免疫亲和层析技术协同酶联免疫吸附法检测赭曲霉毒素A

利用免疫亲和层析技术(immunoaffinity chromatography,IAC)对样品中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)进行捕获与浓缩,利用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法对IAC捕获的目标物OTA进行测定。IAC与ELISA中的抗OTA单克隆抗体来自不同的克隆株,分属不同独特型,与OTA结合靶点的选择性存在差异,IAC与ELISA协同检测,可以有效过滤OTA结构类似物造成的干扰,提高免疫分析的特异性与灵敏度。该方法用于加标样品测定时,OTA的检出限为0.2 ng/g,定量限为0.4 ng/g,OTA的平均回收率为75.9%,与单一的ELISA法相比,该方法虽然回收率略低,但灵敏度可以显著提高,达到ELISA法的60倍。通过对49份样品的实际检测,该方法检出阳性样品与国标法的符合率达到100%,漏检率为0%,由此可见,该方法在准确性上表现出明显的优势。作为一种综合免疫分析技术,该方法不需要大型仪器设备,对操作环境没有严格要求,便于基层实验室对样品中OTA的分析。

无信控交叉口网联车辆动态碰撞风险检测与预警策略

针对无信控交叉口碰撞事故多发的问题,面向网联人工驾驶环境,研究提出了一种基于车车通信的无信控交叉口网联车辆碰撞动态风险检测与预警策略。在构建典型无信控交叉口场景的基础上,设计了一种基于多项式拟合的车辆轨迹模型;融合利用碰撞到达时间和风险暴露时间作为风险检测指标,构建了一种圆形-双圆车辆模型实现车辆碰撞风险检测;综合考虑了驾驶人异质性及其交互行为,提出一种基于博弈论和遗传算法的两级碰撞预警策略;基于SUMO搭建仿真环境对预警策略的有效性及适用性进行测试分析。结果表明,所提策略能够准确识别出所有的碰撞事件并触发预警,预警成功率达到100%;在不同比例驾驶人组成测试工况下,所提预警策略均能显著降低碰撞率和平均碰撞动能。

细菌性阴道病四联检测法在细菌性阴道病中的应用

目的 分析评估细菌性阴道病四联检测法在细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)中的应用情况。方法 选取厦门市中医院2022年2-3月收治的1 000例阴道炎患者作为研究对象,同时行白带常规镜检和细菌性阴道病四联检测法,对检测结果进行分析。结果 常规湿片镜检诊断线索细胞与胺试验均阳性118例,四联BVSet试剂盒检出唾液酸酯酶阳性130例。常规镜检结果与BV Set试剂盒检出结果一致的有118例,湿片镜检结果与细菌性阴道病四联检测法结果的符合率达90.77%。BVSet试剂盒检测中过氧化氢阳性率为92.00%,国内首次报道厦门地区阴道炎患者过氧化氢阳性率92.00%,应引起临床关注。BVSet试剂盒检测唾液酸酶阳性率为13.00%,白细胞酯酶阳性率为41.00%,pH阳性率为76.00%。该研究4项指标阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。过氧化氢阳性的920例标本在白带常规各级清洁度患者中均有分布,其中Ⅰ度、Ⅱ度、Ⅲ度、Ⅳ度阳性率分别为5.00%、13.00%、32.00%、50.00%。各清洁度病例中过氧化氢阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 采用细菌性阴道病四联检测法能有效综合评估女性阴道微生态环境,提高BV诊断准确率,为患者带来益处,提高患者的生活质量,值得大力推广。

帕利亚姆病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

本研究拟建立帕利亚姆病毒(Palyam virus,PALV)血清型特异性实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法用于临床样本或媒介中PALV血清型鉴定。根据我国流行PALV毒株的基因节段2序列,设计扩增引物和TaqMan探针,建立PALV血清型特异型qRT-PCR方法,对方法的特异性、灵敏性与重复性进行评估;以我国分离的28株PALV和90份核酸阳性血液样本评估检测方法的可靠性;利用建立的方法对采集库蠓样本中携带的PALV进行血清型鉴定。结果显示,建立的PALV血清型qRT-PCR检测方法具有良好的特异性与灵敏性,可检出核酸拷贝数下限在22至28 copies·μL^(-1)。对28株PALV的qRT-PCR检测结果与病毒测序鉴定结果一致;对PALV不同感染阶段哨兵动物血液(90份)中的qRT-PCR鉴定结果与分离病毒的血清型鉴定结果一致;建立的方法可准确鉴定库蠓中携带PALV的血清型。本研究建立的PALV血清型qRT-PCR定型方法具有良好的特异强、敏感性与重复性,可用于PALV感染动物与媒介中PALV血清型的鉴定,具有良好的应用价值。

