circTHBS1调节miR-135a-5p/RAB1A轴对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响

该文旨在探究环状RNA血栓反应蛋白-1(circTHBS1)调节微小RNA-135a-5p(miR-135a-5p)/Rab家族蛋白1A(RAB1A)轴对乳腺癌(BC)细胞恶性生物学行为的影响。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测BC细胞系中circTHBS1、miR-135a-5p和RAB1A mRNA的表达情况,筛选最佳细胞系进行后续实验;通过RNase R处理验证circTHBS1的环状结构。将MCF-7细胞分为Control组、sh-NC组、sh-THBS1组、sh-THBS1+inhibitor-NC组和sh-THBS1+miR-135a-5p inhibitor组。采用qRT-PCR检测转染效率;采用双荧光素酶报告基因法确认circTHBS1和miR-135a-5p、miR-135a-5p和RAB1A的相互作用;Western blot法检测RAB1A在MCF-7细胞中的表达情况;采用平板克隆法检测MCF-7细胞增殖情况;使用流式细胞仪检测MCF-7细胞凋亡情况;划痕实验检测MCF-7细胞迁移情况;Transwell法检测MCF-7细胞侵袭情况;通过裸鼠移植瘤实验检测circTHBS1对瘤组织内BC细胞生长的影响。双荧光素酶报告基因实验结果显示,circTHBS1与miR-135a-5p、RAB1A与miR-135a-5p均具有靶向关系。与正常人乳腺上皮细胞MCF-10A相比,circTHBS1和RAB1A在BC细胞系中表达水平显著增加,miR-135a-5p表达水平显著下降(P<0.05);敲低circTHBS1表达可以抑制MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭,诱导MCF-7细胞凋亡(P<0.05);抑制miR-135a-5p表达可逆转敲低circTHBS1表达对MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭的抑制作用,并抑制MCF-7细胞凋亡(P<0.05);通过裸鼠移植瘤实验发现,敲低circTHBS1表达后,裸鼠BC瘤组织质量和体积下降,同时RAB1A表达量下降,miR-135a-5p表达量升高(P<0.05)。circTHBS1在BC细胞中高表达,敲低circTHBS1可以通过调控miR-135a-5p/RAB1A轴抑制BC细胞的恶性生物学行为。