射线诱导在体造血细胞凋亡的量时效关系的研究

以4—10Gy射线在体损伤的小鼠为模型,应用DNA电泳和流式细胞术等方法证实细胞凋亡是射线损伤在体骨髓造血细胞的途径之一,发现射线诱导的造血细胞凋亡有明显的量效和时效关系。4、6、8和10Gy照射后,细胞凋亡发生率均表现为升高-降低过程,各剂量诱导的凋亡发生率峰值分别出现在照后12、8、4和4h,6和8Gy诱导的凋亡发生率已达最高水平,约为30％,10Gy诱导的凋亡反而要低。上述结果表明,诱导细胞凋亡是射线损伤骨髓造血细胞的一个重要途径,而且凋亡的发生率受照射剂量和照后时间的影响。因此,深入研究射线诱导的细胞凋亡,将有助于揭示射线损伤造血功能的机理。

Hp/DNA双参数分析放射损伤小鼠骨髓细胞周期、凋亡和Hp

目的 :建立结合珠蛋白 (Hp) DNA双参数流式细胞技术 ,以探讨放射损伤小鼠骨髓细胞中Hp含量与细胞周期和凋亡的关系。方法 :小鼠骨髓细胞经 70 %乙醇固定后 ,Triton_X 10 0破膜 ,间接免疫荧光技术标记Hp ,PI标记DNA ,上流式细胞仪测试。用ModFit软件设双门法分析Hp+ 和Hp_细胞的细胞周期和凋亡 ,CELLQuest软件分析Hp+ 细胞比例。结果 :γ射线照射后 6h小鼠骨髓有核细胞中Hp+ 细胞的比例明显高于未照射对照组 ,骨髓细胞的凋亡来自于Hp_细胞 ,Hp+ 细胞未见凋亡 ,Hp_细胞发生的G2 M阻滞比Hp+ 细胞严重。这些信息是单用Western印迹法或单纯DNA分析所不能提示的。结论 :Hp DNA双参数流式细胞技术可用于分析Hp与细胞周期和凋亡的关系 ,是一种快速、客观的分析方法。