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Expression of Nucleoprotein Gene of CTN Strain Rabies Virus from China in <i>E. coli </i>with Antigenicity 被引量:1
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作者 Wangbin Cao Ying He +2 位作者 Qiumei Shi Cairan Yang Yanying Zhang 《Open Journal of Veterinary Medicine》 2013年第7期309-313,共5页
The nucleoprotein (NP) gene of rabies CTN strain isolated from China was recombined into pMal-c2x. The antigenicity of the recombined MBP-NP fusion proteins was examined by western blotting and by enzyme linked immuno... The nucleoprotein (NP) gene of rabies CTN strain isolated from China was recombined into pMal-c2x. The antigenicity of the recombined MBP-NP fusion proteins was examined by western blotting and by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). The results demonstrated that the recombined protein possesses predominant antigenicity. 展开更多
关键词 rabies virus NUCLEOPROTEIN CTN strain Antigencity EXPRESSION
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病毒感染复数对狂犬病毒PM株增殖的影响 被引量:6
2
作者 陈智 孙艳 +4 位作者 牟建超 刘莉娜 刘宇 刘辉 刘杰 《微生物学免疫学进展》 2016年第5期30-33,共4页
目的:探讨不同感染复数(Multiplicity of infection,MOI)的狂犬病毒PM株在人二倍体细胞(2BS株)中增殖的影响,确定感染复数。方法将狂犬病毒PM株按照MOI 0.01、0.02、0.05、0.10、0.15、0.20接种至2BS细胞中,用显微镜观察接种病毒... 目的:探讨不同感染复数(Multiplicity of infection,MOI)的狂犬病毒PM株在人二倍体细胞(2BS株)中增殖的影响,确定感染复数。方法将狂犬病毒PM株按照MOI 0.01、0.02、0.05、0.10、0.15、0.20接种至2BS细胞中,用显微镜观察接种病毒后细胞的形态变化;培养3-5d后,第一次收获病毒液;更换培养液继续培养3-4d后,进行第二次收获。采用小鼠脑内滴定法测定狂犬病毒滴度,通过NIH法测定灭活病毒液的效价。结果当MOI为0.05-0.10时,细胞圆缩30%-40%,细胞能维持较好的生长形态,可收获病毒,病毒收获液的滴度较高(〉5.0 lgLD50/mL),且灭活后病毒液的效价较高(〉4.0IU/mL)。结论确定狂犬病毒PM株在人二倍体2BS细胞增殖的适宜MOI,为人用狂犬病疫苗生产工艺的优化提供了依据。 展开更多
关键词 狂犬病毒(pm株) 2BS细胞 感染复数 病毒滴度 效价
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狂犬病病毒CTNCEC25株保护效果的研究
3
作者 李慧 周维 +3 位作者 洪玮琪 叶才文 吴灼斌 王雪云 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期243-246,共4页
