探究长链非编码RNA(lncRNA)RPPH1(下文简称RPPH1)对胃癌细胞增殖和迁移的影响及作用机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRTPCR)法检测人胃癌细胞BGC-823、MGC-803、AGS、SGC-7901、MKN-45,以及人正常胃上皮细胞GES-1中RPPH1的表达水平... 目的探究长链非编码RNA(lncRNA)RPPH1(下文简称RPPH1)对胃癌细胞增殖和迁移的影响及作用机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRTPCR)法检测人胃癌细胞BGC-823、MGC-803、AGS、SGC-7901、MKN-45,以及人正常胃上皮细胞GES-1中RPPH1的表达水平。收集2019年6月至2021年8月在三亚市人民医院接受胃癌切除术的30例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁正常组织标本,采用qRT-PCR法检测组织中RPPH1和miR-326的表达水平,采用蛋白质印迹法检测组织中TCF4的表达水平。采用双荧光素酶报告基因实验检测RPPH1与miR-326、miR-326与TCF4的靶向关系。应用GraphPad Prism 7.0软件分析RPPH1、miR-326和TCF4表达水平的相关性。将MGC-803细胞分为Control组、si-RPPH1组、si-RPPH1+miR-326 inhibitor组和si-RPPH1+miR-326 inhibitor+siTCF4组,采用CCK-8法检测各组细胞的增殖能力,采用Transwell小室法检测各组细胞的迁移和侵袭能力。结果RPPH1在人胃癌组织及人胃癌细胞BGC-823、MGC-803、AGS、SGC-7901和MKN-45中均呈高表达。双荧光素酶报告基因实验检测结果显示,miR-326是RPPH1的靶基因,TCF4是miR-326的靶基因。胃癌组织中RPPH1与miR-326的表达水平呈负相关(r=-0.504,P<0.001),RPPH1与TCF4的表达水平呈正相关(r=0.672,P<0.001),而miR-326与TCF4的表达水平呈负相关(r=-0.499,P<0.001)。与Control组比较,si-RPPH1组的细胞增殖能力、迁移能力和侵袭能力均显著减弱,TCF4的表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);与si-RPPH1组比较,si-RPPH1+miR-326 inhibitor组的细胞增殖能力、迁移能力和侵袭能力均显著增强,TCF4的表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P均<0.05);与si-RPPH1+miR-326 inhibitor组比较,si-RPPH1+miR-326 inhibitor+siTCF4组的细胞增殖能力、迁移能力和侵袭能力均显著减弱,TCF4的表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论RPPH1在胃癌组织和胃癌细胞中均呈高表达,并可能通过调控miR-326/TCF4信号通路影响胃癌细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 胃癌 rpph1 增殖 迁移
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lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1在急性淋巴细胞白血病患儿血清中的表达水平及相关性分析
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作者 张君利 《河南医学高等专科学校学报》 2023年第6期689-692,共4页
目的 探讨长链非编码RNA MAGF-AS1(lncRNA MAFG-AS1)、长链非编码RNA RPPH1(lncRNA RPPH1)在急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia, ALL)患儿血清中的表达水平,并分析其与病理学参数的相关性。方法 选取83例ALL患儿作为ALL... 目的 探讨长链非编码RNA MAGF-AS1(lncRNA MAFG-AS1)、长链非编码RNA RPPH1(lncRNA RPPH1)在急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia, ALL)患儿血清中的表达水平,并分析其与病理学参数的相关性。方法 选取83例ALL患儿作为ALL组,83例非恶性血液病患儿作为非恶性血液病组,同期83例健康体检儿童作为对照组。比较3组研究参与者入院时血清lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1表达水平,不同病理学参数ALL患儿血清lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1表达水平比较,分析血清lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1表达水平与病理学参数的相关性,受试者操作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1表达水平联合检测对ALL的诊断价值。