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RSD-7的克隆及其在睾丸组织中的定位
1
作者
张晓东
苟大为
+3 位作者
缪时英
张建超
宗书东
王琳芳
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第3期289-293,T002,共6页
目的分离、克隆精子发生相关基因,深入了解精子发生的分子机制。方法采用本组克隆的大鼠睾丸EST筛选cDNA文库、Northernblot、原核表达和纯化、抗体制备和免疫组化等技术。结果(1)获得1个新的全长cDNA序列,命名为RSD-7。全长1238bp,编码...
目的分离、克隆精子发生相关基因,深入了解精子发生的分子机制。方法采用本组克隆的大鼠睾丸EST筛选cDNA文库、Northernblot、原核表达和纯化、抗体制备和免疫组化等技术。结果(1)获得1个新的全长cDNA序列,命名为RSD-7。全长1238bp,编码232个氨基酸,GenBank接收号为AF315467。序列分析显示,RSD-7基因编码蛋白质含有1个Ubiquitin-like结构域。(2)Northernblot结果显示,在8种成鼠组织中,RSD-7基因仅在睾丸组织中有明显表达。不同发育天龄的大鼠睾丸组织Northernblot结果显示,出生后30d的大鼠RSD-7基因开始表达,一直到120d仍有表达。(3)RSD-7cDNA在大肠杆菌中获得高效表达,并纯化了GST-RSD-7融合蛋白,以此为抗原制备了高效价的抗RSD-7蛋白的多克隆抗体。(4)通过免疫组织化学方法,RSD-7蛋白定位于Sertoli细胞胞浆和质膜上。结论初步分析了RSD-7基因的表达特征并制备了抗RSD-7多克隆抗体,为进一步研究RSD-7蛋白在精子发生过程中的功能提供了条件。
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关键词
精子发生
基因克隆
rsd-7cdna
SERTOLI细胞
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题名
RSD-7的克隆及其在睾丸组织中的定位
1
作者
张晓东
苟大为
缪时英
张建超
宗书东
王琳芳
机构
中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室
NationalFamilyPlanningResearchInstitute
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第3期289-293,T002,共6页
基金
国家自然科学基金(30240019)
国家重点基础研究发展规划项目基金(G1999055901)
国家高技术研究发展计划项目(863项目)(2001AA221131)资助~~
文摘
目的分离、克隆精子发生相关基因,深入了解精子发生的分子机制。方法采用本组克隆的大鼠睾丸EST筛选cDNA文库、Northernblot、原核表达和纯化、抗体制备和免疫组化等技术。结果(1)获得1个新的全长cDNA序列,命名为RSD-7。全长1238bp,编码232个氨基酸,GenBank接收号为AF315467。序列分析显示,RSD-7基因编码蛋白质含有1个Ubiquitin-like结构域。(2)Northernblot结果显示,在8种成鼠组织中,RSD-7基因仅在睾丸组织中有明显表达。不同发育天龄的大鼠睾丸组织Northernblot结果显示,出生后30d的大鼠RSD-7基因开始表达,一直到120d仍有表达。(3)RSD-7cDNA在大肠杆菌中获得高效表达,并纯化了GST-RSD-7融合蛋白,以此为抗原制备了高效价的抗RSD-7蛋白的多克隆抗体。(4)通过免疫组织化学方法,RSD-7蛋白定位于Sertoli细胞胞浆和质膜上。结论初步分析了RSD-7基因的表达特征并制备了抗RSD-7多克隆抗体,为进一步研究RSD-7蛋白在精子发生过程中的功能提供了条件。
关键词
精子发生
基因克隆
rsd-7cdna
SERTOLI细胞
Keywords
spermatogenesis
gene cloning
rsd-7cdna
Sertoli cell
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
Q781 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
RSD-7的克隆及其在睾丸组织中的定位
张晓东
苟大为
缪时英
张建超
宗书东
王琳芳
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
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