目的研究狂犬病病毒CTNCEC25株制备的疫苗对狂犬病街毒株BD06和8202株的保护效果。方法选取无狂犬病免疫史,中和抗体≤0.1 IU/mL的受试犬20只,随机均分为4组,供试疫苗(1、2组)和空白对照制品(3、4组)分别于0 d、7 d各免疫1次,每次免疫... 目的研究狂犬病病毒CTNCEC25株制备的疫苗对狂犬病街毒株BD06和8202株的保护效果。方法选取无狂犬病免疫史,中和抗体≤0.1 IU/mL的受试犬20只,随机均分为4组,供试疫苗(1、2组)和空白对照制品(3、4组)分别于0 d、7 d各免疫1次,每次免疫剂量为1支(1.0 mL)。14 d时采血测抗体,当天后肢肌肉注射攻毒。其中1、3组采用BD06株攻击,2、4组采用8202株攻击,攻毒后观察90 d,记录各组犬发病死亡情况。结果首免后14 d,供试疫苗免疫两组犬的平均中和抗体效价为(9.94±4.24)IU/mL。攻毒后90 d(首次免疫后104 d)时,供试疫苗两组犬的平均中和抗体效价为(3.41±4.07)IU/mL,所有受试犬血清狂犬病中和抗体水平均大于WHO规定的0.5 IU/mL。结论狂犬病病毒CTNCEC25株制备的疫苗对狂犬病病毒具有良好的交叉保护效果。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 CTNCEC25株 BD06 8202 中和抗体
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Study on Antimicrobial and Antiviral Activities of Lysozyme From Marine Strain S-12-86 In Vitro
4
作者 ZHANG Xiu WU Fa-xing +3 位作者 SUN Mi WANG Qing-yin WANG Yue-jun YANG Xiang-ke 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2008年第1期112-116,共5页
In this study, the in vitro antimicrobial and antiviral activities of the lysozyme from marine strain S-12-86 (LS) were investigated, The antimicrobial activity of LS was tested by minimum inhibition concentration ... In this study, the in vitro antimicrobial and antiviral activities of the lysozyme from marine strain S-12-86 (LS) were investigated, The antimicrobial activity of LS was tested by minimum inhibition concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) method. The inhibiting effects of LS on pseudo rabies virus (PRV) in swine kidney cells (PK-15 ceils) were judged by cytopathogenic effect test (CPE), The results showed LS had a broad antimicrobial spectrum against several standard strains including gram-positive bacteria, gram-negative bacteria, fungi, etc, The MIC of LS was 0.25-4.00 mg mL^-1 and its MBC was 0.25-8.00 mg mL^-1, respectively, Observation under the transmission electron microscope revealed that the cell wall of Candida albicans was distorted seriously, and the cytoplasm with many cavities was asymmetrical after being hydrolyzed by LS, The median cytotoxicity concentration (TC50) of LS was 100.0 μg mL^-1, the median effective concentration (EC50) was 0.46 μg mL^-1, and the selectivity index (TI = TC50/EC50) was 217. LS could inhibit PRV in PK-15 cells when it was added to cell culture medium at 0, 2, 4, 6, and 8 h after PK-15 cells had been infected by PRV. From the results, we concluded that LS had broad antimicrobial spectrum and good inhibiting effects on PRV, 展开更多
