Rabdosinate调节生长素极性运输蛋白PIN1、PIN3和PIN4抑制拟南芥幼苗根生长

利用3种拟南芥生长素极性运输外运载体突变体及4种转基因株系研究了二萜rabdosinate抑制拟南芥幼苗主根及侧根生长的作用机制。结果显示,60~80μmol·L^-1的rabdosinate显著抑制野生型拟南芥幼苗主根生长及侧根形成,而对突变体pin1、pin2和pin3主根未显示明显的抑制效应,对侧根的抑制减弱;发现rabdosinate(60~80μmol·L^-1)引起生长素报告株系根尖DR5活性升高,并增加融合蛋白PIN1-GFP丰度以及减少PIN3-GFP和PIN4-GFP的丰度。推断rabdosinate可通过增加PIN1丰度促进了根部生长素向顶运输,而减少PIN3丰度降低根尖部生长素的横向转运,引起了生长素在根尖部的累积及生长素浓度梯度的改变,进而抑制幼苗主根生长及侧根发育。

对映-贝壳杉烷二萜化合物Rabdosin B对人肝癌细胞HepG2生长的影响

采用显微观察法、生长曲线法检测RabdosinB对人肝癌细胞HepG2的增殖抑制和致死效应；同时采用考马斯亮蓝染色法检测该化合物对与细胞贴壁性相关的应力纤维的影响，以探讨对映-贝壳杉烷二萜化合物RabdosinB对人肝癌细胞HepG2的增殖影响及致其死亡的作用．研究结果表明：RabdosinB低浓度条件下（3．125～12．5μmol·L^-1），人肝癌细胞HepG2增殖受到明显的抑制；高浓度条件下（25～50μmol·L^-1），处理时间为0～24h时，HepG2细胞的增殖被完全抑制；当药物持续处理24～60h时，细胞显示出明显的致死效应，其中25μmol·L^-1处理组细胞显示了凋亡特征，而50μmol·L^-1处理组则显示了坏死现象．细胞的应力纤维随药物浓度增加，其数量逐渐减少，最后降解．由此所得结论是：RabdosinB表现了显著的细胞毒性，在低浓度条件下抑制细胞生长，高浓度条件下可通过凋亡和坏死途径致细胞死亡．其机理尚需进一步研究．

Rabdosin B对急性早幼粒白血病细胞HL-60分化的诱导作用

目的研究螺环内酯型对映-贝壳杉烷型二萜rabdosin B(RB)诱导HL-60向成熟粒细胞分化的特征及机制。方法采用台盼蓝染色、吉姆萨染色、硝基四氮唑蓝(NBT)还原力测定及流式细胞术检测RB对HL-60细胞增殖、细胞周期、NBT还原力、细胞吞噬及细胞表面抗原CD11b表达的影响。结果 RB在1.0、3.0、5.0μmol/L下抑制HL-60细胞增殖,引起HL-60细胞G0/G1期阻滞,增加HL-60细胞肾形核和分叶核细胞比率,并伴随细胞NBT还原力和吞噬能力显著增强以及CD11b阳性细胞率明显上升。进一步检测显示,活性氧(ROS)清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC,300μmol/L)及NADPH氧化酶抑制剂夹竹桃麻素(APO,100μmol/L)和二联苯碘锚(DPI,0.1μmol/L)不仅可显著抑制RB诱导的细胞内ROS升高,并且可显著抑制RB诱导的HL-60细胞分化的各项特征指标的改变。结论 RB可通过上调HL-60细胞NADPH氧化酶活性,升高胞内ROS浓度,诱导HL-60细胞向成熟粒细胞分化。