温州地区767例腹泻患儿A群轮状病毒感染分析

目的分析浙江温州地区腹泻患儿A群轮状病毒感染情况。方法收集2013年9月～2014年9月门诊及住院767例腹泻患儿粪便标本,采用胶体金免疫层析法检测,检测结果应用SPSS 19.0统计软件进行统计分析。结果 767例腹泻患儿中,有156例检出轮状病毒阳性,阳性率为20.3%。其中,0～6个月、6个月～1岁、1～2岁、2～3岁、〉3岁患儿RV阳性率分别为11.1%、22.3%、35.4%、42.9%、5.6%,而1～2岁、2～3岁这两个年龄段的腹泻患儿RV感染阳性率明显高于其他年龄段的患儿,差异有统计学意义（P〈0.01）;男性患儿与女性患儿间的阳性率分别为18.6%和22.8%,差异无统计学意义（χ2=2.056,P〉0.05）;秋冬季10月、11月、12月以及次年的1月是RV感染高峰,其阳性率分别为39.2%、43.3%、43.1%、32.1%,不同月份之间阳性率差异有统计学意义（χ2=107.439,P〈0.01）。结论 1～3岁儿童是A群轮状病毒感染高发年龄段群体,每年秋冬季节高发。

轮状病毒LLR疫苗株非结构蛋白NSP4基因稳定性研究

目的研究轮状病毒(RV)LLR疫苗株NSP4基因的遗传特征及基因稳定性,为疫苗的质量控制提供依据。方法将LLR株轮状病毒毒种LLR38代在原代牛肾细胞上连续传至49代,提取第38、43、44、49代病毒RNA。通过RT-PCR扩增NSP4基因片段,将其克隆入质粒pGEM-T中,进行序列测定与分析。结果 LLR株NSP4基因全长751 bp,含编码175个氨基酸的单一的开放读码框架(ORF)。各代次病毒的NSP4基因核苷酸与推导的氨基酸序列完全一致,与GenBank中LLR参考株(AY219873)进行比较,核苷酸与推导的氨基酸同源性分别为99.1%和99.7%,各关键功能区均未发生改变。与27株A～F不同基因群RV代表株进行比较,LLR株与A基因群RV的NSP4同源性较高,核苷酸推导的氨基酸同源性为89.2%～95.5%;与B、C、D、E、F基因群RV核苷酸推导的氨基酸同源性分别为83.5%～87.5%、85.2%～87.5%、65.9%～67.8%、27.6%～30.8%、77.8%;系统发生树显示LLR株与A基因群RV在一个分支内。结论轮状病毒LLR疫苗株在原代牛肾细胞上连续传代NSP4基因遗传特性极其稳定,从分子水平证明LLR疫苗株毒种及其生产的疫苗是安全的。

用狂犬病毒核蛋白基因小干扰RNA库抑制狂犬病毒复制和感染的研究

采用RNaseⅢ消化长片段双链RNA的方法,制备了狂犬病毒N基因、P基因和G基因小干扰RNA库(siRNACocktail)。将siRNA转染BSR和MNA细胞单层后,采用直接免疫荧光法观察发现,N基因siRNACocktail能够对RV的复制和感染产生明显和稳定的抑制作用,并且通过RT-PCR在转录水平探测到mRNA产量的降低;而P基因或G基因siRNACocktail对RV的复制和感染不产生或仅产生弱的抑制作用。这一结果为RNA干扰在RV研究中靶基因的选择及进一步的应用提供了依据。

风疹病毒研究进展(综述)

风疹病毒是披膜病毒科风疹病毒属的惟一成员,是第一个被证明具有致畸性的病毒。如果在妊娠的前3个月感染了风疹病毒,具有很高的先天性风疹综合症(CRS)的风险,特别是那些没有免疫保护的妇女。应用先进的产前诊断技术鉴别鉴别诊断胎儿有无损伤是非常必要的,因为当在妊娠前3个月被诊断为原发性风疹病毒感染,孕妇要考虑是否妊娠终止。在这篇文章里我们主要综述了风疹病毒(RV)的流行病学、基因结果、临床特征和RV的实验室诊断。

猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪A群轮状病毒多重PCR检测方法的建立

为了能够同时快速准确检测出猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（Porcinetransmissible gastroenteritis virus,TGEV）及猪A群轮状病毒（Porcine rotavirus,RV）,试验通过设计引物、优化PCR条件构建了一个能同时检测出TGEV、PEDV及RV的多重PCR方法。结果表明：该方法能同时检测到TGEV、PEDV及RV,而对猪瘟病毒（CSFV）、猪呼吸与繁殖综合征病毒（PRRSV）、猪伪狂犬病毒（PRV）、猪圆环病毒Ⅱ型（PCV-2）、细小病毒（PPV）、日本乙型脑炎病毒（JEV）、牛病毒性腹泻病毒（BVDV）等无扩增,TGEV、PEDV及RV的最低检测浓度为1×102拷贝/μL。说明试验设计的多重PCR方法不仅省时、省力,而且具有敏感性高、特异性强等优点。