关键词 marine strain S-12-86 Candida albicans pseudo rabies virus cytopathic effect
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狂犬病病毒aG株假病毒的制备方法
5
作者 张雨薇 韩德明 《长春理工大学学报(自然科学版)》 2023年第1期102-107,共6页
基于HIV慢病毒包装系统建立了狂犬病病毒(RV)aG株假病毒的制备方法。构建编码RV aG株糖蛋白(GP)的重组真核表达质粒pCMV-aG-G,转染至293T细胞验证GP的表达。将GP表达质粒与假病毒包装质粒及绿色荧光蛋白(GFP)指示质粒共转染293T细胞进... 基于HIV慢病毒包装系统建立了狂犬病病毒(RV)aG株假病毒的制备方法。构建编码RV aG株糖蛋白(GP)的重组真核表达质粒pCMV-aG-G,转染至293T细胞验证GP的表达。将GP表达质粒与假病毒包装质粒及绿色荧光蛋白(GFP)指示质粒共转染293T细胞进行假病毒包装,制备携带GFP报告基因与aG株GP的RV假病毒。结果表明,研究成功构建了编码RV aG株GP的重组真核表达质粒,其可在293T细胞中有较高表达;成功制备了具有细胞感染性的RV aG株假病毒。本研究有助于更安全、准确监测针对我国现用人狂犬病疫苗生产用RV固定毒aG株的中和抗体水平。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 假病毒 aG株 转染
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狂犬病毒地鼠肾细胞适应株的选育 被引量:4
6
作者 李淑兰 张莹 +5 位作者 杨兵 郑淑媛 韩亮 于洪涛 于万龙 黄永成 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1997年第4期204-207,共4页
将aG株豚鼠脑组织毒种于原代地鼠肾细胞传代适应后,优选出一株感染地鼠肾细胞增殖滴度高,稳定性好并保持原株抗原性的新的适应株,其生物学性状和免疫原性研究结果表明,将有可能取代豚鼠脑毒种,生产出更为安全、有效的狂犬病疫苗。
关键词 狂犬病 狂犬病毒 地鼠肾细胞 适应株 疫苗
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狂犬病毒N基因的原核表达及间接ELISA方法的建立 被引量:12
7
作者 高明华 夏咸柱 薛琳 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期31-34,共4页
目的用表达的狂犬病核蛋白建立检测狂犬病抗体的间接ELISA方法。方法根据GenBank发表的狂犬病病毒(Rabies Virus,RV)ERA株N基因序列设计引物,利用PCR的方法从重组质粒pMD-N中扩增RV N基因,将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET28a(+)... 目的用表达的狂犬病核蛋白建立检测狂犬病抗体的间接ELISA方法。方法根据GenBank发表的狂犬病病毒(Rabies Virus,RV)ERA株N基因序列设计引物,利用PCR的方法从重组质粒pMD-N中扩增RV N基因,将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET28a(+)中,构建原核表达载体pET-N。阳性重组质粒转化原核表达宿主菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达并确定表达N基因的最佳诱导时间。通过凝胶薄层扫描分析和Western-blot分析确定表达蛋白的表达量和特异性。用纯化的表达产物作为诊断抗原,通过对各反应条件的优化,初步建立检测RV抗体的间接ELISA方法。结果扩增了RV N基因,构建了原核表达载体pET-N和原核表达菌,表达了N基因且目的蛋白以包涵体形式存在表达菌中,最佳诱导时间为4 h。重组蛋白表达量占菌体总蛋白的56.8%,并能与RV阳性血清发生特异性反应。用表达的狂犬病重组N蛋白建立了用于RV抗体检测的间接ELISA方法。结论成功表达了狂犬病核蛋白,用表达的狂犬病核蛋白建立的间接ELISA方法可以用于RV抗体的检测。 展开更多
