去铁酮对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

去铁酮可诱导p53的表达和引发肿瘤细胞凋亡。RRM2B基因在铁螯合剂抑制肿瘤细胞生长中同样起重要作用,且其表达受p53调节。为了探讨去铁酮对宫颈癌细胞的影响,以及p53和RRM2B基因二者的关系,通过MTT法检测不同浓度及不同时间去铁酮处理对HeLa细胞活性的影响,采用流式细胞仪检测细胞凋亡水平。同时,利用Western-blot和荧光定量PCR技术分别在蛋白和mRNA水平检测p53和RRM2B表达变化,并进一步利用p53抑制剂检测p53对RRM2B表达的影响。结果表明,HeLa细胞活性随着去铁酮作用浓度及作用时间的增加而下降,在500μmol/L去铁酮处理48h后出现明显凋亡。进一步研究发现,去铁酮可显著上调p53表达水平(P<0.05),而p53可显著下调RRM2B表达水平(P<0.05)。综上所述,去铁酮可通过p53下调RRM2B表达水平而参与抑制宫颈癌细胞增殖。

RRM2B基因变异相关线粒体DNA耗竭综合征8B型一家系临床及遗传学分析

目的分析RRM2B基因变异致线粒体DNA耗竭综合征8B型(MTDPS8B)一家系临床表型及遗传学特征。方法收集临沂市人民医院小儿神经内科2019年11月收治的一MTDPS8B家系资料。应用全外显子测序、线粒体环基因测序和Sanger测序法对患儿及其直系亲属进行基因检测,并对变异位点进行致病性分析和蛋白质3D建模,分析该家系成员的基因型和临床表型。结果该家系三代共8人,其中6人进行基因检测,4人存在8号染色体RRM2B基因c.627G>A(p.M209I)(NM_001172477)杂合变异,该位点高度保守且国内外多个权威数据库未见报道。蛋白质3D建模发现该变异可能影响蛋白质稳定性和功能。先证者及携带相同变异的两个姐姐均为MTDPS8B,表现为胃肠道功能障碍,运动功能及智力进行性倒退;母亲携带相同变异仅存在智力障碍;父亲及大姐未携带该变异且临床表型正常;外祖父母临床表型正常,因去世未行基因检测;变异与疾病在该家系中共分离。根据美国医学遗传学与基因组学学会变异分类标准与指南,判读为可能致病性变异(PM1+PM2+PP1+PP3)。结论c.627G>A变异可引发RRM2B基因相关疾病,且携带相同变异的家系成员临床严重程度可不相同。

RRM2B基因变异致线粒体DNA耗竭综合征8A型合并肾病综合征1例并文献复习

线粒体DNA耗竭综合征(mitochondrial DNA depletion syndrome,MDS)是一组由核基因突变引起线粒体DNA拷贝数量减少,影响多个组织及器官能量代谢的遗传性疾病。MDS累及肾脏时常表现为近端肾小管病变,合并肾病综合征者较为罕见。该文报告1例RRM2B基因复合杂合变异致线粒体耗竭综合征8A型(mitochondrial DNA depletion syndrome 8A,MTDPS8A)合并肾病综合征的儿童病例,患儿以癫痫、听力障碍及肾病综合征为主要临床表现,外院肾脏病理检查结果示局灶性节段性肾小球硬化(塌陷型)改变,给予糖皮质激素、免疫抑制剂、能量支持及对症治疗后疗效不佳,随访6个月内患儿肾功能持续恶化,需接受维持性腹膜透析治疗。

RRM2B基因复合杂合变异导致的线粒体耗竭综合征家系的临床特征和遗传学分析

目的探讨1个线粒体DNA耗竭综合征8A型家系的临床特点和致病基因。方法对患儿进行全外显子测序筛查潜在的基因变异,Sanger测序进行家系验证,并用PolyPhen-2与PROVEAN软件预测氨基酸变异对蛋白功能的影响。结果患儿,女,2个月4天,临床表现为喂养困难、呼吸急促、肌张力低下等,实验室辅助检查提示患儿发育落后,肝脏、肾脏和心脏功能均异常,并伴有高乳酸血症,因治疗效果差于3月龄时死亡。测序结果显示患儿的RRM2B基因存在c.16delA(p.R6Gfs*22)和c.175G>C(p.A59P)复合杂合变异,分别遗传自其父亲和母亲,均为新鉴定的致病性变异。结论RRM2B基因的c.16delA(p.R6Gfs*22)和c.175G>C(p.A59P)的复合杂合变异可能是线粒体DNA缺失综合征8A型的致病基因,本研究结果加强了对该类疾病的临床特征和遗传学病因认识,同时扩展了RRM2B基因变异谱。