经肝动脉灌注栓塞微球对比碘化油乳剂治疗VX2兔肝癌模型对VEGF、CTGF和HIFα-1的影响及疗效评估

目的:观察栓塞微球对比碘化油乳剂经肝动脉灌注化疗栓塞对VX2兔肝癌模型血管内皮生长因子(VEGF)、结缔组织生长因子(CTGF)和缺氧诱导因子(HIF)α-1的影响及疗效。方法:选取VX2兔肝癌模型24只,使用随机数字表法分为空白对照组、栓塞微球组、碘化油乳剂组,每组8只。经肝动脉分别灌注0.9%氯化钠溶液1 mL、栓塞微球0.5 mL+表柔比星溶液0.5 mL、碘化油乳剂0.5 mL+奥沙利铂0.5 mL,观察并比较各组VX2兔肝癌模型VEGF、CTGF和HIFα-1水平及病灶坏死情况。结果:行化疗药灌注及栓塞后,各组的VEGF、CTGF和HIFα-1水平均有不同程度升高。术后7、14 d,栓塞微球组、碘化油乳剂组的VEGF、CTGF和HIFα-1水平明显高于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后28 d,栓塞微球组、碘化油乳剂组的Ⅱ—Ⅳ级病灶坏死率高于空白对照组。栓塞微球组与碘化油乳剂组病灶坏死率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:经肝动脉栓塞治疗后,因使用栓塞药物不同造成不同栓塞水平可能影响VEGF、CTGF和HIFα-1表达及病灶坏死率。

TACE联合索拉非尼抗兔VX2肝癌血管生成

目的利用新西兰兔VX2肝癌模型,探讨经导管动脉化疗栓塞术(TACE)联合索拉非尼治疗肝癌的疗效、抗血管生成的作用机制及联合时机选择。方法新西兰兔VX2肝癌模型30只,随机分为生理盐水对照组、单TACE组、单索拉非尼组、TACE术前+索拉非尼组、TACE术后+索拉非尼组(各6只)。分别于TACE术前7d、术前1d、术后第3、7和14天通过ELISA法定量测定血清血管内皮生长因子(VEGF),术后第14天处死所有瘤兔行肿瘤组织微血管密度(MVD)免疫组化染色,同时比较各组肿瘤增长率。结果与生理盐水对照组比较,单TACE组、TACE术前+索拉非尼组、TACE术后+索拉非尼组术后3d血清VEGF显著升高(P<0.05),但TACE术前+索拉非尼组VEGF峰值低于单TACE组、TACE术后+索拉非尼组两组(P<0.05);14d各组VEGF水平差异均有统计学意义(P<0.05),TACE术前+索拉非尼组VEGF水平最低,单TACE组最高。术后14dTACE术前+索拉非尼组MVD值高于生理盐水对照组和单索拉非尼组,但明显低于单TACE组(P<0.05)。术后14dTACE术前+索拉非尼组肿瘤增长量最小(P<0.05)。结论 TACE联合索拉非尼治疗兔VX2肝癌,可显著抑制肿瘤增长,疗效优于单纯TACE或单纯索拉非尼治疗;TACE术后VEGF水平升高,联用索拉非尼可降低血清VEGF水平,进而使肿瘤微血管密度下降;TACE术前联合索拉非尼抗肿瘤及抗血管生成的效果要优于术后。

能谱CT评价兔VX2肝癌抗血管生成治疗的实验研究

目的分析能谱CT对兔VX2肝癌模型抗血管生成疗效评估的价值。方法将开腹种植成功的68只肝癌模型,平均分为2组,对照组于移植瘤术后14 d开始,每天静脉注射和治疗组相同剂量安慰剂,生理盐水,连续注射7 d。治疗组每天静脉注射重组入血管内皮抑制素连续注射7 d。对建模成功的两组兔VX2肝移植瘤在种植后14 d、21 d均行能谱扫描。将重建图像数据传输到影像后处理工作站进行分析。在碘基图上定量测量肿瘤区域、邻近无瘤肝组织、腹主动脉的碘含量,分别计算标准化碘含量(NIC),比较治疗前后,肿瘤区域之间标准化碘含量的差异。结果治疗前,实验组、对照组肿瘤组织NIC均大于邻近无瘤肝组织,之间的差异具有统计学意义(P<0.05),而实验组和对照组之间无统计学差异。重组人血管内皮抑制素(Endostar,恩度)治疗后,治疗组肿瘤区域NIC小于对照组,并且小于治疗前肿瘤区域NIC,差异有统计学意义(P<0.05)。结论重组人血管内皮抑制素(恩度)表现出明显的抑制肿瘤血管生成作用,在化疗的过程可通过能谱扫描评价抗血管治疗的效果。