猪Linda病毒巢式RT-PCR检测方法的建立

猪Linda病毒能引起仔猪先天性震颤,严重危害养猪业的发展,目前在我国暂未发现感染病例。本研究根据猪Linda病毒Core-E~(ms)基因序列,设计并合成巢式RT-PCR引物,通过对退火温度、引物浓度等进行优化,建立了猪Linda病毒巢式RT-PCR检测方法。结果显示,该方法具有良好的特异性,与非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型均无交叉反应;敏感性好,对慢病毒阳性对照品的最低检出限为10~1 copies/μL,比普通RT-PCR灵敏10倍。使用该方法检测模拟病毒样品,发现最低检出限为10~1 TU/mL,与荧光定量RT-PCR方法一致。本研究首次建立了可检测猪Linda病毒的巢式RT-PCR方法,其特异性强、灵敏度高,为在口岸以及条件有限的场地对猪Linda病毒进行精准且快速的检测提供了有效技术手段,也为防范Linda病毒传入提供了有力技术支撑。

基于核酸适体LYGV1c的酶联吸附法检测石斑鱼虹彩病毒感染

【目的】利用核酸适体LYGV1c构建可快速、准确识别石斑鱼虹彩病毒(Grouper iridovirus Guangxi strain,SGIV-Gx)感染的酶联吸附法(Aptamer LYGV1c-based enzyme-linked apta-sorbent assay,LYGV1c-ELASA),为提高水产疫病检测及防控效率提供理论支持。【方法】基于生物素标记的LYGV1c(Bio-LYGV1c)开发核酸适体酶联吸附法(LYGV1c-ELASA)检测SGIV-Gx,通过对Bio-LYGV1c特异性、灵敏性、稳定性等实验评估其检测性能。通过珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus♀×Epinephelus lanceolatus♂)SGIV-Gx感染试验进行活体验证,同时用荧光定量PCR(qPCR)测定衣壳蛋白基因(MCP)的表达,与LYGV1c-ELASA进行比较,验证该酶联吸附法检测的可信度。【结果】LYGV1c-ELASA的方法可特异性地识别SGIV的感染,Bio-LYGV1c识别SGIV感染的最适工作浓度为500 nmol/L,最适孵育时间为20 min,最适结合温度为4~28℃,LYGV1c-ELASA最低检测限为5×103 mL-1。活体验证结果表明,随着注射的SGIV-Gx浓度的升高,LYGV1c-ELASA检测出的石斑鱼体内病毒450 nm处的光密度(OD450)的值升高;qPCR结果表明,SGIV-Gx的MCP的表达量升高,与LYGV1c-ELASA检测结果相一致。【结论】建立的LYGV1c-ELASA技术不仅可用于体外检测,同时也适用于活体检测。LYGV1c-ELASA技术可实现对石斑鱼养殖过程中石斑鱼虹彩病毒病的快速诊断、实时监控。

基于倾角检测仪的水平井定向桥射联作技术

在定向桥射联作施工中,当射孔枪泵送至井下水平段射孔位置后,利用现有技术手段无法检测射孔弹发射口的朝向。通过研制倾角检测仪和全集成定向射孔装置,将选发控制芯片和三轴加速度传感器集成于一体,设计控制电路实现分簇射孔的起爆控制,实时测量射孔弹的方向并上传至地面选发控制系统;当检测到射孔弹方向不正确时,拖动枪串重新泵送使弹架旋转并重新定向,如果射孔弹方向仍不正确,则起出工具串整改后再施工。该技术使得接头与弹架触点连接无需接线,缩短了施工时间,方向测量角度偏差≤2.00°。在F196-XP34井现场应用11段,成功率100%。该技术可应用于所有水平井定向桥射联作,尤其适用于套管外避光纤的射孔工艺,具有较大的推广应用价值。

一步RT-PCR法检测苹果锈果类病毒和苹果凹果类病毒

由类病毒引起的苹果病害在中国苹果主产区普遍发生,严重制约苹果产业的健康发展。对采自不同地区的带有典型症状的弘前富士、南方脆及惠民短枝富士果实,进行苹果锈果类病毒(ASSVd)和凹果类病毒(ADFVd)检测,发现两种病毒能够共侵染。根据ASSVd和ADFVd保守序列设计通用引物,建立了能快速、同时检测两种类病毒的RT-PCR方法。