结果 入院时ALL组血清lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1表达水平>非恶性血液病组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ALL患儿血清lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1表达水平比较:白细胞计数<50×10^(9)L^(-1)患儿低于白细胞计数≥50×10^(9)L^(-1)患儿,乳酸脱氢酶(LDH)水平<250 U·L^(-1)患儿低于LDH水平≥250 U·L^(-1)患儿,有淋巴结肿大患儿高于无淋巴结肿大患儿,低危型患儿<中危型患儿<高危型患儿(P<0.05);ALL患儿血清lncRNA MAFG-AS1表达水平与白细胞计数、LDH水平、淋巴结肿大、危险度分层呈正相关(r=0.671、0.699、0.704、0.583,P<0.05);ALL患儿血清lncRNA RPPH1表达水平与白细胞计数、LDH水平、淋巴结肿大、危险度分层呈正相关(r=0.711、0.645、0.596、0.607,P<0.05);以ALL患儿为阳性标本,以非恶性血液病患儿为阴性样本,绘制ROC曲线,入院时血清lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1表达水平联合诊断ALL的曲线下面积(AUC)为0.802(95%CI:0.746~0.863),优于各指标单一诊断。结论 血清lncRNA MAFG-AS1、lncRNA RPPH1表达水平与ALL患儿病理学参数有关,二者联合检测对ALL诊断具有较高价值。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 lncRNA MAFG-AS1 lncRNA rpph1 相关性
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干扰及过表达Rpph1对高糖作用的肾小管上皮细胞生物行为的影响 被引量:1
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作者 卢迪 黎瑶 +1 位作者 李婷 邱平 《中国中西医结合肾病杂志》 2021年第10期861-864,共4页
目的:探讨Rpph1对高糖作用的肾小管上皮细胞生物行为的影响。方法:将HK2细胞随机分为对照组、高糖组、高糖+pcDNA3.1组、高糖+pcDNA3.1-Rpph1组、高糖+si-NC组、高糖+si-Rpph1组、高糖+si-Rpph1+si-NC组、高糖+si-Rpph1+si-HuR组。实时... 目的:探讨Rpph1对高糖作用的肾小管上皮细胞生物行为的影响。方法:将HK2细胞随机分为对照组、高糖组、高糖+pcDNA3.1组、高糖+pcDNA3.1-Rpph1组、高糖+si-NC组、高糖+si-Rpph1组、高糖+si-Rpph1+si-NC组、高糖+si-Rpph1+si-HuR组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Rpph1和HuR mRNA表达水平;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡。结果:高糖作用的肾小管上皮细胞中Rpph1、HuR表达水平升高,P21、Caspase-3、Vimentin表达水平升高,E-cadherin表达水平降低,细胞存活率降低,细胞凋亡率升高(P<0.05)。过表达Rpph1促进细胞凋亡,抑制细胞存活;而干扰Rpph1表达与过表达Rpph1的作用相反。抑制HuR表达增强了抑制Rpph1对高糖作用的肾小管上皮细胞存活率、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。结论:干扰Rpph1表达可能通过下调HuR抑制高糖作用的肾小管上皮细胞凋亡和EMT。 展开更多
关键词 rpph1 HUR 高糖 肾小管上皮细胞 增殖 凋亡 上皮间质转化
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长链非编码RNA Rpph1对高糖培养的肾小球系膜细胞炎症因子表达的影响 被引量:6
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作者 张攀扬 孙艳 +2 位作者 彭睿 彭惠民 张政 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期33-40,共8页
目的探讨长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA) Rpph1对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾小球系膜细胞炎症因子的影响。方法采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测Rpph1细胞定位,实时定量PCR (qu... 目的探讨长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA) Rpph1对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾小球系膜细胞炎症因子的影响。方法采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测Rpph1细胞定位,实时定量PCR (quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测Rpph1在DN小鼠肾脏组织和系膜细胞中的水平;生物信息学技术预测Rpph1的编码蛋白能力。构建Rpph1的过表达质粒,并设计合成Rpph1的siRNAs,用qRT-PCR验证其转染效率。在高糖培养的肾小球系膜细胞中转染Rpph1-siRNA;在低糖培养的肾小球系膜细胞中转染Rpph1过表达质粒,通过Western blot检测转染Rpph1的siRNA和过表达Rpph1后肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα,TNF-α)以及单核细胞趋化蛋白-1(macrophage cationic peptide 1,MCP-1)的表达情况。结果与正常小鼠比较,Rpph1在DN小鼠肾脏组织中显著上调(P <0. 01);同样,高糖培养的系膜细胞中Rpph1表达较低糖培养的系膜细胞显著上调(P <0. 01),其主要定位于系膜细胞的细胞质。此外,生物信息学证实Rpph1不具有编码蛋白的能力。且过表达Rpph1后炎症相关因子TNF-α和MCP-1的水平明显上调(P <0. 05);在下调Rpph1后,炎症相关因子TNF-α和MCP-1的表达也随之下降(P <0. 05)。结论在DN小鼠肾脏组织和高糖环境下的系膜细胞中lncRNA Rpph1显著高表达,且增强炎症相关因子的表达。Rpph1可能与糖尿病肾病炎症的发生相关。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 长链非编码RNA rpph1 肾小球系膜细胞 炎症
