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NGF和CgA对RWPE-1细胞内钙离子浓度变化的影响及其在慢性前列腺炎中的作用 被引量:3
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作者 丁华洋 樊松 +4 位作者 张力 郝宗耀 周骏 张翼飞 梁朝朝 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第2期173-180,共8页
目的探讨神经生长因子(NGF)和嗜铬颗粒蛋白A(CgA)处理后前列腺上皮细胞系RWPE-1细胞内钙离子浓度([Ca^(2+)]_i)的差异及NGF和CgA在慢性前列腺炎(CP)发病中的作用。方法不同浓度的NGF和CgA(50、200 ng/ml)刺激RWPE-1细胞,用激光共聚焦显... 目的探讨神经生长因子(NGF)和嗜铬颗粒蛋白A(CgA)处理后前列腺上皮细胞系RWPE-1细胞内钙离子浓度([Ca^(2+)]_i)的差异及NGF和CgA在慢性前列腺炎(CP)发病中的作用。方法不同浓度的NGF和CgA(50、200 ng/ml)刺激RWPE-1细胞,用激光共聚焦显微镜观察不同浓度的NGF和CgA刺激后细胞内[Ca^(2+)]_i变化,加入TRPV1受体拮抗剂后继续观察细胞内[Ca^(2+)]_i变化。然后,将正常细胞外液换成D-PBS,再加入NGF和CgA观察细胞内[Ca^(2+)]_i变化。结果 50 ng/ml NGF和CgA刺激细胞后,细胞内[Ca^(2+)]_i未见明显变化。200 ng/ml NGF和CgA刺激细胞后,细胞内[Ca^(2+)]_i明显增加,加入TRPV1受体拮抗剂后,细胞内[Ca^(2+)]_i未见明显变化。将正常细胞外液换成D-PBS,用NGF和CgA刺激后,细胞内[Ca^(2+)]_i未见明显改变。结论CP的发生可能是通过分泌和释放NGF和CgA,引起前列腺上皮细胞膜TRPV1通道开放,促使细胞内钙离子浓度增加,导致前列腺上皮分泌功能下降所致。 展开更多
关键词 前列腺炎 神经生长因子 嗜铬颗粒蛋白A rwpe-1细胞 钙离子
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胰岛素样生长因子-1调控下染料木黄酮对睾酮诱导RWPE-1细胞增生的抑制作用 被引量:2
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作者 任国峰 汤凌 +2 位作者 朱明元 杨丽娜 黄忆明 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期447-450,共4页
目的研究在胰岛素样生长因子(IGF-1)调控下,染料木黄酮(Gen)对睾酮诱导的人前列腺上皮细胞RWPE-1增生的抑制作用及对细胞周期影响的分子机制。方法采用睾酮刺激RWPE-1细胞增生,观察细胞形态学变化,用0.63、1.25、2.5、5、10、20、40和80... 目的研究在胰岛素样生长因子(IGF-1)调控下,染料木黄酮(Gen)对睾酮诱导的人前列腺上皮细胞RWPE-1增生的抑制作用及对细胞周期影响的分子机制。方法采用睾酮刺激RWPE-1细胞增生,观察细胞形态学变化,用0.63、1.25、2.5、5、10、20、40和80μmol/L的Gen与0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4和12.8nmol/L的IGF-1处理RWPE-1细胞24h、48h、72h后,测定各组细胞存活率;流式细胞仪检测对照组、40μmol/LGen组、6.4nmol/LIGF-1组和40μmol/LGen+6.4nmol/LIGF-1组的细胞周期变化,WesternBlot检测细胞周期蛋白cyclinB1、cyclinD1和细胞周期蛋白激酶CDK4。结果 2μmol/L睾酮可显著诱导RWPE-1细胞增生,2.5~80μmol/LGen均能抑制其增生,且抑制作用随着浓度增高和时间延长而增强,6.4nmol/LIGF-1调控下40μmol/LGen可显著减少G0/G1期细胞百分比,增加G2/M期细胞百分比,上调cyclinB1的表达,下调cyclinD1、CDK4的表达。结论 IGF-1调控下Gen可影响细胞周期素和周期素依赖激酶的表达,诱导G2/M期细胞阻滞,抑制睾酮诱导的RWPE-1细胞增生。 展开更多
关键词 良性前列腺增生症 大豆异黄酮 染料木黄酮 胰岛素样生长因子-1 rwpe-1细胞
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丝氨酸-苏氨酸激酶11基因沉默对人前列腺癌RWPE-1细胞侵袭及迁移能力的影响及其作用机制
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作者 邓玮 唐鸿 吕玉宇 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第7期713-717,722,共6页
