酵母双杂交筛选与RSA14-44相互作用的蛋白

构建了包含RSA14-44cDNA的pAS2-1-14诱饵质粒,并进行了人睾丸cDNA文库的酵母双杂交筛选,获得了一条编码人20S蛋白酶体蛋白PSMB5的cDNA片段;用所获得的序列编码该蛋白3’端编码框内全部氨基酸(191个氨基酸);首次证明RSA14-44与PSMB5在酵母细胞中存在相互作用。

一条大鼠睾丸新基因的生物信息学分析及真核表达

目的:探讨大鼠睾丸组织一条新基因的生物信息学特征和真核表达。方法:构建pEGFP-N1载体的融合质粒进行真核表达,利用生物信息学手段分析基因和蛋白功能。结果:生物信息学分析表明RSA14-44的编码区序列与人类及鼠源RAS同源基因家族核酸序列达到85%以上的同源性;RSA14-44蛋白没有典型的跨膜结构域,也没有典型的N末端信号肽;与人类RhoA蛋白序列达到了89%的同源且具有Rho家族成员的GAAX盒和p-loop结构的基序特征;RSA14-44蛋白大部分氨基酸序列与Rho家族7个已知结构域高度同源;RSA14-44基因真核表达定位于细胞质。结论:RSA14-44基因真核表达定位于CHO-K1细胞质,;编码蛋白质与Rho家族同源性高,为进一步研究其生物学功能提供参考。