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Value of long non-coding RNA Rpph1 in esophageal cancer and its effect on cancer cell sensitivity to radiotherapy 被引量:16
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作者 Zhen-Yang Li Hui-Fen Li +3 位作者 Ying-Ying Zhang Xue-Lan Zhang Bing Wang Jiang-Ting Liu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2020年第15期1775-1791,共17页
BACKGROUND Esophageal cancer is a common digestive tract tumor that is generally treated with radiotherapy.Poor responses to radiotherapy in most patients generally result in local radiotherapy failure,so it is essent... BACKGROUND Esophageal cancer is a common digestive tract tumor that is generally treated with radiotherapy.Poor responses to radiotherapy in most patients generally result in local radiotherapy failure,so it is essential to find new radiosensitizers that can enhance the response of cancer cells to radiotherapy and improve the survival of esophageal cancer patients with radiation resistance.The long noncoding RNA(lncRNA)Rpph1 is highly expressed in human gastric cancer tissues,and represses breast cancer cell proliferation and tumorigenesis.However,the expression of lncRNA Rpph1 in esophageal cancer and its relationship with radio-sensitivity has not been studied.AIM To explore the value of lncRNA Rpph1 in esophageal cancer and its effect on cancer cell sensitivity to radiotherapy.METHODS Eighty-three patients with esophageal cancer admitted to Qilu Hospital of Shandong University and 90 healthy participants who received physical examinations were collected as research participants.The expression of Rpph1 was determined by qRT-PCR.siRNA-NC and siRNA-Rpph1 were transfected into esophageal cancer cell lines,and cells without transfection were designated as the blank control group.Cell survival was tested by colony formation assays,and the levels of proteins related to apoptosis and epithelial-mesenchymal transitions were determined by Western blot assays.Cell proliferation was assessed by MTT assays,cell apoptosis by flow cytometry,and cell migration by wound-healing assays.Changes in cell cycle distribution were monitored.RESULTS Rpph1 was highly expressed in esophageal carcinoma,making it a promising marker for the diagnosis of esophageal cancer.Rpph1 could also be used to distinguish different short-term responses,T stages,N stages,and clinical stages of esophageal cancer patients.The results of 3-year overall survival