目的探讨丝氨酸-苏氨酸激酶11(liver kinase B1/serine-threonine kinase 11,LKB1)基因沉默对人前列腺癌RWPE-1细胞侵袭及迁移能力的影响及其作用机制。方法将质粒LKB1-sh RNA1及sh NC分别转染至RWPE-1细胞中,同时设空白对照组(未转染),... 目的探讨丝氨酸-苏氨酸激酶11(liver kinase B1/serine-threonine kinase 11,LKB1)基因沉默对人前列腺癌RWPE-1细胞侵袭及迁移能力的影响及其作用机制。方法将质粒LKB1-sh RNA1及sh NC分别转染至RWPE-1细胞中,同时设空白对照组(未转染),经G418筛选出稳定表达细胞株。RT-PCR及Western blot法检测RWPE-1细胞中LKB1基因mRNA转录及蛋白表达水平;划痕试验及Transwell小室试验分别检测LKB1基因沉默对RWPE-1细胞迁移及侵袭能力的影响;RT-PCR及Western blot法检测RWPE-1细胞中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及MMP-9基因mRNA转录及蛋白的表达水平。结果与sh NC组及空白对照组比较,LKB1-shRNA1组RWPE-1细胞中LKB1基因mRNA转录及蛋白表达水平明显降低(P<0.001);细胞划痕愈合能力及侵袭细胞数明显升高(P<0.001);TGF-β1、MMP-2及MMP-9基因mRNA转录及蛋白表达水平均明显上升(P<0.01)。结论 LKB1基因沉默可显著提高RWPE-1细胞的转移及侵袭能力,可能是通过上调TGF-β1、MMP-2及MMP-9表达水平产生作用的。 展开更多
关键词 丝氨酸-苏氨酸激酶11 基因沉默 前列腺癌rwpe-1细胞 细胞侵袭 细胞迁移
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前列腺癌中netrin-1/UNC5B的表达及临床意义 被引量:1
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作者 刘娇 孔垂泽 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2013年第12期1072-1076,共5页
目的:通过比较不同侵袭能力的前列腺癌细胞netrin-1/UNC5B表达量的差异,为前列腺癌寻找新的生物标志物及治疗手段。方法:选取前列腺癌细胞系DU145、22RV1、PC3、PC3M、RWPE-1,通过RT-PCR、Western印迹检测netrin-1/UNC5B的表达及其差异... 目的:通过比较不同侵袭能力的前列腺癌细胞netrin-1/UNC5B表达量的差异,为前列腺癌寻找新的生物标志物及治疗手段。方法:选取前列腺癌细胞系DU145、22RV1、PC3、PC3M、RWPE-1,通过RT-PCR、Western印迹检测netrin-1/UNC5B的表达及其差异,并通过免疫荧光检测配体netrin-1及其受体UNC5B在前列腺癌细胞中的定位。结果:netrin-1/UNC5B在前列腺癌细胞中均表达,侵袭能力强的前列腺癌细胞中netrin-1表达量明显增多(P<0.05),而UNC5B在RWPE-1(正常细胞)中表达量明显增多(P<0.05)。结论:netrin-1/UNC5B表达量与前列腺癌的浸润及进展程度紧密关联,有望作为一种潜在的生物标志物来预测前列腺癌的恶性程度。 展开更多
关键词 前列腺癌 NETRIN-1 UNC5B DU145细胞 22RV1细胞 PC3细胞 PC3M细胞 rwpe-1细胞
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尿酸刺激对前列腺上皮细胞的影响及其作用机制 被引量:1
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作者 张坤 胡建鹏 +3 位作者 徐致鹏 谈建 汤华明 崔飞伦 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期698-701,共4页
目的探讨尿酸在诱导前列腺上皮RWPE-1细胞发生炎性反应中的作用及其作用机制。方法浓度分别为0、8、12、16 mg/dl的尿酸处理前列腺上皮细胞RWPE-1细胞,倒置显微镜观察RWPE-1细胞的生长及形态学变化;Western blot方法检测RWPE-1细胞内Tol... 目的探讨尿酸在诱导前列腺上皮RWPE-1细胞发生炎性反应中的作用及其作用机制。方法浓度分别为0、8、12、16 mg/dl的尿酸处理前列腺上皮细胞RWPE-1细胞,倒置显微镜观察RWPE-1细胞的生长及形态学变化;Western blot方法检测RWPE-1细胞内Toll样受体4(TLR- 4)、核转录因子-κBp65(NF-κBp65)、κB抑制蛋白激酶α(IKKα)、κB抑制蛋白激酶β(IKKβ)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性蛋白的表达变化;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测IKKα、IKKβ、NLRP3、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)的mRNA表达变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化。