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RTN4-C基因在肝癌组织中的表达及其对SMMC7721细胞生长和凋亡的影响(英文) 被引量:2
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作者 陈益存 陆东东 +1 位作者 曹祥荣 张锡然 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第9期891-897,共7页
RTN4-C属于编码内质网蛋白的基因家族(RTNs)。为研究RTN4-C在肝癌及其癌旁组织中的表达情况及其对SMMC7721肝癌细胞株的影响,利用RT-PCR检测RTN4-C在肝癌及其癌旁组织中的表达。构建RTN4-C-pcDNA3.1真核表达重组质粒,用脂质体介导转染SM... RTN4-C属于编码内质网蛋白的基因家族(RTNs)。为研究RTN4-C在肝癌及其癌旁组织中的表达情况及其对SMMC7721肝癌细胞株的影响,利用RT-PCR检测RTN4-C在肝癌及其癌旁组织中的表达。构建RTN4-C-pcDNA3.1真核表达重组质粒,用脂质体介导转染SMMC7721肝癌细胞,通过G418稳定筛选,建立转染RTN4-C/SMMC7721稳定细胞株。MTT法测定转染前后细胞生长改变、吖啶橙染色检测细胞凋亡改变、免疫细胞化学检测肿瘤相关蛋白p53、Hsp70和c-Fos表达改变。结果表明,RTN4-C/SMMC7721细胞生长减慢,与对照组相比,第2、3、4d细胞生长抑制率分别为33·8%±0·026、56·2%±0·094、34·8%±0·077;凋亡明显增多。突变型p53蛋白从核内转移到细胞质且表达减弱,c-Fos、Hsp70蛋白表达量明显减弱。提示RTN4-C基因在肝癌组织中存在表达差异,促进突变型p53的核转移并减少其表达量、抑制癌基因c-Fos和Hsp70的表达,从而抑制SMMC7721细胞的生长,促进其凋亡。 展开更多
关键词 rtn4-c SMMC7721 细胞凋亡 细胞生长 肝癌细胞 基因家族 癌组织 C-FOS表达 真核表达重组质粒 Hsp70
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RTN4-C相互作用蛋白的筛选与鉴定
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作者 唐小军 陈益存 张锡然 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期74-77,共4页
我们的前期工作发现过表达RTN4-C基因能够抑制肝癌细胞株SMMC7721的生长并且促进其发生凋亡.为了进一步了解RTN4-C促进凋亡的机制,本文采用酵母双杂交的方法从小鼠7 d胚胎文库中筛选其相互作用的蛋白.最终筛选到其同源家族成员RTN3.进... 我们的前期工作发现过表达RTN4-C基因能够抑制肝癌细胞株SMMC7721的生长并且促进其发生凋亡.为了进一步了解RTN4-C促进凋亡的机制,本文采用酵母双杂交的方法从小鼠7 d胚胎文库中筛选其相互作用的蛋白.最终筛选到其同源家族成员RTN3.进一步采用间接免疫荧光和及构建的荧光载体表明,RTN4-C和RTN3蛋白在HEK293和Hela细胞中发生共分布.本研究为进一步阐明RTN4-C抑制细胞生长和促进细胞凋亡的机制提供了新的依据. 展开更多
关键词 rtn4-c rtn3 酵母双杂交 免疫荧光 共定位
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RTN4对于结肠癌细胞增殖的调控作用
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作者 杨梦恬 袁菊懋 《生物技术进展》 2021年第2期238-243,共6页
2018年全球癌症统计调查显示,结直肠癌约占患癌新病例的12.1%。因此,寻找新的结肠癌发生有关的基因,发现新的治疗靶点显得尤为迫切。通过数据库分析发现,RTN 4基因的表达水平与结肠癌患者生存率的相关性具有统计学意义。针对RTN 4基因... 2018年全球癌症统计调查显示,结直肠癌约占患癌新病例的12.1%。因此,寻找新的结肠癌发生有关的基因,发现新的治疗靶点显得尤为迫切。通过数据库分析发现,RTN 4基因的表达水平与结肠癌患者生存率的相关性具有统计学意义。针对RTN 4基因构建其干扰质粒,将慢病毒作为载体转染结肠癌HCT116细胞中构建敲低RTN 4的结肠癌细胞系,最后检测了低表达后RTN 4基因的细胞增殖。结果发现,敲低RTN 4基因后显著促进了结肠癌细胞HCT116的增殖,研究通过Western blot观察敲低RTN 4后HCT116细胞自噬通路相关蛋白p62和LC3的表达情况,发现与对照组相比较,敲低RTN 4组LC3转化量(LC3-II/LC3-I)增多,而p62蛋白减少。研究分析了RTN 4的潜在抑癌作用,发现敲低RTN 4基因会显著增强结肠癌细胞的增殖能力,并且诱导自噬,说明RTN 4可能与激活LC3/p62自噬途径有关。 展开更多
关键词 rtn 4基因 结肠癌 细胞增殖
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七氟醚通过miR-21-5p调控RTN4影响大鼠神经干细胞增殖和凋亡 被引量:1
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作者 张晚来 曹鄂斌 +2 位作者 何俊 袁惠莉 王璞 《中国临床神经科学》 2023年第3期278-286,共9页