关键词 狂犬病毒ERA株 核蛋白基因 原核表达 间接ELISA
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狂犬病毒CVS-N2c毒株糖蛋白基因的克隆和重组腺病毒的构建 被引量:5
8
作者 张云 李文辉 +2 位作者 王树惠 刘力 杨帆 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2003年第3期332-336,共5页
克隆了狂犬病毒CVS N2c毒株糖蛋白 (GP)基因 ,并进行了GP全基因序列测定和对比分析。结果显示CVS N2cGP基因编码区长 15 75bp ,编码 5 2 4个氨基酸 ,与国内外发表的狂犬病毒疫苗株 3aG株、ERA株、和HEP Flury株GP基因的核酸序列同源性... 克隆了狂犬病毒CVS N2c毒株糖蛋白 (GP)基因 ,并进行了GP全基因序列测定和对比分析。结果显示CVS N2cGP基因编码区长 15 75bp ,编码 5 2 4个氨基酸 ,与国内外发表的狂犬病毒疫苗株 3aG株、ERA株、和HEP Flury株GP基因的核酸序列同源性分别为 89 0 % ,89 3% ,94 5 % ,而推导的氨基酸序列同源性分别为 87 6 %、88 4 %、和91 2 %。在此基础上 ,用pAdEasy载体系统构建了表达GP基因的重组腺病毒。电镜下确定重组病毒颗粒的直径约70nm ,Westernblot显示重组病毒表达的GP蛋白可被兔抗狂犬病毒血清识别 ,表达的GP蛋白分子量约为 6 6kD ,与天然的狂犬病毒GP的分子量相符。该表达CVS N2c毒株GP基因的重组腺病毒是筛选有效狂犬病毒基因工程疫苗的基础。 展开更多
关键词 狂犬病毒 CVS—N2c毒株糖蛋白 基因克隆 基因序列测定 对比分析 重组腺病毒 狂犬病
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狂犬病毒载体的构建与鉴定 被引量:3
9
作者 刘忠钰 袁慧君 +5 位作者 朱武洋 姜涛 陈水平 于曼 秦成峰 秦鄂德 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1047-1051,共5页
目的构建狂犬病毒载体,为新型疫苗研究提供依据。方法将狂犬病毒减毒株SAE基因组分段扩增,然后经逐步拼接得到全基因组克隆,并在其中引入转录终止-起始元件和多克隆位点获得重组质粒pSAETOPO。将绿色荧光蛋白(EGFP)基因和西尼罗病毒prM... 目的构建狂犬病毒载体,为新型疫苗研究提供依据。方法将狂犬病毒减毒株SAE基因组分段扩增,然后经逐步拼接得到全基因组克隆,并在其中引入转录终止-起始元件和多克隆位点获得重组质粒pSAETOPO。将绿色荧光蛋白(EGFP)基因和西尼罗病毒prME基因分别克隆至pSAETOPO,然后将带有这两个基因的狂犬病毒全长cDNA切下并克隆至pcDNA3.1(+)载体。将获得的重组质粒pcSAE-GFP和pcSAE-ME转染细胞,分别观察辅助病毒对外源基因表达的影响。结果获得狂犬病毒载体质粒pcSAE-GFP和pcSAE-ME,经酶切分析和序列测定表明所构建克隆是正确的。pcSAE-GFP及pcSAE-ME转染细胞后,在辅助病毒存在下可表达相应外源基因。结论构建的狂犬病毒载体质粒可表达外源基因,为进一步获得表达外源基因的重组狂犬病毒奠定了基础。 展开更多
关键词 狂犬病毒 病毒载体 SAE株 绿色荧光蛋白 西尼罗病毒prME蛋白
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狂犬病病毒Vero细胞适应株3aG-V的致病性和免疫原性 被引量:2
10
作者 郑海发 董关木 +3 位作者 史秀山 陈美光 刘增顺 吕宏亮 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期123-127,共5页
狂犬病病毒3aG-V株是3aG-5在Vero细胞适应的毒株,对其在小鼠、豚鼠、家兔、犬的不同感染途径的致病性,小鼠、豚鼠、兔子上的免疫原性进行研究,同时进行纯毒及在中枢神经系统中能否形成尼氏小体试验,结果表明:狂犬病病毒3aG-V株潜伏期较... 狂犬病病毒3aG-V株是3aG-5在Vero细胞适应的毒株,对其在小鼠、豚鼠、家兔、犬的不同感染途径的致病性,小鼠、豚鼠、兔子上的免疫原性进行研究,同时进行纯毒及在中枢神经系统中能否形成尼氏小体试验,结果表明:狂犬病病毒3aG-V株潜伏期较长,在动物脑内不形成尼氏小体,为固定毒,其在实验动物上具有较弱的致病性和较好的免疫原性,可作为纯化Vero细胞狂犬病疫苗的生产用疫苗株。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 VERO细胞 3aG-V 致病性 免疫原性 固定毒