结果倒置显微镜观察显示,RWPE-1细胞形态学变化与尿酸作用具有浓度依赖关系;RWPE-1细胞中TLR4、NF-κBp65、IKKα、IKKβ、NLRP3炎性蛋白的表达水平随尿酸浓度的增高而增高,呈正相关(P<0.05);随着尿酸的浓度升高,IKKα、IKKβ、NLRP3、Caspase-1基因的表达呈上调趋势,呈正相关(P<0.05);尿酸刺激RWPE-1细胞12 h后,各组(0、8、12、16 mg/dl)TNF-α含量分别为:(9.69±0.22)、(9.56±0.47)、(9.63±0.51)、(10.08±0.11) ng/L,IL-1β分别为:(7.75±0.52)、(7.85±0.87)、(9.27±1.11)、(9.62±0.44) ng/L,差异无统计学意义(P>0.05);24 h后各组TNF-α分别为:(24.86±0.61)、(25.14±0.83)、(30.34±0.61)、(30.77±1.84) ng/L,IL-1β分别为:(14.81±0.23)、(15.53±0.30)、(22.87±0.65)、(25.60±0.70) ng/L;48 h后各组TNF-α分别为:(26.72±0.37)、(26.80±1.14)、(31.60±0.76)、(42.98±1.49) ng/L,IL-1β分别为:(25.36±0.70)、(30.29±0.62)、(38.91±1.52)、(40.97±1.17) ng/L,尿酸处理24、48 h后,高浓度尿酸促进了RWPE-1细胞中IL-1β和TNF-α的分泌(P<0.05)。结论尿酸可以诱导前列腺上皮RWPE-1细胞发生炎性反应,而激活TLR4/NF-κB和NLRP3/Caspase- 1信号通路是其机制之一。 展开更多
关键词 尿酸 rwpe-1细胞 炎性反应 Toll样受体4/核转录因子-κB信号通路 Nod样受体蛋白3/半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-1信号通路
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Effects of astaxanthin on oxidative stress induced by Cu^(2+) in prostate cells
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作者 Hong-zhou MENG Xiao-feng NI +2 位作者 Hai-ning YU Shan-shan WANG Sheng-rong SHEN 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2017年第2期161-171,共11页
Astaxanthin(AST), a carotenoid molecule extensively found in marine organisms and increasingly used as a dietary supplement, has been reported to have beneficial effects against oxidative stress. In the current pape... Astaxanthin(AST), a carotenoid molecule extensively found in marine organisms and increasingly used as a dietary supplement, has been reported to have beneficial effects against oxidative stress. In the current paper, the effects of AST on viability of prostate cells were investigated by 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT) assay; cell apoptosis and intracellular reactive oxygen species(ROS) levels were determined by flow cytometry; the mitochondrial membrane potential(MMP) was measured by fluorospectrophotometer; and activities of malondialdehyde(MDA), superoxide dismutase(SOD), catalase(CAT), and glutathione peroxidase(GSH-Px) were evaluated by a detection kit. The results show that copper ion(Cu^2+) induced apoptosis, along with the accumulation of intracellular ROS and MDA, in both prostate cell lines(RWPE-1 and PC-3). AST treatments could decrease the MDA levels, increase MMP, and keep ROS stable in RWPE-1 cell line. An addition of AST decreased the SOD, GSH-Px, and CAT activities in PC-3 cell line treated with Cu^2+, but had a contrary reaction in RWPE-1 cell lines. In conclusion, AST could contribute to protecting RWPE-1 cells against Cu^2+-induced injuries but could cause damage to the antioxidant enzyme system in PC-3 cells. 展开更多
关键词 Oxidative stress PC-3 rwpe-1 ASTAXANTHIN Copper ion
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