favored patients with lower Rpph1 expression over patients with higher Rpph1 expression(P<0.05).In vitro and in vivo experiments showed that silencing Rpph1 expression led to higher sensitivity of esophageal cancer cells to radiotherapy,stronger apoptosis in esophageal cancer cells induced by radiotherapy,higher expression of Bax and caspase-3,and lower expression of Bcl-2(Bax,caspase-3,and Bcl-2 are apoptosis-related proteins).Additionally,silencing Rpph1 attenuated radiation-induced G2/M phase arrest,and significantly inhibited the expression of proteins involved in cell proliferation,migration,and epithelial-mesenchymal transition regulation in esophageal cancer cells.CONCLUSION Rpph1 is highly expressed in esophageal cancer.Silencing Rpph1 expression can promote cell apoptosis,inhibit cell proliferation and migration,and increase radio-sensitivity. 展开更多
关键词 Long NON-CODING RNA rpph1 Esophageal cancer CELL sensitivity to RADIOTHERAPY Apoptosis CELL cycle Epithelial-mesenchymal transition
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血清长链非编码RNA Rpph1表达对2型糖尿病患者蛋白尿进展的预测价值研究 被引量:4
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作者 吴翔 毛盛程 陈浪 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第3期16-20,共5页
目的探讨血清长链非编码RNA(lncRNA)Rpph1表达对2型糖尿病患者蛋白尿进展的预测价值。方法选取2016年1月—2018年1月在浙江省立同德医院内分泌科因控制血糖重复住院治疗的2型糖尿病患者268例。根据首次、再次入院时24 h尿蛋白定量水平... 目的探讨血清长链非编码RNA(lncRNA)Rpph1表达对2型糖尿病患者蛋白尿进展的预测价值。方法选取2016年1月—2018年1月在浙江省立同德医院内分泌科因控制血糖重复住院治疗的2型糖尿病患者268例。根据首次、再次入院时24 h尿蛋白定量水平将患者分为蛋白尿进展组62例和蛋白尿非进展组206例。比较两组首次入院的临床资料;采用多因素Logistic回归分析2型糖尿病患者蛋白尿进展的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA Rpph1表达对2型糖尿病患者蛋白尿进展的早期预测价值。结果两组患者的糖尿病病程、合并高血压、使用二甲双胍及Scr、血尿酸、lncRNA Rpph1水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。合并高血压[OR=3.271(95%CI:1.864,3.872)]、使用二甲双胍[OR=2.192(95%CI:1.253,2.413)]及Scr水平[OR=1.873(95%CI:1.211,2.063)]、血尿酸水平[OR=2.321(95%CI:1.432,2.784)]、lncRNA Rpph1相对表达量[OR=2.621(95%CI:1.732,3.064)]是2型糖尿病患者蛋白尿进展的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,首次入院血清lncRNA Rpph1相对表达量预测蛋白尿进展发生的最佳截断值为0.564,AUC为0.800(95%CI:0.742,0.858),敏感性为67.48%(95%CI:0.517,0.784),特异性为82.26%(95%CI:0.684,0.935)。结论血清lncRNA Rpph1相对表达量较高是2型糖尿病患者蛋白尿进展的独立危险因素之一,其对蛋白尿进展具有一定的预测价值。 展开更多
关键词 2型糖尿病 蛋白尿 短期进展 长链非编码RNA rpph1
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慢病毒载体介导的长链非编码RNA Rpph1沉默对胆囊癌GBC-SD细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响 被引量:1
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作者 杨隆良 郭虎林 马瑜 《安徽医药》 CAS 2021年第9期1792-1796,共5页