检测痰液中轮状病毒抗原对小儿肺炎的意义

近年研究表明,轮状病毒(RV)也是小儿肺炎的重要病原之一.本文旨地探讨痰液RV检测对小儿肺炎病原学的诊断价值.1 临床资料1.1 诊断标准 小儿肺炎诊断标准参照1978年成都会议标准1.2 对象 121例小儿肺炎病例为本院儿科1995年3月至1998年2月住院患儿.其中男37例,女64例,男:女为0.89:1.年龄为15天～8岁,以2岁以下的婴幼儿多见.发病至就诊时间3小时～21天.

乳酸菌重组表达TGEV、PEDV和RV抗原蛋白的研究

乳酸菌能够耐受动物胃肠道中高浓度的胆盐和各种酶类,在肠壁上黏附定植,同时对宿主的免疫系统有调节作用,特别是能诱导s Ig A的分泌,产生更为理想的黏膜免疫效果,进而引起全身性系统免疫反应。因此将猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪轮状病毒(RV)这3个具有肠组织嗜性的腹泻病毒的主要保护性抗原基因在乳酸菌中表达,以期为胃肠道疾病的预防提供一种新的途径。

应用捕获ELISA法检测风疹病毒特异性IgM抗体的研究

应用捕获ELISA法检测人风疹病毒感染者血清特异性IgM抗体。通过与间接ELISA法对58例临床标本的检测比较,该法灵敏度及特异性均高于间接法,且有效避免RF的影响。试验表明,RV IgM捕获法特异、敏感、简便、重复性好。RV IgM捕获法试剂的研制成功,将为血清学的检测、流行病学的调查及临床诊断等提供可靠的科学诊断依据,有助于优生及优育。

狂犬病病毒实时荧光RT-RPA等温检测方法的建立

为了建立一种灵敏、特异、快捷的实时荧光重组酶聚合酶扩增(RPA)检测狂犬病病毒的方法,依据狂犬病病毒不分节段单股负链中N基因相对保守的核苷酸序列,设计了4条引物及1条探针,筛选出一套可用于RPA引物与探针组合,建立了狂犬病病毒的荧光RT-RPA检测方法,测试了该方法灵敏度和特异性,并进行了临床验证。结果显示,本研究建立的RPA方法在39℃恒温反应仅需20 min,能够特异的检测狂犬病病毒,最低检测限为1.83×101 Copies/μL,临床样品测试与标准方法结果一致。表明本研究建立的检测狂犬病病毒的荧光RT-RPA方法具有特异,灵敏,快速,简便的特点,适用于现场检测以及在基层实验室推广应用。

1568例婴幼儿腹泻轮状病毒检测及流行病学特征分析

目的对1568例婴幼儿腹泻患者进行粪便轮状病毒（RV）抗原检测，分析其流行病学特征。方法以免疫金标记技术对2012年1-12月来我院就诊的腹泻患儿的1568例粪便标本进行RV抗原检测，并对检测结果进行统计分析。结果1568例粪便标本中，阳性检出632例，阳性率为40．3％；不同性别腹泻患儿的阳性检出率差异不显著，无统计学意义（P〉0．05）；10～12月的阳性检出率最高，其中12月最高，为51．7％。结论RV是婴幼儿腹泻的主要病原，其发病具有显著的季节性，建议于流行季节为6～24月龄的婴幼儿接种疫苗。

家犬血清抗狂犬病毒抗体水平监测

报告了监测家犬血清抗狂犬病毒抗体免疫水平50例,其中2例未免疫犬血清抗狂犬病毒抗体为阴性、48只免疫犬有44只血清抗体阳性,疫区与非疫区及雌雄之间,免疫抗体的产生差异均无显著性,2年以上的成年犬,易激活产生保护性抗体,连续免疫2年,已有足够的保护性抗体产生.

