RSRC1在非小细胞肺癌中的表达及生物学功能探究

目的:基于生物信息学分析以及qPCR技术探究RSRC1在非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)中的表达和临床价值。方法:结合癌症基因组图谱等多种数据库分析RSRC1在肿瘤中的表达与NSCLC病人的预后、病理学特征以及肿瘤免疫之间的关系并对RSRC1及其相关基因进行富集分析。通过qPCR技术验证RSRC1在NSCLC细胞株中的表达。结果:RSRC1在NSCLC以及其主要亚型中均表达升高。RSRC1的表达水平在NSCLC中与患者的预后、临床病理特征、免疫细胞以及免疫微环境均密切相关。RSRC1在NSCLC中可能参与细胞周期、DNA复制等生物学过程。RSRC1在NSCLC细胞株中mRNA表达升高。结论:RSRC1是NSCLC中一种重要的生物标志物,有成为NSCLC治疗靶点的潜力。

RSRC1通过靶向调控PTEN/PI3K/AKT通路抑制食管鳞状细胞癌的增殖和转移

目的 探索富含精氨酸和丝氨酸的卷曲螺旋1(RSRC1)在食管鳞状细胞癌(ESCC)增殖和转移中的作用。方法 通过生信分析检测磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)在ESCC中的表达。利用qRT-PCR和蛋白免疫印迹法检测ESCC细胞中RSRC1的表达。通过CCK-8、细胞迁移和侵袭实验阐明RSRC1对ESCC细胞增殖和转移的作用。通过蛋白免疫印迹法分析PTEN/PI3K/AKT信号通路相关因子的表达。结果 生信分析结果显示PTEN在ESCC组织中低表达。分子实验显示RSRC1在ESCC细胞中低表达。细胞实验发现敲低RSRC1可促进ESCC增殖和转移,并且可以调节PTEN/PI3K/AKT信号通路。结论 RSRC1通过靶向调控PTEN/PI3K/AKT通路抑制ESCC的增殖和转移,RSRC1可能是一种新的ESCC诊断标志物和治疗靶点。

利用载体介导小干扰RNA诱导RSRC1基因沉默

目的:设计并构建人RSRC1基因小干扰RNA(siRNA)的真核表达载体,并观察其沉默效果。方法:以人RSRC1基因的cDNA序列为靶标,设计含有小发卡结构的2条寡核苷酸序列,并将其克隆到siRNA表达载体pSliencer2.1-U6neo上,转化大肠杆菌DH5α菌株,抽提质粒,测序正确后将重组质粒转染人胚肾293T细胞,通过Western blot和荧光分析检测其抑制效果。结果:重组体测序成功后,Western blot分析证明构建的siRNA能有效抑制外源性及内源性RSRC1表达;将siRNA重组质粒和带GFP标签的RSRC1共转染293T细胞,荧光显微镜下GFP的亮度明显减弱。结论:获得了2条人RSRC1siRNA真核表达载体,均能有效地抑制RSRC1基因表达。