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中国狂犬病口服疫苗的研究进展及其应用的紧迫性 被引量:9
11
作者 俞永新 石磊泰 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期973-980,共8页
中国科学家早在上世纪80年代开始研究狂犬病动物口服疫苗,获得数株毒力减弱的疫苗株,并进行过犬的口服免疫实验和大规模安全性和保护效果的现场观察。其中有几株减毒株的弱毒特征、遗传稳定性和免疫性与WHO认可并广泛应用的动物口服疫... 中国科学家早在上世纪80年代开始研究狂犬病动物口服疫苗,获得数株毒力减弱的疫苗株,并进行过犬的口服免疫实验和大规模安全性和保护效果的现场观察。其中有几株减毒株的弱毒特征、遗传稳定性和免疫性与WHO认可并广泛应用的动物口服疫苗毒种相似。消除狂犬病的关键措施是对犬进行大面积免疫达到免疫覆盖率70%以上,中国犬的数量多达亿头,而且多数为散养犬,以常规的注射免疫很难达到这个水平。对犬实施口服免疫提高免疫率也是WHO和狂犬病专家积亟提倡和推荐的。中国已有多株减毒株,国家应充分发挥它们的作用,在人力、物力、财政上予以大力支持,完善这些候选株以便尽快得到批准应用,从而达到全球2030年消除人间狂犬病的目标。 展开更多
关键词 狂犬病 减毒株 口服疫苗 中国消除狂犬病
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CTN株疫苗对中国狂犬病病毒街毒代表株的保护性 被引量:3
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作者 程满荣 吴杰 +1 位作者 孟胜利 徐葛林 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第9期786-787,共2页
目的研究人用狂犬病病毒CTN株疫苗对中国狂犬病病毒街毒代表株的保护性,为评估该疫苗的适用性提供依据。方法用CTN株疫苗免疫昆明小鼠,用3株具有代表性的街毒株CQ92、HN06、J和标准攻击毒株CVS经脑内和肌肉攻击,以未免疫小鼠进行脑内和... 目的研究人用狂犬病病毒CTN株疫苗对中国狂犬病病毒街毒代表株的保护性,为评估该疫苗的适用性提供依据。方法用CTN株疫苗免疫昆明小鼠,用3株具有代表性的街毒株CQ92、HN06、J和标准攻击毒株CVS经脑内和肌肉攻击,以未免疫小鼠进行脑内和肌肉攻击为对照,观察CTN株疫苗的保护效果。结果原倍和5倍稀释的疫苗免疫的小鼠经3株街毒肌肉攻击后,均得到100%的保护,与对照组比较,差异均有极显著意义;经3株街毒脑内攻击后,原倍疫苗免疫的小鼠均得到100%的保护,5倍稀释的疫苗免疫的小鼠对3株街毒CQ92、HN06、J的保护率分别为85%、75%和77.8%,与对照组比较,差异均有极显著意义。结论CTN株疫苗总体上能有效预防我国目前狂犬病的流行。 展开更多
关键词 狂犬病疫苗 CTN株 街毒株 保护性
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从克隆的cDNA拯救狂犬病毒HEP-Flury株 被引量:11
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作者 艾军 林宝珍 郭霄峰 《动物医学进展》 CSCD 2006年第2期99-100,共2页
为研究狂犬病毒基因的结构,将狂犬病毒HEP-Flury株全基因组cDNA与N、P、L、G 4个基因的辅助质粒共转染BHK-21细胞,于体积分数为5%CO2培养箱中培养6d,以狂犬病毒N蛋白荧光抗体染色。结果显示,细胞中含有大量的狂犬病毒粒子,表明已建立了... 为研究狂犬病毒基因的结构,将狂犬病毒HEP-Flury株全基因组cDNA与N、P、L、G 4个基因的辅助质粒共转染BHK-21细胞,于体积分数为5%CO2培养箱中培养6d,以狂犬病毒N蛋白荧光抗体染色。结果显示,细胞中含有大量的狂犬病毒粒子,表明已建立了狂犬病毒的反向遗传操作系统。 展开更多
关键词 狂犬病毒 反向遗传操作技术 HEP-Flury株
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表达狂犬病毒糖蛋白基因复制缺陷型重组腺病毒的构建及其特性 被引量:8
14
作者 李文辉 张云 +2 位作者 王树惠 刘力 杨帆 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期650-654,共5页
