四君子散对断奶仔兔宿主防御肽RSRAH mRNA表达的影响

为了考察补益类中药对家兔内源性宿主防御肽的表达调控作用,选取60只30 d龄新西兰白兔,随机分成5个处理组,每个处理组设3个重复,每个重复4只家兔。对照组(处理1)饲喂不添加任何药物的基础饲粮,抗菌药组(处理2)在基础日粮上添加0.025%磺胺对甲氧嘧啶钠(SMD-Na),处理3、4、5组分别在基础日粮上添加1%、3%、5%四君子散粗粉,饲养试验30 d。饲养试验结束后,每组每个重复随机取2只家兔剖杀,取兔圆小囊组织,实时荧光定量PCR方法检测各样本中断奶仔兔宿主防御肽(RSRAH)mRNA表达量。结果发现,与空白组和抗菌药组比较,不同剂量的四君子散对家兔圆小囊组织中RSRAH基因的转录表达均有明显的促进作用。其中,3%、5%四君子散添加组的RSRAH mRNA表达量,比空白对照组分别提高了90.77%和90.34%(P<0.01),比抗菌药组分别提高了68.38%和66.88%(P<0.01)。结果表明,在家兔日粮中添加四君子散对RSRAH mRNA表达量的影响存在一定的剂量效应,以3%的添加量效果最好。

兔宿主防御肽RSRAH的稳定性和抗感染保护作用研究

为了研究宿主防御肽RSRAH的稳定性和抗感染保护作用,以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为受试菌,考察了其热稳定性、反复冻融稳定性、蛋白酶稳定性。将100只小鼠随机分为5个处理组:RSRAH高、中、低剂量组,头孢噻呋钠组,空白生理盐水对照组。均按0.2 mL/10 g·bw给药,随后腹腔注射0.5 mL 1倍最小致死菌量(MLD)的大肠杆菌进行感染,空白对照组给予等量的生理盐水。计算注射细菌后72 h存活率,并测定相对保护率。结果发现,加热和反复冻融对RSRAH的抗菌作用影响较小,中性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶均能显著降低其抗菌活性。72 h相对保护率(RPS)分别为:高剂量组70%,中剂量组40%,低剂量组20%,头孢噻呋钠组80%。结果表明,RSRAH具有热稳定、反复冻融稳定和蛋白酶作用不稳定的特性,对大肠杆菌急性感染小鼠具有保护作用。