广西甜茶制剂中甜茶素含量的RSLC-DAD测定

目的建立RSLC-DAD测定广西甜茶制剂中甜茶素含量的方法。方法色谱柱为Dionex RSLC 120 C18柱(50 mm×2.1 mm,2.2μm),流动相为乙腈-水(36∶64),检测波长205 nm,柱温40℃,流速0.3 ml/min,进样量2μl。结果甜茶素的线性范围为0.03～0.6μg;加样回收率为99.1%,RSD为0.97%(n=9);甜茶素在21份中国和日本市售甜茶制剂中的含量范围为0～63.79 mg/g。结论该检测方法简便、快速、可靠,可作为测定甜茶制剂中甜茶素含量的方法。

化淤祛痰方药含药血清对HepG2细胞胆固醇代谢相关基因表达的影响

目的探讨化淤祛痰方药含药血清对HepG2细胞胆固醇摄取和合成相关基因表达的影响。方法体外培养HepG2细胞,随机分为5组,①正常对照组:仅用1640完全培养基培养,不加任何药物。②ox-LDL刺激组:培养液中加入终浓度为50μg/ml ox-LDL;③含药血清低剂量组;④含药血清中剂量组;⑤含药血清高剂量组。③～⑤组细胞分别使用5%、10%、20%含药血清预处理24 h后加入终浓度为50μg/ml ox-LDL,各组细胞培养24 h后进行各项指标测定。采用MTT法检测细胞活性;胆固醇氧化酶终点法检测HepG2细胞总胆固醇含量;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量分析3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)和B类Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)基因表达的变化。结果50μg/ml ox-LDL作用于HepG2细胞使其细胞活力显著下降,细胞总胆固醇含量显著升高,而化淤祛痰方药含药血清可以提高细胞的存活率,降低细胞内胆固醇含量。RT-PCR结果表明经ox-LDL诱导HepG2细胞HMGCR mRNA表达显著减少,而SR-BⅠmRNA表达显著增加。不同浓度的化淤祛痰方药含药血清均能显著降低HMGCR mRNA水平,显著升高SR-BⅠmRNA水平。结论化淤祛痰方药可通过降低HMGCR水平和升高SR-BⅠ水平从而促进胆固醇逆向转运,这可能是其调控脂质代谢发挥抗AS的作用机制之一。