RTN3与细胞凋亡

RTN3是RTN家族的成员之一,因其主要定位于内质网,所以用reticulon来命名.RTN3与RTN4B是RTN家族中目前已知的、唯一一对具有凋亡诱发功能的基因.过表达的RTN3介导了真核细胞的三大凋亡信号转导通路:死亡受体途径、线粒体途径、内质网途径,并使之交联形成凋亡调控网络;RTN3可与RTN4B相互作用,形成同源或异源二聚来调控细胞凋亡.另外,过表达RTN3还参与了细菌的类凋亡作用.RTN3广泛表达于多种组织,其过表达诱发凋亡的机制的总结将让人们更好的了解RTN3及其家族,完善细胞凋亡的信号转导研究.

参与EV71复制的宿主因素hnRNP K、RTN3的分子作用机制研究进展

肠道病毒71(Enterovirus 71,EV71)是引发儿童重症手足口病的主要致病病原体之一,其在人体细胞内发生复制的具体分子机制目前还尚不明确。最近研究发现,一些宿主因素参与了EV71的复制,如核不均一核糖核蛋白K(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K,hnRNP K)以及网状蛋白3(Reticulon3,RTN3)。在这些发现中,有学者通过竞争性实验证实,hnRNP K与EV71 5′UTR间能够相互作用,并在病毒RNA的有效合成中是必不可少的;另外一些学者采用酵母双杂交系统等实验发现,RTN3可与EV71 2CN端区域相互作用,并在EV71的复制过程中起着非常关键的作用。本文将主要围绕这些研究,综述hnRNP K及RTN3在EV71复制中的相关分子作用机制。

小鼠RTN3基因mRNA和蛋白在小鼠中枢神经系统的分布模式

根据与人RTN3基因同源的小鼠EST AA237377设计筛库引物,克隆得到小鼠RTN3 cDNA,该cDNA长2814 bp,含1个714 bp的可读框,编码1个具237个氨基酸的蛋白.Northern杂交检测该基因在小鼠不同组织中的表达谱,发现它有3个转录本,分别为1.8,2.8和4.2 kb,其中1.8和 2.8 kb的转录本存在于多种组织中,2.8 kb的转录本在脑中的表达量最高,4.2 kb的转录本仅在脑中存在.用成年小鼠脑和脊髓切片进行原位杂交和免疫组织化学反应,发现该基因在中枢神经系统的非胶质细胞中广泛表达,且在某些区域表达较高,如海马、大脑皮层、下丘脑及一些神经核团.

RTN4-C相互作用蛋白的筛选与鉴定

我们的前期工作发现过表达RTN4-C基因能够抑制肝癌细胞株SMMC7721的生长并且促进其发生凋亡.为了进一步了解RTN4-C促进凋亡的机制,本文采用酵母双杂交的方法从小鼠7 d胚胎文库中筛选其相互作用的蛋白.最终筛选到其同源家族成员RTN3.进一步采用间接免疫荧光和及构建的荧光载体表明,RTN4-C和RTN3蛋白在HEK293和Hela细胞中发生共分布.本研究为进一步阐明RTN4-C抑制细胞生长和促进细胞凋亡的机制提供了新的依据.

RNA结合模体蛋白3对细胞总蛋白质合成的影响及其靶基因的鉴定

RNA结合模体蛋白3 (RNA binding motif protein 3,RBM3)受低温应激产生,参与介导亚低温的神经保护功能,但其作用机制及其下游靶分子尚不清楚。本研究构建了人RBM3基因的重组表达质粒,运用一种新型的、非放射性方法即翻译表面感应(surface sensing of translation,SUnSET)来检测RBM3过表达对细胞总蛋白质合成(global protein synthesis,GPS)的影响。结果显示,RBM3过表达使细胞总蛋白质的合成水平上调23. 7%(P <0. 001),这与RBM3过表达引发的真核翻译延伸因子2 (eukaryotic translation elongation factor 2,e EF2)及真核翻译起始因子2α(eukaryotic initiation factor 2α,eIF2α)的活性增高相一致。对RBM3可能的下游靶基因内质网蛋白3(reticulon 3,RTN3),以及Yes相关蛋白1 (Yes-associated protein 1,YAP1)的表达进行分析。结果显示,RBM3使RTN3及YAP1在蛋白质水平的表达分别提高了51. 7%(P <0. 01)与43. 3%(P <0. 01)。与蛋白质水平变化相比,RBM3使YAP1在mRNA水平上调了2. 0倍(P <0. 001),但对RTN3的mRNA表达未见显著影响。以上研究表明,SUnSET是一种稳定、可靠的细胞GPS的检测手段;RBM3可显著促进细胞GPS,且对其下游基因RTN3和YAP1存在靶向关系。本研究的结果为深入探讨RBM3的神经保护作用机制提供了理论基础。