酶联免疫吸附法与核酸检测技术在血站血液标本乙肝病毒筛查中的应用

目的探究酶联免疫吸附法(ELISA)与核酸检测(NAT)技术在血站血液标准乙肝病毒(HBV)筛查中的应用。方法选取2022年1月—2022年12月血站采集的血液标本12282份作为研究对象,所有标本均接受ELISA、NAT检测,以电化学免疫发光法(ECLIA)检测结果作为金标准,对两种检测方法的检测结果做一致性分析,并比较两种检测方法的窗口期、准确度、灵敏度、特异度2、阳性率、漏诊率差异,比较不同HBV感染状态患者HBV-DNA阳性率差异。结果ELISA检测HBV的窗口期高于NAT(P<0.05),准确度、灵敏度低于NAT,漏诊率高于NAT(均P<0.05);ELISA、NAT检测HBV的特异度、阳性检出率比较,无明显差异(均P>0.05);大三阳的HBV-DNA阳性率均高于小二阳、小三阳(均P<0.05);小二阳、小三阳两者的HBV-DNA阳性率比较,无差异(P>0.05)。结论ELISA与NAT均可良好应用于HBV检测,且NAT具备更高的准确度、灵敏度和更低的漏诊率,可良好反映HBV的传染性,是ELISA的有效补充。

智能网联汽车网络架构分析及安全检测

全球新一轮科技革命和产业变革蓬勃发展,汽车与信息通信技术加速融合,已成为汽车行业未来发展的主要方向,智能网联汽车网络架构是在传统汽车网络架构的基础上,融合现代网络通信技术的复杂网络架构体系。以车与外界的信息交换场景为重点,分析智能网联汽车的网络体系架构和网络运行场景指标,总结智能网联汽车面临的安全风险,并给出防范应对方法。在风险分析的基础上,针对控制器局域网总线检测,利用生成对抗网络设计一种实时入侵检测模型,可提高智能网联汽车的安全性。

酶联免疫吸附法在畜产品快速检测中的应用

酶联免疫吸附法是畜产品质量安全检测常用的快检方法之一,能快速、准确、高效地对相关产品进行检测。伴随着行业的高速发展,人们对畜产品的需求数量及质量要求也在逐步上升,畜产品的食品安全问题越来越受到重视。但近年来,畜产品中存在着动物疫病、兽药残留及产品非法添加物等相关问题。因此,使用快速、准确的检测方法筛查畜产品的质量安全至关重要。本文以酶联免疫吸附法为主要技术导向,深入剖析其原理,同时对该技术在畜产品快检中的应用情况分层介绍,以期为行业相关研究人员提供依据。

酶联免疫法与胶体金层析法对HIV抗体检测结果的比较

目的评估酶联免疫法与胶体金层析法对HIV抗体的检测性能。方法2021—2022年对3423份血液样本同时用酶联免疫法和胶体金层析法检测,以免疫印迹法为金标准确证结果。结果酶联免疫法检出有反应样本5份,胶体金层析法检出有反应样本9份,经免疫印迹实验确证阳性4份。酶联免疫法假阳性1份,假阳性率0.03%;胶体金层析法假阳性5份,假阳性率0.15%,2种方法差异无统计学意义(χ^(2)=2.64,P=0.26)。2种方法检测HIV抗体的灵敏度均为100%,酶联免疫法的特异度(99.97%)略高于胶体金层析法(99.85%),Kappa值均≥0.6,检测一致性较好。结论酶联免疫法和胶体金层析法均可用于HIV抗体检测,酶联免疫法的假阳性率更低,胶体金层析法操作更为简便,可结合实际需要选择合适的方式进行HIV筛查。

智能网联技术在五菱新能源汽车检测与维修中的应用

通过实时监控和数据分析,智能网联技术可以实时收集车辆数据,进行故障诊断和预测,并远程控制和干预车辆。这不仅可以提高车辆的可靠性和安全性,还可以优化能源管理,改善驾驶体验。本文将探讨智能网联技术在五菱新能源汽车检测与维修中的具体应用,以及它如何提高维修效率和质量。

智能网联汽车中的电控系统检测技术分析

阐述智能网联汽车电控系统的故障诊断与排除方法,包括故障仿真技术应用、故障模拟实验,以及故障码诊断法、数据流诊断法、视频诊断法的应用。探讨智能网联汽车电控系统的故障预防方法。