哺乳仔猪轮状病毒和肠产毒性大肠杆菌混合感染病例的诊治

2022年8月中旬广西地区某规模化养猪场产房中7~15日龄哺乳仔猪发生严重腹泻和呕吐,甚至死亡,且死亡率较高。为查明病因和控制该病,试验首先根据临床症状和病理剖检结果进行初步判断;然后采集病料,分别对病毒性病原和细菌性病原进行进一步检测,并针对细菌性病原进行药敏试验;最后根据诊断结果进行有针对性的治疗。结果表明:腹泻哺乳仔猪小肠壁呈薄的半透明状,部分肠段呈灰黄色和灰黑色;肠壁充血,内容物为絮状的黄色或灰色液体;胃内充满黄色液体,可见少量凝乳块;初步判断为轮状病毒(RV)或猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和大肠杆菌的混合感染。进一步检测发现,病料中A群轮状病毒(RVA)呈阳性,猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和PDCoV呈阴性。从病料中分离到1株肠产毒性大肠杆菌(ETEC);该分离株对头孢曲松、庆大霉素和卡那霉素敏感,对氟苯尼考、多西环素和恩诺沙星中介,对阿莫西林、替米考星、泰万菌素和新霉素耐药。对产房腹泻仔猪按2~3 mL/头的剂量灌服10%庆大霉素进行治疗,每天1次,连续3 d,仔猪腹泻情况得到了有效控制。说明导致该场哺乳仔猪发生严重腹泻的主要原因为RV和ETEC混合感染,采取的治疗措施具有良好的效果。

猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒和轮状病毒多重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为了建立一种能够同时检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、传染性胃肠炎病毒(TGEV)和轮状病毒(RV)的多重实时荧光定量PCR方法,试验根据PEDV CV777株、TGEV Purdue P115株全基因序列和RV OSU毒株的VP6基因序列,设计出3对特异性引物及探针,优化反应条件,开展特异性、敏感性、重复性和验证试验。结果表明:该方法的检测最低限为1×10~2拷贝/μL的RNA标准品或1×10^(-2)TCID_(50)/mL的疫苗毒,具有较高的敏感性;变异系数均小于10%,符合统计学要求;利用本试验所建立的方法以及商品化试剂盒对20份临床样品进行检测,符合率为100%。说明本试验建立的方法特异性好,敏感性高,重复性稳定,可用于PEDV、TGEV和RV的鉴别诊断和防控。

轮状病毒肠炎并发无症状肠道外损伤98例分析

目的分析婴幼儿轮状病毒(RV)肠炎并发无症状肠道外损伤的临床特点。方法回顾性分析486例粪便轮状病毒抗原(RV-Ag)阳性且临床确诊为急性轮状病毒肠炎患儿的临床资料。结果 98例发生肠外脏器损伤;但均无相应的临床症状。其中肌酸激酶心肌同工酶(CK-MB)升高最多见,有50例,ALT和AST升高29例,CK-MB、AST和ALT均升高15例,蛋白尿2例,血小板下降2例。结论 RV肠炎不仅要观察胃肠道症状和脱水程度,还要进行实验室检查,监测相应的指标。对RV引起的无症状肠道外损伤要保持高度警惕。

双黄连、黄芪联用对小儿急性轮状病毒性肠炎的疗效观察

目的:评价双黄连粉针剂、黄芪注射液联合应用对小儿急性轮状病毒肠炎的疗效。方法:通过对照观察50例患儿应用双黄连、黄芪联合治疗急性轮状病毒性肠炎的疗效。结果:观察组显效率为66.0％,总有效率为92.0％,与对照组相比均具有高度显著性差异。结果:说明双黄连、黄芪联用对小儿急性轮状病毒性肠炎具有起效快、疗效好、止泻时间快、安全可靠、无毒副作用,值得临床推广应用。

小鼠杏仁中央核逆向投射的研究

杏仁核作为边缘系统的重要组成部分,与情绪异常的精神疾病相关,而杏仁中央核和基底核在恐惧条件化、动机奖赏、药物成瘾以及颞叶癫痫等疾病中起到重要作用。神经连接是神经元行使功能的生理学基础,近年来嗜神经病毒已经成为方便有效的神经环路示踪技术。本文采用一种新型的狂犬病毒RV,该病毒是一种嗜神经病毒,能在神经中逆向传导,且不跨突触。将该病毒注射到杏仁中央核,7d后取脑组织进行切片观察,发现病毒标记到杏仁核区域,如纹状体、杏仁核基底核、外侧核、前端杏仁核背侧、杏仁核纹状体过渡区,以及皮层各区域。此外还包括丘脑和下丘脑的某些区域。本文研究证明杏仁中央核接收来自很多脑区的广泛、直接的纤维输入,研究结果对于后续杏仁中央核的功能研究具有重要的参考价值。

