衰老标记蛋白30 mRNA在癌细胞中的表达研究

目的:检测衰老标记蛋白(SMP)30 mRNA在不同癌细胞系中的表达情况,探讨其在不同细胞中的表达差异。方法:分别采用RT-PCR与荧光定量PCR检测SMP30 mRNA在正常肝细胞、肝癌细胞、胃癌细胞、乳腺癌细胞、宫颈癌细胞中的表达,并用SPSS13.0进行统计学分析。结果:SMP30 mRNA在所有被检测的细胞株中均有表达,在癌细胞中的相对表达量分别为肝癌细胞(0.926±0.340)、胃癌细胞(0.922±0.379)、乳腺癌细胞(0.614±0.356)、宫颈癌细胞(0.608±0.346),而在正常肝细胞中为0.175±0.158,显示SMP30 mRNA在癌细胞中的表达量较正常肝细胞中高(P<0.05),且在肝癌细胞中的表达量比在其他癌细胞中更高。结论:SMP30 mRNA在癌细胞中的表达高于正常肝细胞,且在肝癌细胞中的表达高于其他癌细胞,具有临床应用价值。

雌激素受体GPR30在大鼠下颌下腺组织中的定位、核心片段克隆及序列分析

目的探讨雌激素受体G蛋白耦联受体30(GPR30)在大鼠下颌下腺组织中的表达,为进一步研究此受体对下颌下腺的功能调节提供理论依据。方法取SD大鼠4只,腹腔麻醉后切取下颌下腺,采用免疫组织化学和原位杂交方法进行定位研究;从下颌下腺组织中分别提取总RNA,应用RT-PCR方法获得GPR30基因的cDNA核心序列,并进行序列分析。结果大鼠下颌下腺浆液性腺泡及颗粒曲管上皮细胞呈GPR30免疫反应阳性,阳性物质分布于细胞质和细胞膜上,细胞核呈阴性反应。上述细胞同样含有GPR30mRNA杂交信号,信号物质亦分布于细胞质内,细胞核呈阴性反应。经序列分析发现,从大鼠下颌下腺组织中扩增出GPR30基因的特异性条带。结论大鼠下颌下腺浆液性腺泡上皮细胞能够表达雌激素受体GPR30,说明其可能是雌激素快速作用的靶器官。

RT—30乳化沥青稀浆封层摊铺机的研制

1 前言 六十年代末,少数发达国家在公路上开始应用乳化沥青稀浆封层技术,以达到保护、改善路面的目的。由于乳化沥青稀浆封层技术与其它施工技术相比,具有施工速度快、施工质量好、制约因素少、经济效益显著、工艺简单、便于推广等明显优势。所以,该技术近年来发展很快。现在,乳化沥青稀浆封层技术已广泛应用于公路路面的新建工程、旧路改造工程及日常养护工作,用以提高路面的防水、抗滑、耐磨、平整等性能,使路面的磨损、老化、裂缝。

白绒山羊PH-30基因的克隆及表达

PH-30是参与精卵质膜间相互作用中最有特征性的候选分子之一。为了检测PH-30基因在白绒山羊睾丸中特异表达情况,试验提取公山羊睾丸组织总RNA,反转录合成cDNA,并根据GenBank中公布的3种动物PH-30 cDNA序列的保守区设计1对引物,PCR扩增后纯化回收目的片段,连接pGM-T载体,挑取阳性克隆进行测序,经序列分析鉴定目的片段。结果表明,PCR扩增获得448 bp目的片段,与绵羊PH-30同源性99%,与牛PH-30的同源性为92%。多组织的RT-PCR研究结果表明,该基因只有在白绒山羊睾丸组织中特异性表达,而在其附睾头、体、尾部组织中没有表达。

大鼠栓塞肺组织中代谢相关酶类的表达变化

目的研究大鼠急性肺栓塞模型肺组织中部分代谢相关酶类的表达变化。方法建立大鼠急性肺栓塞模型,分别在急性肺栓塞后1、8、244、8 h提取肺组织的总RNA和总蛋白,以正常组为对照,采取半定量RT-PCR的方法研究3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、儿苯酚胺氧位甲基转移酶(COMT)、衰老标记蛋白-30(SMP-30)、3-α-羟类固醇脱氢酶(SDH)和延胡索酰乙酰乙酸水解酶(FAH)在mRNA水平的表达变化;采用Western-blot方法进一步验证GAP-DH和COMT在蛋白水平的表达变化。结果大鼠急性肺栓塞后在不同的时间点,GAPDH、COMT、SMP-30、SDH和FAH的mRNA水平均逐渐减低,GAPDH和COMT在蛋白水平的表达也出现逐渐减低现象。结论大鼠急性肺栓塞后肺组织内大多数上述代谢相关蛋白均出现表达减低的现象。研究这些酶类的生物学功能和表达变化,将为我们阐明急性肺栓塞病理生理变化的分子机制奠定基础。

学校Echo 30病毒感染流行病学特征研究

目的分析埃可病毒30型（Echo 30）病毒感染的排毒期、危险因素等流行病学特征。方法病例对照研究采用条件Logistic回归分析;实验室检测方法采用病毒逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测及序列分析。结果 103例病例中实验室诊断病例30人,男女性别比为2.0：1;年龄范围6~15岁。主要临床症状为发热（100%）、头痛（71.84%）、呕吐（67.00%）、头晕（39.80%）、恶心（33.00%）等。病人密切接触史（OR=5.97,95%CI：1.50~23.86）和喝水龙头生水（OR=4.13,95%CI：1.13~15.04）是病毒感染的危险因素;饭前便后常洗手（OR=0.10,95%CI：0.02~0.37）是保护因素。病例排毒时间7~31天,中位数是10天,平均14天。结论不良饮水习惯和与患者接触是学校Echo 30感染的主要危险因素,饭前便后常洗手可降低感染风险;Echo 30病毒感染患者排毒期为7~31天。