罗氏沼虾RXR基因克隆及其对蜕皮相关基因的调控

为研究维甲酸类X受体(RXR)在甲壳动物蜕皮过程中的调控作用,实验采用RACE技术克隆获得罗氏沼虾Mr-RXR基因,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析了Mr-RXR及其他蜕皮相关基因(MIH、EcR、E75和CHIT)在罗氏沼虾不同组织、不同蜕皮阶段的表达情况,并采用RNA干扰(RNAi)探究Mr-RXR对罗氏沼虾蜕皮相关基因表达的调控作用。结果显示,Mr-RXR基因cDNA全长2241 bp(GenBank登录号MZ501612),包括36 bp的5'末端非翻译区(UTR)和719 bp的3'UTR,开放阅读框(ORF)为1386 bp,共编码461个氨基酸。罗氏沼虾RXR氨基酸序列与甲壳动物同源性较高,存在保守的DNA结合域(DBD)和配体结合域(LBD)。Mr-RXR在罗氏沼虾所有组织中均表达,精巢、眼柄、心脏等组织中表达量较高,其表达水平随蜕皮周期改变,眼柄和肌肉组织中均在蜕皮前期表达量最高,与EcR基因表达模式基本同步;E75和CHIT基因表达模式较为相似,眼柄和肌肉组织分别在蜕皮前期和蜕皮后期高表达;MIH基因仅在眼柄组织表达,且蜕皮间期表达量最高。采用3μg dsRNA/g虾的剂量进行为期12 d的RNAi实验诱导Mr-RXR沉默,罗氏沼虾出现大量死亡,qRT-PCR显示,眼柄和肌肉中Mr-RXR干扰效率分别为79%和55%。眼柄组织中Mr-RXR基因沉默后,MIH基因表达未受影响,EcR、E75和CHIT基因表达水平显著降低,肌肉组织中,Mr-RXR沉默仅造成CHIT基因表达水平的显著下降,推测Mr-RXR可能通过影响EcR、E75和CHIT基因表达调控罗氏沼虾蜕皮过程。本研究结果将为甲壳动物蜕皮调控机制研究提供基础资料。

RXRα基因遗传变异与2型糖尿病易感性的关系

目的探讨江苏汉族人群视黄醛X受体α(RXRα)基因遗传变异与2型糖尿病(Type2 diabetes Mellitus,T2DM)易感性的关系。方法采用病例对照研究,选取新诊断的T2DM患者1 105例,与患者年龄、性别频数匹配的健康对照1 107例,用Real-time PCR联合Taqman-MGB探针方法进行基因型检测。结果在调整性别、年龄和体重指数等因素后,4个多态位点均未发现与T2DM易感性存在统计学关联(均P>0.05)。然而,RXRα基因4个潜在功能性位点构成的主要单倍型中,与最常见的单倍型GTAT相比,TTAT单倍型(含变异等位基因rs1045570T)可显著降低T2DM的患病风险〔调整OR(95%CI)=0.868(0.801～0.940)〕。结论 RXRα基因遗传变异可能与江苏汉族人群T2DM遗传易感性有关。

海湾扇贝维甲酸受体(RXR) cDNA克隆与表达分析

维黄酸受体(RXR)是核受体超家族的重要成员,已有研究表明其在脊椎动物中广泛参与调控生长发育、新陈代谢等多种重要的生理过程。本研究采用RACE技术克隆获得海湾扇贝(Argopecten irradians)RXR(AiRXR)cDNA序列,采用荧光定量RT-PCR技术分析该基因在性腺发育不同时期的不同组织中的表达特点。结果表明,AiRXR的c DNA序列开放阅读框为1338bp,含有两个亚型:AiRXRα和AiRXRβ,两个亚型之间在T-box中相差4个氨基酸。该蛋白序列与人(Homo sapiens)和栉孔扇贝(Chlamys farreri)等的RXR相似性很高。AiRXR进化树分析显示,AiRXR与软体动物RXR聚为一支。AiRXR基因具有广泛的组织表达特点,在检测的组织中(外套膜、鳃、性腺、闭壳肌)均有表达,推测AiRXR以信号分子的形式参与多种组织细胞的生命过程;在海湾扇贝性腺发育过程中AiRXR基因在性腺发育的各时期均有表达且增殖期表达量最高,说明AiRXR基因可能参与调节性腺发育和分化的过程。

不同日龄大白猪视黄素X受体γ基因的表达研究

本研究采用RT-PCR方法对大白猪的RXR-γ基因在1日龄、90日龄、180日龄、270日龄和360日龄的心、肝、胃、脾、肾、肺、大肠、小肠、肌肉、子宫、卵巢共11个组织的表达情况进行了研究。结果表明,RXR-γmRNA在大白猪的心脏、脾脏、大肠、小肠和肌肉组织中持续高表达,而肾脏不表达该基因,肝脏组织也只在360日龄时有微量表达。

脂联素通路多态性与汉族人群2型糖尿病遗传易感性的多因素分析

目的:探讨江苏汉族人群脂联素通路基因多态性和环境的联合作用与2型糖尿病的关系。方法:采用病例对照研究,收集新诊断T2DM病例(1105例)和健康对照(1107例)的临床和流行病学相关资料。利用Real-time PCR联合Taqman-MGB探针方法对19个多态性位点进行基因分型。结果:显性遗传模型的单因素Logistic回归分析发现ADIPOQ基因rs7649121、PPARγrs3856806基因型频率在病例与对照组的分布差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示糖尿病家族史、高血压史、腰围、血清脂联素浓度、吸烟、饮酒、ADIPOQ rs7649121、rs12495941,PPARγrs3856806等因素与T2DM的发病风险存在统计学关联(P<0.05)。结论:脂联素通路多态性与环境联合作用对于T2DM遗传易感性可能具有一定的影响。