目的探究七氟醚(Sev)影响大鼠神经干细胞(NSC)增殖和凋亡的作用机制。方法将体外培养神经干细胞分为4组:对照组,Sev组,Sev+miR-21-5p mimics组(Sev处理后转染miR-21-5p mimics),Sev+miR-21-5p mimics+pcDNA-RTN4组(Sev处理后miR-21-5pmi... 目的探究七氟醚(Sev)影响大鼠神经干细胞(NSC)增殖和凋亡的作用机制。方法将体外培养神经干细胞分为4组:对照组,Sev组,Sev+miR-21-5p mimics组(Sev处理后转染miR-21-5p mimics),Sev+miR-21-5p mimics+pcDNA-RTN4组(Sev处理后miR-21-5pmimics和pcDNA-RTN4共转染)。RT-qPCR检测各组NSC中miR-21-5p和RTN4 mRNA表达水平;Western blot检测干细胞标志物及细胞凋亡相关P53、Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达水平;CCK-8法检测NSC增殖活力;流式细胞术检测NSC凋亡水平。此外,双荧光酶素报告检测miR-21-5p与RTN4之间的靶向关系。结果与对照组比较,2%Sev处理显著抑制NSC的增殖活力并和促进细胞凋亡;与对照组比较,2%Sev处理可显著下调NSC中miR-21-5p水平;与对照组比较,Sev组凋亡相关蛋白P53、Bax及cleavedcaspase-3表达水平显著上调;miR-21-5p靶向下调RTN4并参与Sev调控NSC活性的过程。结论Sev通过miR-21-5p/RTN4轴促进NSC凋亡并抑制其增殖。 展开更多
关键词 七氟醚 神经干细胞 miR-21-5p rtn-4基因 细胞增殖 细胞凋亡
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Cloning and expression analysis of human reticulon 4c cDNA 被引量:2
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作者 Anding Bi Long Yu +3 位作者 Jun Yang Min Zhang Yi Zhou Shouyuan Zhao 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2000年第20期1862-1869,共8页
RTNs (reticulons) is a gene family related to the growth and differentiation of neuroendocrine cell. This family is composed of several members such as RTN1, RTN2ar\d RTN3. RTN1 and RTN2 have been proved to have 3 tra... RTNs (reticulons) is a gene family related to the growth and differentiation of neuroendocrine cell. This family is composed of several members such as RTN1, RTN2ar\d RTN3. RTN1 and RTN2 have been proved to have 3 transcripts with different length. Because the RTN1c cDNA was involved in the sologenesis of small cell lung carcinoma (SCLC), it was selected as a bioinformatic probe to clone novel members of RTN family with the electric hybridization assistant new-gene cloning method (EHAC). A 1677-bp cDNA was identified from human brain cDNA library. The cDNA contains an intact open reading frame (ORF) which encodes a protein of 199 amino acids. This deduced protein is highly homologous to RTN1c, RTN2c and RTN3 with identities of 64.4%, 45.8% and 50.0% respectively. This new gene was named RTN4c (GenBank accession number: AF087901). Northern hybridization showed that the full length of RTN4c transcript is about 1.8 kb. It is hardly expressed in heart, placenta, lung, spleen, thymus, testis, ovary, small 展开更多
关键词 RETICULON 4 (rtn4) gene CDNA CLONING TISSUES expression PATTERN CHROMOSOME 2pl4-pl3.
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