猪流感病毒通用型微滴式数字RT-PCR绝对定量检测方法的建立

为建立灵敏且可绝对定量检测猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)的微滴式数字RT-PCR(ddRT-PCR)方法,以SIV M基因的保守序列为靶基因,设计并合成一套特异性引物和TaqMan探针,建立了可对主要流行的H1N1、H1N2和H3N2亚型SIV绝对定量检测的通用型ddRT-PCR方法。随后,对该方法的敏感性、特异性和重复性进行评价,并利用临床猪鼻咽拭子样品进行检测验证。结果显示:建立的ddRT-PCR方法检测限达到1.6 copies/µL,灵敏度极高;能特异性检出H1N1、H1N2和H3N2亚型SIV,与猪瘟病毒等其他常见猪病病原均无交叉反应;重复检测结果的批内和批间变异系数(CV)分别为0.75%、3.17%,重复性良好;经临床样品检测验证,建立的ddRT-PCR和荧光RT-qPCR方法分别检出阳性样品72、66份,提示前者在检测低病毒拷贝样品时较荧光RT-qPCR更优。结果表明,本研究建立的SIV通用型ddRT-PCR方法灵敏度高,特异性和重复性均良好,且在检测低病毒含量临床样本时更具优势,可作为一种对SIV感染进行早期诊断和绝对定量检测的有效方法。

酶联免疫法联合核酸检测无偿献血标本控制输血传播疾病残余风险的效果研究

血站采集献血者的血液样本后通常会经过多道筛查和检测,以确保血液的质量和用血安全性。目前,对于血液病毒的检测包括酶联免疫法和核酸检测法。但血液样本中的病毒如果处于窗口期、变异期,其酶联免疫法的检测准确率就会非常低[1]。本研究对无偿献血标本采用酶联免疫法联合核酸检测,分析对输血传播疾病残余风险的控制效果。

储罐焊缝的多机自动联照射线检测装置

为解决储罐大批量拍片时人员劳动强度大、夜间工作易疲劳、高空作业存在风险、射线辐射强度大等问题,在多机联拍法的基础上,提出了一种储罐自动射线检测装置。该装置可通过遥控在储罐壁上行走,能将射线机组移动到罐壁上的任意位置,实现X射线透照功能。装置本身带有遥控曝光、紧急停止、故障诊断、自动训机、辐射探测、环境照明、曝光指示等功能,实际应用效果良好,极大地提高了检测人员的安全性和透照工作的效率。

锅炉及加热炉联锁装置关键项目检测方法

为检测验证油气田在用锅炉及加热炉安全联锁保护装置的有效性,保障锅炉及加热炉运行过程中的设备完整性及本质安全,对其安全联锁保护装置关键项目进行了梳理,并根据安全联锁保护装置远程控制系统的工作原理以及现场各关键项目信号的传递方式,采用直接检测法或模拟检测法改变现场各联锁装置的远程传递信号,以此验证安全联锁是否有效并实现动作响应。通过对两种方法可行性及适用性的理论分析和研究,并加以新疆油田现场实践、验证和总结,结果证明:对油气田在用锅炉及加热炉安全联锁保护装置各关键项目的有效运行与否可以采用直接或模拟检测法进行现场检测验证,验证结果安全、可靠。近年来,通过此方法已在新疆油田累计开展了1200多台在用锅炉及加热炉安全联锁保护装置的检测验证工作,为设备的本质安全运行提供了保障,也为其他各油气田在用锅炉及加热炉安全联锁保护装置的安全、有效运行提供检测技术指导。

酶联免疫分析技术在食品安全快速检测中的应用

酶联免疫分析技术操作简单、灵敏度较高、技术成本较低且能够应用到多种成分检测中,因此被广泛应用于大批量食品安全快速检测中。随着相关技术的革新,酶联免疫分析技术在实践检测中的应用也愈发成熟,同时衍生出众多新型技术,满足了食品快速、高质量检测需求。基于此,本文探究了酶联免疫分析技术在各类食品检测中的应用,分析了酶联免疫分析技术的优势,希望能够为广大从业人员提供些许参考。

胶体金法及酶联免疫法应用于艾滋病抗体检测的价值分析

目的分析在艾滋病病毒抗体检测中,应用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)和胶体金法的检验效果。方法选取2018年6月—2023年6月海安市疾病预防控制中心复检人类免疫缺陷病毒抗体检测的90份样本作为研究对象,均应用胶体金法及ELISA法检测。比较两种检测方式的诊断效能。结果胶体金法检测灵敏度93.33%、特异度86.67%、准确度92.22%;ELISA法检测灵敏度100.00%、特异度93.33%、准确率98.89%。ELISA法检测灵敏度及准确度均优于胶体金法,差异有统计学意义(χ^(2)=5.172、4.709,P均<0.05)。结论在艾滋病诊断中,应用ELISA及胶体金法均有较高的诊断效能,ELISA法检测灵敏度及准确度均优于胶体金法。