兔VX2肝癌模型制作的三种方法及其超声评价

目的:比较三种建立兔VX2肝癌模型方法的效果差异,评价超声在监测兔VX2肝癌中的价值,探讨建立兔VX2肝癌模型的最佳方法。方法:18只新西兰大白兔,随机分为三组:A组超声引导注入肿瘤组织块悬液;B组超声引导经皮穿刺种植肿瘤组织块;C组开腹手术瘤块种植法。分别于接种后第7、14、21和28天采用超声观测三组兔肝脏成瘤情况并记录,处死动物后取病理标本进行对照,比较不同方式肿瘤的生长特点。结果:超声观测下兔VX2肝癌多呈低或等回声结节,边界较清楚,血供较丰富,部分可见声晕。当肿块直径>1cm时,超声能准确地反映肿瘤生长情况,与病理检测结果一致。A组多为多结节散在分布,异位种植多;B组肿瘤多生长局限,多突出于肝表面被膜;C组肿瘤呈孤立结节,位于肝实质内。A、B、C三组接种成瘤率分别为:61.1%、44.4%、100%,差异有统计学意义(P<0.05)。单发率:11.1%、61.1%、88.9%。异位种植率:55.6%、38.9%、0%。平均存活时间:A组(38.2±4.5)d、B组(37.5±3.6)d、C组(41.2±3.5)d,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:三种方法均能制成肝癌模型,开腹手术瘤块种植法成功率高、模型性质稳定,是可推荐的建立兔肝癌模型的方法,超声检查是一种监测肝癌模型的有效手段。

兔VX2肝癌模型制作改良及影像学评价

目的对兔VX2肝癌模型制作进行改良,以用于介入治疗学研究,同时探讨瘤灶的CT表现及CT在检测瘤灶中的作用。方法将VX2瘤细胞接种于兔皮下使其成瘤并传代;新西兰兔24只,以改良嵌插法建立移植性肝癌模型,于建模后7、14、21 d分别行超声、CT及血管造影检查,用于检测兔肝VX2瘤灶,评估瘤灶生长变化;随后处死动物,进行尸解,评估影像检查结果。结果 24只(100%)动物以改良嵌插法建立移植性肝癌模型全部成功。瘤灶以种植后2周CT显示最清楚和典型,直径1 cm^2 cm左右,平扫呈低密度或等密度,动脉早期明显强化,门脉期呈低密度,与周围肝组织分界较清楚。肝动脉造影显示肿瘤富血供。而种植后超过3周的肿瘤大部分发生坏死。结论嵌插改良法是一种值得推广的建立移植性肝癌模型的方法;在对瘤灶进行影像学评价上应尽量选择CT检查,接种后1周左右的瘤灶较小而难以观察;2周左右呈肝动脉源性血供丰富的约1 cm^2 cm的实体瘤,造影征像为肿瘤血管与肿瘤染色;3周以上瘤灶大多出现明显示坏死;因此对1~2cm大小的兔VX2肝癌瘤体,最适合行血管造影检查。

实时超声造影技术分析兔VX2肝癌模型的实验研究

目的探讨应用实时超声造影（CEUS）技术检查兔VX2肝癌模型的临床价值。方法选取30只新西兰大白兔制成VX2肝癌模型，分别行常规超声检查及经兔耳缘静脉注射超声造影剂行CEUS检查，观察肝癌模型的影像学特点，获得并分析肝癌模型中肿瘤组织的CEUS定量参数的特点，并与肝癌模型的病理切片比较分析。结果兔VX2肝癌结节进行CEUS检查时均表现为典型的“快进快退”增强特点。兔VX2肝癌组织的AS、PI、AUC较周围邻近正常肝组织明显增高（P〈0．05）；AT、TTP较周围邻近正常肝组织明显减少（P〈0．05）。CEUS检查对免VX2肝癌结节的总体检出率及对微小肝癌、小肝癌的敏感度和准确度均高于常规超声检查（P〈0．05）。CEUS对直径0．3-0．5cm微小肝癌的检出率（85．71％）高于常规超声（P〈0．05）。与直径〉1．0cm小肝癌比较，直径〈1．0cm微小肝癌的CEUS定量参数AT、TTP明显增加（P〈0．05）。结论CEUS不仅能提供肝癌病灶的微小血管形态结构信息，而且能实时反映其血流灌注情况，有助于小肝癌及微小肝癌的栓出及定性诊断。