120例秋季腹泻小儿的心肌酶观察

目的探讨婴幼儿秋季腹泻患儿的心肌酶学变化。方法将2012年2月-2015年2月我院诊治的120例婴幼儿秋季腹泻患者纳入研究,轮状病毒阳性者入观察组共67例,轮状病毒阴性患儿53例作对照组,测定两组AST、CK、CK—MB、LDH、HBDH及心电图的变化。结果观察组的AST、CK、CK-MB、HBDH明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组心电图异常率明显高于对照组(P<0.01)。结论轮状病毒不仅可以侵犯到人体的胃肠道系统,还有可能进入呼吸道等部位,造成心肌损伤乃至小儿病毒性心肌炎。心肌酶谱是反映心肌损害的特异性指标,RV肠炎患儿的临床治疗,可将心肌酶谱作为一项重要的基础性检测指标,以便早期判断心肌损害程度,及早加用营养心肌药物治疗保护心肌。

聚乙二醇可提高包被抗原的稳定性

为了筛选抗原封闭液中聚乙二醇(PEG4000)的适宜浓度,首先用狂犬病病毒(Rabies virus,RV)细胞培养物包被抗原板,以含1%BSA和5%蔗糖的PBST溶液中加入不同浓度的PEG作为封闭液,分别于4℃、37℃保存7,14,30,90,180 d,从中筛选含适宜浓度PEG的封闭液,然后分别用乙肝表面抗原(HBsAg)、猪瘟病毒E2抗原(CSFV E2)和猪繁殖与呼吸综合征nsp2基因(PRRSV nsp2)原核表达产物作为包被抗原,对所筛选出的封闭液进行稳定性评价。结果表明:当封闭液为含12%PEG+1%BSA+5%蔗糖的PBST时,上述4种抗原包被板均可在37℃稳定保存180 d。由于该封闭液对不同来源抗原所具有的良好稳定性,初步推断该封闭液可能具有较广泛的应用前景。

喜炎平注射液治疗小儿轮状病毒性肠炎的疗效分析及治疗策略研究

分析小儿轮状病毒性肠炎患儿在治疗过程中,采用喜炎平注射液的临床效果。同时探寻治疗该疾病的临床有效治疗方法。方法 以我院2021~2022年就诊治疗的40例确诊小儿轮状病毒性肠炎患儿病例为研究资料。其中,从病例治疗过程中分析患者的治疗方案特点及临床效果反馈特点,重点分析喜炎平注射液临床应用效果。分组的时候,结合治疗方案,将其分组对比。对照组治疗方案为常规药物,观察组治疗方案为喜炎平注射液为主。整理各组患者的临床治疗效果,及相关的临床观察指标,探寻临床治疗方案的价值。结果 对比临床治疗反馈结果,两组治疗有效数据均高于90.00%,无组间对比差异(P>0.05);临床症状时间改善对比中,在粪便改善时间存在差异,其时间指标无差异(P>0.05);症候积分对比中,各组经过治疗均得到明显改善(P<0.05),但是组间对比无差异(P>0.05);临床不良反应中,组间对比差异明显(P<0.05)。结论 治疗小儿轮状病毒性肠炎采用喜炎平注射液具有良好的治疗效果,但是该药物存在可能过敏的情况。所以需要坚持用药监督和管理,控制药物剂量和滴注速度。

北京婴幼儿腹泻中G1、G3型轮状病毒VP7基因分子进化动态分析

北京儿童腹泻中G1和G3型轮状病毒(Rotavirus,RV)的流行随时间动态变化。鉴于G1和G3型RV在疫苗研发设计中的重要地位,本研究依据前期对2007～2017北京腹泻就诊患儿中RV流行的监测结果,分别选取G1(15例)和G3(18例)型RV标本,应用DNAStar、MEGA 6.0和BEAST软件包及Datamonkey在线工具,分析和预测11年来其主要中和抗原VP7基因的分子进化动态。结果显示G1和G3型RV同近年世界各地的各自主要流行株之间的进化距离近,相比同一进化树分支内参考株的VP7基因并没有表现出特有的氨基酸变异,提示并未有特别的基因变异直接改变北京G1和G3型RV的流行。本研究中北京G1和G3型RV最近共同祖先株形成时间分别约为2005年和1996年,其VP7基因平均进化速率分别为2.29×10^(-3)和5.11×10^(-4)氨基酸替换·位点^(-1)·年^(-1)。尽管G1型的变异速率大于G3型,但有意思的是它们均无正向选择变异位点。群体流行历史(Bayesian skyline plot,BSP)分析显示人群中G1和G3型RV的感染水平呈现缓慢下降,并均在2010年前后出现了跳跃式下降,随后有所上升并维持在较平稳的感染水平,基本符合北京腹泻儿童中RV流行趋势监测,据此推测群体免疫压力可能是影响G1和G3型RV的流行分布随时间动态变化的原因。分子分析结果还显示本研究中G1和G3型RV和相应型别疫苗株之间的进化距离远,且均在主要抗原区存在变异,这些是否对疫苗应用效果产生影响仍需要对RV的流行进行持续监测。