自噬-溶酶体途径调控核仁小核糖核蛋白RRP9的蛋白质降解

目的研究核仁小核糖核蛋白RRP9的蛋白降解机制。方法组织表达谱分析RRP9在小鼠和人类正常组织中的种属特异性和在不同组织中的特异性表达,并分析RRP9在人的正常结直肠组织和结直肠癌组织中的表达差异;使用放线菌酮(cycloheximide,CHX)抑制结直肠癌细胞蛋白合成来检测RRP9蛋白半衰期;抑制自噬-溶酶体途径后检测RRP9蛋白含量变化以明确自噬-溶酶体途径对RRP9蛋白水平的影响;最后通过免疫荧光和免疫共沉淀检测LC3b与RRP9之间的相互作用。结果RRP9为长寿命蛋白;抑制自噬-溶酶体途径使RRP9蛋白水平升高;RRP9与LC3b之间存在相互作用。结论自噬-溶酶体途径调控RRP9蛋白的降解。