目的构建表达狂犬病毒CVS-N2C毒株糖蛋白(GP)基因的复制缺陷型重组腺病毒,作为筛选狂犬病毒基因工程疫苗的基础。方法用大肠杆菌细胞内同源重组技术构建重组病毒;NorthernblotWesternblot和免疫荧光抗体等方法鉴定重组病毒。结果重组病... 目的构建表达狂犬病毒CVS-N2C毒株糖蛋白(GP)基因的复制缺陷型重组腺病毒,作为筛选狂犬病毒基因工程疫苗的基础。方法用大肠杆菌细胞内同源重组技术构建重组病毒;NorthernblotWesternblot和免疫荧光抗体等方法鉴定重组病毒。结果重组病毒具有典型的病毒形态;病毒基因组稳定;GP基因可被转录;重组病毒表达的GP蛋白相对分子质量为66000,与天然GP相对分子质量相符表达的GP蛋白可被兔抗狂犬病毒免疫血清特异性识别;小鼠免疫-攻击试验可保护87.5%~100%动物。结论成功地构建了表达狂犬病毒CVS-N2C毒株GP基因的复制缺陷型重组腺病毒,并表现了良好的免疫效果。 展开更多
关键词 重组腺病毒 狂犬病毒 CVS-N2C 复制缺陷型
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福建省狂犬病毒街毒株分离鉴定及生物学特性研究 被引量:2
15
作者 张建明 邓艳琴 +3 位作者 王灵岚 林代华 杨秀惠 严延生 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期684-687,共4页
目的分离福建省狂犬病毒街毒株,了解病毒株的生物学特性。方法采集疑似狂犬的脑组织,通过细胞培养和乳鼠脑接种分离狂犬病毒,用直接免疫荧光和RT-PCR等方法进行鉴定,并对病毒的分子生物学特性进行研究。结果从疑似狂犬的脑组织中分离出... 目的分离福建省狂犬病毒街毒株,了解病毒株的生物学特性。方法采集疑似狂犬的脑组织,通过细胞培养和乳鼠脑接种分离狂犬病毒,用直接免疫荧光和RT-PCR等方法进行鉴定,并对病毒的分子生物学特性进行研究。结果从疑似狂犬的脑组织中分离出狂犬病毒,TCID50的测定结果显示,细胞毒滴度不高,病毒株对BHK-21细胞的适应性不强,LD50的测定结果显示,病毒株为狂犬病毒强毒株。结论从福建省家犬中成功分离到狂犬病毒街毒株,为狂犬病的实验室研究奠定基础。 展开更多
关键词 狂犬病毒 街毒株 分离鉴定 生物学特性
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Vero细胞狂犬疫苗的研制 被引量:17
16
作者 曾蓉芳 宋家骊 +2 位作者 顾鸣 陈文兰 邵益斌 《中国病毒学》 CSCD 1997年第1期43-49,共7页
利用自建的狂犬病毒Vero细胞适应株和细胞反应器微载体系统培养Vero细胞和狂犬病毒,病毒滴度达到6.0~8.0log(10)LD(50)/ml。病毒原液纯化后制出的纯化狂犬疫苗质量基本上均能达到WHO对此类型疫苗的主要质控要求。表明疫苗小量试制... 利用自建的狂犬病毒Vero细胞适应株和细胞反应器微载体系统培养Vero细胞和狂犬病毒,病毒滴度达到6.0~8.0log(10)LD(50)/ml。病毒原液纯化后制出的纯化狂犬疫苗质量基本上均能达到WHO对此类型疫苗的主要质控要求。表明疫苗小量试制工艺基本可行。 展开更多
关键词 疫苗 VERO细胞 狂犬疫苗 研制
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狂犬病病毒口服疫苗株SRV9全长基因质粒的构建 被引量:3
17
作者 魏玉荣 易忠 +5 位作者 符子华 马素贞 王晓萍 简子健 王海烽 魏婕 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期203-207,共5页
狂犬病病毒(Rabies Virus)是一种致死性的人畜共患病。为了深入研究狂犬病病毒的基因组特性及构建新型病毒载体,研究根据GenBank中已公布的狂犬病病毒口服疫苗株SRV9(登录号:AF499686)基因组序列设计数对引物,以SRV9病毒为材料,通过RT-... 狂犬病病毒(Rabies Virus)是一种致死性的人畜共患病。为了深入研究狂犬病病毒的基因组特性及构建新型病毒载体,研究根据GenBank中已公布的狂犬病病毒口服疫苗株SRV9(登录号:AF499686)基因组序列设计数对引物,以SRV9病毒为材料,通过RT-PCR技术将总RNA中SRV9全长基因组11,928 bp分5段扩增,分别克隆到pMD18-T或pGEM-T载体测序鉴定。测序正确后,再克隆至pBluescript skⅡ(+)载体,利用扩增片段自身内切酶切位点顺次进行全长连接,获得含SRV9全长基因组的质粒pBLSRV9。通过基因组序列同源性比较分析,SRV9株具有稳定的遗传特性,为进一步探索狂犬病病毒的复制、感染、致病及免疫分子机制和研制新型狂犬病病毒疫苗奠定良好的基础。 展开更多
