RTN4对于结肠癌细胞增殖的调控作用

2018年全球癌症统计调查显示,结直肠癌约占患癌新病例的12.1%。因此,寻找新的结肠癌发生有关的基因,发现新的治疗靶点显得尤为迫切。通过数据库分析发现,RTN 4基因的表达水平与结肠癌患者生存率的相关性具有统计学意义。针对RTN 4基因构建其干扰质粒,将慢病毒作为载体转染结肠癌HCT116细胞中构建敲低RTN 4的结肠癌细胞系,最后检测了低表达后RTN 4基因的细胞增殖。结果发现,敲低RTN 4基因后显著促进了结肠癌细胞HCT116的增殖,研究通过Western blot观察敲低RTN 4后HCT116细胞自噬通路相关蛋白p62和LC3的表达情况,发现与对照组相比较,敲低RTN 4组LC3转化量(LC3-II/LC3-I)增多,而p62蛋白减少。研究分析了RTN 4的潜在抑癌作用,发现敲低RTN 4基因会显著增强结肠癌细胞的增殖能力,并且诱导自噬,说明RTN 4可能与激活LC3/p62自噬途径有关。

七氟醚通过miR-21-5p调控RTN4影响大鼠神经干细胞增殖和凋亡

目的探究七氟醚(Sev)影响大鼠神经干细胞(NSC)增殖和凋亡的作用机制。方法将体外培养神经干细胞分为4组:对照组,Sev组,Sev+miR-21-5p mimics组(Sev处理后转染miR-21-5p mimics),Sev+miR-21-5p mimics+pcDNA-RTN4组(Sev处理后miR-21-5pmimics和pcDNA-RTN4共转染)。RT-qPCR检测各组NSC中miR-21-5p和RTN4 mRNA表达水平;Western blot检测干细胞标志物及细胞凋亡相关P53、Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达水平;CCK-8法检测NSC增殖活力;流式细胞术检测NSC凋亡水平。此外,双荧光酶素报告检测miR-21-5p与RTN4之间的靶向关系。结果与对照组比较,2%Sev处理显著抑制NSC的增殖活力并和促进细胞凋亡;与对照组比较,2%Sev处理可显著下调NSC中miR-21-5p水平;与对照组比较,Sev组凋亡相关蛋白P53、Bax及cleavedcaspase-3表达水平显著上调;miR-21-5p靶向下调RTN4并参与Sev调控NSC活性的过程。结论Sev通过miR-21-5p/RTN4轴促进NSC凋亡并抑制其增殖。