兔VX2移植性肝癌模型制作方法改良及模型MSCT评价

目的:探讨CT引导下经皮穿刺组织块注射制作兔VX2肝癌模型方法,并与传统开腹组织块种植法进行比较;并用MSCT对模型进行评价。方法:中国大耳白兔16只,随机分成两组,每组8只,分别采用CT引导下经皮穿刺瘤组织块肝脏注射及开腹直视下瘤组织块肝脏接种的方式进行成瘤。肿瘤种植后第15 d,进行CT平扫及增强扫描评价肿瘤接种成功率及生长情况,并观察两组动物感染率差别。结果:肿瘤接种成功率两组均为87.5%。肿瘤最大直径穿刺组和开腹组分别为(1.16±0.23)cm和(1.28±0.27)cm,两种方法成瘤大小差异无统计学意义。肿瘤种植后发生感染率开腹种植组(感染率42.3%)明显高于经皮穿刺组(感染率0),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CT引导下经皮穿刺注射瘤组织块建立兔VX2肝癌模型具有方法简单、成功率高、动物损伤小等特点,可以取代传统开腹直视下肝脏接种造模方式,有利于安全、高效地提供符合实验要求的肝癌动物模型,为肝癌临床治疗和相关基础研究做出贡献。

改良方法建立兔VX2肝癌模型及其MRI表现

目的:利用经典和改良后的造模方法分别建立兔VX2肝癌模型并进行MRI扫描。方法:将40只新西兰大白兔随机分成两组,A组20只,使用经典的开腹瘤块注射法,B组20只,使用改良CT下定位瘤块注射法。分别于术后14、17、21、25d进行MRI扫描[1]。观察指标:(1)两种方法的造模成功率。(2)两种接种方法的操作时间的差别。(3)兔VX2肝癌模型在影像学中的表现。结果:(1)A、B两组的造模成功率分别为87.5%和83.3%,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)A、B两组的平均接种时间分别为(28.6±4.90)min及(14.8±2.48)min,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)MRI扫描可以发现直径较小的肝肿瘤组织。结论:改良后的方法接种时间短、操作方便、成功率高,适用于建立稳定的兔VX2肝癌模型[2]。

利多卡因-表柔比星-超液化碘油混合乳剂在体外及兔肝癌模型中缓释效果的研究

目的探讨利多卡因-表柔比星-超液化碘油混合乳剂在体外缓释效果,及兔VX2肝癌模型经肝动脉化疗栓塞中利多卡因与碘油乳化后,肝癌组织中利多卡因的动态分布情况。方法采用W/O法对利多卡因-表柔比星乳剂进行体外理化实验,并在72 h内测定利多卡因-表柔比星-碘油乳剂的累积缓释量。随机选取48只新西兰白兔,超声引导下经皮穿刺建立兔VX2肝癌模型,分为实验组和对照组,每组24只,实验组以利多卡因-表柔比星-碘油混合乳剂进行栓塞,对照组先予以动脉内灌注利多卡因,再以表柔比星-碘油混合乳剂行栓塞,分别于术后的0.5、1、4、8、24、48、96、144 h时间点处死实验组及对照组各3只兔子,取肝癌组织,经UPLC-MS/MS测定癌组织中利多卡因药物浓度,通过Graphpad软件拟合肝癌组织中的利多卡因药物浓度随时间变化曲线。采用独立样本t检验比较TACE中利多卡因油包水技术和单纯灌注后肝癌组织中利多卡因的动态变化情况。结果体外实验中,利多卡因-表柔比星-碘油乳剂0~72 h内利多卡因浓度达到T50%约需30 min。24 h内利多卡因释放量超过80%。动物实验中,VX2肝癌模型建模成功率和TACE术成功率均为100%。与对照组相比,实验组兔肝癌组织中利多卡因的药物浓度量显著增加、清除显著降低,肿瘤组织内的利多卡因停留时间延长。结论利多卡因-表柔比星-碘油乳剂对利多卡因具有缓释作用,利多卡因与碘油乳化后经TACE治疗可增加各时间段组织中利多卡因的浓度,验证了利多卡因混合碘油后在肝脏内血管具有缓慢释放的效果。