关键词 狂犬病病毒SRV9 RT-PCR 基因序列分析 全长基因质粒构建
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湖南省20株狂犬病毒株与疫苗株N基因序列分析 被引量:2
18
作者 刘富强 陈立章 +1 位作者 高立冬 张红 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期221-226,共6页
目的分析湖南省狂犬病毒株与疫苗株的N基因序列及遗传进化关系,从基因角度解决疫苗的选择问题,为狂犬病的防治提供科学依据。方法采用RT-PCR法从市售家犬脑组织标本内获得N基因并进行测序,采用DNAStar软件包中的MegAlign软件,将所得结... 目的分析湖南省狂犬病毒株与疫苗株的N基因序列及遗传进化关系,从基因角度解决疫苗的选择问题,为狂犬病的防治提供科学依据。方法采用RT-PCR法从市售家犬脑组织标本内获得N基因并进行测序,采用DNAStar软件包中的MegAlign软件,将所得结果与国内外发表的代表性疫苗株相应基因进行核苷酸、氨基酸序列同源性比对分析,并以Neighbor-Joining法构建系统发生树。结果湖南省20株狂犬病毒与国内外13株疫苗代表的株核苷酸同源性在85.3%~94.2%(中位数88.6%)。相应地,N基因编码的氨基酸序列同源性为95.4%~99.6%(中位数99.2%)。其中,与中国疫苗株CTN、SRV-9,国外疫苗株CVS、RBE3-15、SADB19-1st及HEP-Flury株的氨基酸序列同源性范围在99.2%~99.6%,并以与CTN疫苗株同源性中位数最高(90%)。系统发生分为两大群。湖南省20株研究毒株与中国人用CTN株具有很高的亲缘性,构成第一群。其余的疫苗毒株构成第二基因群。结论湖南省狂犬病毒株与中国人用疫苗株CTN同源性最高、亲缘关系最近,因此在湖南省使用CTN疫苗株效果可能较好。 展开更多
关键词 狂犬病毒 核蛋白 序列分析 疫苗株 同源性
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狂犬病固定毒aG株在Vero细胞上的传代适应研究 被引量:3
19
作者 史秀山 王勇 黎明哲 《中国热带医学》 CAS 2004年第6期933-934,950,共3页
目的 为研制安全 ,有效和使用方便的Vero细胞狂犬疫苗提供基础资料。 方法 对狂犬病固定毒 3aG株在Vero细胞上的传代适应性进行了研究 ,同时进行了狂犬病毒在Vero细胞上繁殖最适条件的选择实验。 结果 狂犬病固定毒 3aG株在Vero细... 目的 为研制安全 ,有效和使用方便的Vero细胞狂犬疫苗提供基础资料。 方法 对狂犬病固定毒 3aG株在Vero细胞上的传代适应性进行了研究 ,同时进行了狂犬病毒在Vero细胞上繁殖最适条件的选择实验。 结果 狂犬病固定毒 3aG株在Vero细胞上多次传代后得到高滴度表达毒力可达 8 3LogLD50 /ml,具有较好的抗原性及免疫原性 ,并且确定了狂犬病病毒在Vero细胞上繁殖的最适条件 ,即种毒量在 0 1~ 0 0 1LD50 /cell之间病毒滴度最高。 结论  3aG -V毒株在Vero细胞上繁殖可维持相当长时间 ,并可进行多次加液 ,检测证实多次收获毒液毒力均达到疫苗制造要求。 展开更多
关键词 狂犬病毒 VERO细胞 固定 最适条件 LD50 狂犬疫苗 传代 繁殖 毒力 收获
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狂犬病病毒Vero细胞适应株的建立及其应用于疫苗生产的可行性探讨 被引量:9
20
作者 高鸿瑞 魏至栋 +5 位作者 单秀琴 阮峰 赵新华 袁文潭 杨辉 李根明 《微生物学免疫学进展》 1995年第3期129-132,共4页
将狂犬病病毒7aG固定毒适应于Vero细胞,建立了稳定的VRG适应株。病毒滴度可达7.69logLD50/ml,病毒最适增殖时间5—7天,最适种毒比例1:10 ̄3。应用转瓶培养Vero细胞增殖病毒,收获病毒液经β—丙... 将狂犬病病毒7aG固定毒适应于Vero细胞,建立了稳定的VRG适应株。病毒滴度可达7.69logLD50/ml,病毒最适增殖时间5—7天,最适种毒比例1:10 ̄3。应用转瓶培养Vero细胞增殖病毒,收获病毒液经β—丙内脂灭活,超离浓缩制备疫苗,效力试验结果(NIH法)较原制疫苗成倍增高,且都大于2.5IU/2ml,表明VRG适应株可应用于制备Vero细胞狂犬病疫苗。 展开更多
关键词 狂犬疫苗 狂犬病 疫苗 VERO细胞适应株 制备
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