目的研究长链非编码RNA(lncRNA)Rpph1对胆囊癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响和潜在机制。方法以人胆囊上皮细胞HGBEC为对照,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测胆囊癌细胞系GBC-SD、SGC-996和NOZ中lncRNARpph1的表达。将GBC... 目的研究长链非编码RNA(lncRNA)Rpph1对胆囊癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响和潜在机制。方法以人胆囊上皮细胞HGBEC为对照,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测胆囊癌细胞系GBC-SD、SGC-996和NOZ中lncRNARpph1的表达。将GBC-SD细胞分为对照组、si-con组、si-lncRpph1组。蛋白质印迹法检测周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、Ki-67、剪切型胱天蛋白酶3(Cleavedcaspase-3)、剪切型胱天蛋白酶9(Cleavedcaspase-9)、β连环素(β-catenin)和c-Myc蛋白表达水平,细胞计数试剂盒(CCK-8)法和流式细胞术分别检测细胞增殖、细胞周期和凋亡率。结果与对照相比,胆囊癌细胞系GBC-SD、SGC-996和NOZ组细胞中lncRNARpph1含量[(4.89±0.31)、(3.42±0.42)、(3.96±0.45)比(1.07±0.13)]显著升高(P<0.05);与si-con组比较,si-lncRpph1组GBC-SD细胞活力[(0.78±0.08)比(1.17±0.13)]降低,凋亡率[(12.89±1.96)%比(4.26±0.65)%]、G0~G1期细胞比例[(63.67±2.62)%比(52.57±1.32)%]升高,CDK2[(0.22±0.04)比(0.41±0.05)]、Ki-67[(0.31±0.04)比(0.62±0.04)]、β-catenin[(0.32±0.05)比(0.63±0.05)]和[c-Myc(0.21±0.04)比(0.41±0.06)]蛋白表达降低(P<0.05),Cleavedcaspase-3[(0.44±0.05)比(0.14±0.04)]和Cleavedcaspase-9[(0.54±0.05)比(0.17±0.03)]蛋白表达增加(P<0.05)。结论慢病毒载体沉默lncRNARpph1可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制胆囊癌GBC-SD细胞增殖,诱导细胞周期停滞和促进细胞凋亡。lncRNA Rpph1是胆囊癌的潜在分子靶点。 展开更多
关键词 胆囊肿瘤 长链非编码RNA rpph1 慢病毒载体 增殖 细胞周期 凋亡
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外泌体中circ-RPPH1通过circ-RPPH1/miR-146b-3p/MUC19通路轴调控乳腺癌对紫杉醇的耐药性 被引量:2
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作者 赵玥 付永强 +3 位作者 周真林 杨明 黄维超 方雅兰 《中国肿瘤外科杂志》 CAS 2022年第3期296-306,共11页
目的 研究外泌体circ-RPPH1在乳腺癌患者血清、乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231及乳腺癌紫杉醇耐药细胞系MCF-7/PTX、MDA-MB-231/PTX中的表达情况,探讨circ-RPPH对乳腺癌耐药细胞株生物学功能的影响及作用机制。方法 通过生物信息数据检... 目的 研究外泌体circ-RPPH1在乳腺癌患者血清、乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231及乳腺癌紫杉醇耐药细胞系MCF-7/PTX、MDA-MB-231/PTX中的表达情况,探讨circ-RPPH对乳腺癌耐药细胞株生物学功能的影响及作用机制。方法 通过生物信息数据检索系统分析乳腺癌组织与正常组织差异化表达circ-RPPH1及其下游靶向miR-146b-3p、MUC19通路;收集2020年2月至2021年10月遵义医科大学附属贵航三OO医院诊治的53例乳腺癌患者,分为紫杉醇敏感组(24例)与紫杉醇耐药组(29例)。取两组患者血清中外泌体,提取乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231及乳腺癌紫杉醇耐药细胞系MCF-7/PTX、MDA-MB-231/PTX中的外泌体,检测circ-RPPH1的表达水平;通过外泌体摄取实验验证外泌体参与介导circ-RPPH1的转运;siRNA转染细胞后观察circ-RPPH1表达与乳腺癌细胞耐药、增殖、周期、迁移和侵袭情况相关性;构建稳转circ-RPPH1裸鼠移植瘤模型,观察circ-RPPH1水平与瘤体生长的关系并测定瘤体中circ-RPPH1含量。结果 circ-RPPH1在乳腺癌组织中差异化表达;circ-RPPH1在紫杉醇耐药患者血清及乳腺癌紫杉醇耐药细胞系MCF-7/PTX、MDA-MB-231/PTX中表达升高(P<0.001);与紫杉醇敏感组比较,紫杉醇耐药组血清外泌体中circ-RPPH1表达升高(P<0.001);外泌体负责转运circ-RPPH1;摄取紫杉醇耐药细胞外泌体后乳腺癌细胞系circ-RPPH1表达增高;敲低circ-RPPH1的表达后乳腺癌细胞系及乳腺癌耐药细胞系增殖、迁移及侵袭能力降低,细胞合成受阻;双荧光素实验及RNA免疫共沉淀表明,circ-RPPH1/miR-146b-3p/MUC19之间存在靶向调控关系;与紫杉醇敏感组比较,紫杉醇耐药组血清外泌体中miR-146b-3p表达降低,MUC19表达升高(均P<0.001);敲低circ-RPPH1可以抑制肿瘤的生长,且肿瘤中circ-RPPH1含量减少。结论 外泌体中circ-RPPH1通过circ-RPPH1/miR-146b-3p/MUC19通路轴增加乳腺癌对紫杉醇的耐药性,影响乳腺癌的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 乳腺癌 外泌体 circ-rpph1 化疗耐药
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