细胞悬液法与组织块埋植法制作兔VX_2肝癌影像模型的对照研究

目的:通过对照细胞悬液法与组织块埋植法,选择较合理的兔VX2肝癌模型的造模方法。方法:取传代荷瘤VX2种兔,分离肿瘤,制备肿瘤细胞悬液和肿瘤组织块,取新西兰大白兔各10只,分别经超声导引肝内注射和开腹肝内组织块埋植,3周后处死模型兔,观察原位肿瘤大小,肝内、腹腔及肺部转移情况。结果:两种方法造模,成模率均为100%;组织块埋植法组原位肿瘤体积明显大于细胞悬液组;组织块埋植造模较少引起异位种植,肿瘤生长较为均一。结论:组织块埋植法优于细胞悬液法。

雷替曲塞经不同给药方式的药动学分析

目的通过兔肝VX2肿瘤模型,考察雷替曲塞经股静脉灌注、肝动脉灌注、肝动脉碘油混悬液注入、肝动脉灌注后明胶海绵栓塞给药的药动学情况。方法将40只VX2肝肿瘤模型新西兰兔按雷替曲塞不同给药方式随机分成股静脉灌注(A)组、肝动脉灌注(B)组、肝动脉碘油混悬液灌注(C)组、肝动脉灌注后明胶海绵栓塞(D)组,用LC-MS/MS法测定血浆中雷替曲塞的浓度,并计算药动学参数。结果 A,B,C,D 4组给药后,t_(max)均为5 min;t_(1/2)分别为(5.88±1.39),(7.31±2.60),(9.86±5.10),(7.19±2.27),其中C组t_(1/2)最长,与A组相比差异有统计学意义(P<0.05);C_(max)分别为(2 056.40±139.17),(1 389.21±180.28),(911.84±105.62),(1 133.41±181.42)ng·ml^(-1)·h^(-1),A组C_(max)明显高于B,C,D 3组,差异有统计学差异(P<0.05),其中C组最低;AUC_(0-t)分别为(5 482.72±1 007.07),(4 156.99±1 475.77),(2 785.13±1107.36),(3 903.64±947.25)ng·ml^(-1)·h^(-1)。A组AUC_(0-t)明显高于B,C,D 3组,差异有统计学意义(P<0.05),其中C组最低。结论与经股静脉灌注相比,雷替曲塞经肝动脉灌注、肝动脉碘油混悬液注入、肝动脉灌注后明胶海绵栓塞有可能使药物更多沉积在肿瘤区,增加局部药物浓度,可能增强其疗效,同时降低血浆中药物浓度,减轻副作用。

两种不同方式建立兔小肝癌模型的比较研究

目的通过开腹埋植瘤块及CT引导下经皮穿刺推注肿瘤块方式建立兔VX2小肝癌模型,探讨不同方法建立小肝癌模型的应用价值。方法24只新西兰大白兔,随机分为实验组和对照组两组,每组各12只。术前先采用耳中央动脉采血方式检测两组实验兔肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及总胆红素(TB)水平,其中实验组实验兔采用外科开腹直视下左肝叶埋植瘤块的方法,对照组实验兔采用CT导向下经皮穿刺肝叶推送瘤块的方法建立模型兔。术后7天、14天各组模型兔分别行CT增强扫描及DSA造影观察是否存在腹腔异位种植及实验室检测肝功能(ALT、AST、TB),并于术后14天随机处死每组模型兔各2只进行病理学检测,其余模型兔记录生存周期。结果两组模型兔均检测到肝脏肿瘤生长,成瘤率(100%)两组无明显统计学差异。实验组模型14天CT检测肿瘤最大径及最小径分别为(2.01±0.11)cm,(1.29±0.33)cm与对照组实验兔(5.21±1.23)cm,(3.56±2.36)cm相比具有统计学差异,实验组实验兔7天ALT、AST及TB分别为(38.44±1.40)U/L,(40.67±8.77)U/L,(2.42±0.50)μmol/L较之于对照组实验兔(37.58±1.79)U/L,(39.69±11.40)U/L,(2.06±0.46)μmol/L无明显统计学差异。术后14天实验组模型兔ALT、AST及TB分别为(53.59±8.63)U/L,(61.39±8.50)U/L,(2.52±0.24)μmol/L较之于对照组实验兔(86.53±5.09)U/L,(87.12±3.50)U/L,(3.23±0.23)μmol/L存在统计学差异。实验组模型生存时间为(40.45±3.08)天较之于对照组(30.45±2.98)天,存在统计学差异。结论外科开腹开腹埋植瘤块的方式建立兔VX2肝脏移植瘤模型具有更好的肿瘤形态、生存周期更适用于相关实验研究。