新化合物RY10-4的大鼠体内药动学研究

目的:建立新化合物RY10-4在大鼠血浆中的HPLC分析方法,并采用该方法研究RY10-4在大鼠体内的药动学。方法:以甲醇:0.2%磷酸水溶液体系作为RY10-4的HPLC-UV检测流动相。首先采用50%磷酸-乙酸乙酯进行萃取,辅以涡旋,离心等操作从血液中提取出目的化合物。而后以芹菜素为内标进行专属性、线性、精密度、回收率等方法验证。最后以SD大鼠为动物模型,绘制药-时曲线,并用DAS 2.1.1进行分析。结果:所建立的HPLC方法以及血浆样品处理方法,均可满足实验要求。DAS软件计算显示,RY10-4符合二室模型和一级药动学。RY10-4主要通过中央室消除,而不是通过周围室的扩散消除。高浓度的RY10-4易产生积蓄,延缓药物消除。结论:RY10-4的HPLC检测方法条件温和,适用性强。药动学显示RY10-4血药浓度达峰和消除都较快,在高浓度下易引起蓄积作用。

先导化合物RY10-4体外抑制乳腺癌细胞活性研究

目的本研究在前期先导化合物RY10-4制备和初步抗肿瘤活性筛选的基础上,进一步利用细胞体外实验,考察其对乳腺癌肿瘤细胞的敏感性和作用强度,为随后进行的体内实验提供参考,为进一步研究其药理活性奠定基础。方法利用MTT法评价RY10-4对乳腺癌细胞株MDA-MB-231的增殖抑制活性。结果RY10-4对乳腺癌细胞株MDA-MB-231呈现明显的浓度依赖关系,随着浓度的增加其抑制作用逐渐增加,当其药物浓度为40μmol/L时,其抑制率为86.7%。IC_(50)值为0.38。结论先导化合物RY10-4在体外具有良好的抑制乳腺癌细胞活性。

RY10-4对乳腺癌MCF-7裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制

目的:探讨2-(1-羟基-4-酮-2,5-环己二烯)-吡喃-4-酮(RY10-4)对乳腺癌裸鼠移植瘤抑制作用及其可能的作用机制。方法:建立乳腺癌(MCF-7)裸鼠移植瘤模型,将造模裸鼠随机分为模型组、RY10-4低剂量组(7.5 mg·kg-1)、RY10-4高剂量组(15 mg·kg-1)和紫杉醇组(15 mg·kg-1);各组均采取隔天腹腔注射给药,检测各组荷瘤裸鼠移植瘤体积和体质量变化。给药16 d后,处死所有裸鼠,称取各组移植瘤质量,TUNEL法检测凋亡指数,并通过Western blot测定移植瘤中Bcl-2、Bax和MAPK通路蛋白的表达。结果:与模型组比较,RY10-4低、高治疗组和紫杉醇组瘤体积明显减小,瘤质量明显减轻,抑瘤率分别为29.8%,47.2%,53.8%。TUNEL法结果显示,各治疗组能明显引起移植瘤细胞凋亡(P<0.01)。Western blot结果显示,随着RY10-4治疗量的增加抗凋亡蛋白Bcl-2表达减弱,促凋亡蛋白Bax的表达增强,Bcl-2/Bax值显著下降,与模型组相比差异均有统计学意义(P<0.05);另外,RY10-4治疗组移植瘤细胞中的p-p38和p-ERK表达量明显增加。结论:RY10-4能够抑制乳腺癌移植瘤的生长和诱导乳腺癌细胞的凋亡,其诱导凋亡作用可能与下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白,降低Bcl-2/Bax值,并激活p38和ERK信号通路有关。