重组新城疫病毒rL-RVG通过p53-YAP1-ACSL4通路诱导肺腺癌细胞铁死亡

目的旨在探究重组新城疫病毒rL-RVG是否通过p53-YAP1-ACSL4通路影响肺腺癌细胞铁死亡。方法体外培养人肺腺癌细胞系A549、PC9,将处于对数增殖期的细胞分为对照组(NC组)、新城疫病毒感染组(NDV组)、重组新城疫病毒感染组(rL-RVG组)、铁死亡诱导剂组(Erastin组)及铁死亡抑制剂组(NAC组)。在病毒感染和铁死亡诱导剂、抑制剂干预后,通过CCK-8、划痕实验和Transwell来检测细胞的功能学变化,包括细胞活力、迁移能力和侵袭能力;光学显微镜观察细胞形态改变。使用流式细胞术和荧光显微镜来测定细胞中ROS的含量,用酶标仪对MDA含量进行测定,通过Western blot和实时荧光定量PCR来检测铁死亡相关蛋白p53、YAP1及ACSL4的表达。结果与NC组相比,rL-RVG组细胞生长、迁移及侵袭能力明显下降(P<0.01);ROS及MDA水平升高且与铁死亡诱导剂组相比含量显著提高(P<0.01),铁死亡抑制剂干预后含量均减少(P<0.01);铁死亡关键蛋白p53、YAP1、ACSL4表达量明显升高(P<0.01);Si-RNA敲减YAP1和ACSL4后相应蛋白的表达量减少(P<0.01),并且ROS和MDA含量均减少(P<0.01)。结论rL-RVG可以有效地阻止肺腺癌细胞的增殖、迁移和扩散,并且能够通过p53-YAP1-ACSL4轴增加脂质过氧化物和细胞活性氧的含量,最终诱导肿瘤细胞铁死亡。

重组新城疫病毒rL-RVG抑制人肺腺癌细胞系增殖

目的探讨表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒rL-RVG抑制人肺腺癌细胞系A549和PC9增殖。方法体外培养人肺腺癌细胞系A549、PC9,将处于对数增殖期的细胞分为对照组、新城疫病毒感染组(NDV)、重组新城疫病毒感染组(rL-RVG)、铁死亡诱导剂组(Erastin)和重组新城疫病毒联合铁死亡诱导剂组(rL-RVG+Erastin)。病毒及药物感染细胞24 h后,光学显微镜下观察细胞形态,CCK-8法检测细胞增殖能力,划痕试验检测细胞迁移能力,细胞毒性检测试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量,流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)含量,Western blot检测铁死亡相关蛋白p53、SLC7A11、GPX4的表达。结果与对照组相比,NDV组、rL-RVG组、Erastin组细胞数、细胞增殖能力及迁移的距离明显降低(P均<0.001),LDH释放量和总ROS水平显著提高(P<0.01),p53蛋白表达明显增加(P<0.001),而SLC7A11、GPX4蛋白表达明显降低(P<0.001)。rL-RVG组与NDV组相比上述结果更明显(P<0.05),rL-RVG+Erastin组与rL-RVG组和Erastin组相比细胞数、细胞增殖能力及迁移的距离明显减少(P<0.05),LDH释放量和总ROS水平显著提高(P<0.05),P53蛋白表达明显增加(P<0.001),而SLC7A11、GPX4蛋白表达明显降低(P<0.001)。结论rL-RVG可以发挥类似Erastin抑制肿瘤细胞增殖的作用,且其效果远远强于NDV。这为rL-RVG诱导的细胞死亡提供了新的见解,并强调了病毒在治疗肿瘤中的关键作用。

上颌种植体边缘骨吸收的RVG测量分析

目的 :探索放射直视影像 (RVG)对上颌种植体边缘骨吸收进行测量分析的临床应用。方法 :3 2例患者的 5 4枚上颌种植体 ,分别于负载前、负载后 1年和 2年拍摄RVG ,观察和测量种植体边缘骨吸收变化 ,统计学分析种植体在不同时期测量值的一致性。结果 :上颌种植体边缘水平骨吸收于负载后 1年平均 0 .3 6mm ,负载后 2年平均为 0 .87mm ;垂直骨吸收于负载后 1年平均为 0 .97mm ,负载后 2年平均为 1.18mm。t检验显示种植体在不同时期测量值两者间比较差异无显著性意义 (P >0 .5 )。结论

重组新城疫病毒rl-RVG抑制人肺腺癌A549系细胞迁移及相关机制

目的观察表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒(rl-RVG)对人肺癌细胞系A549的迁移影响,初步探讨其可能的机制。方法重组新城疫病毒rl-RVG直接感染A549细胞为rl-RVG实验组,新城疫病毒La Sota株处理的A549细胞组及未感染病毒的A549细胞组作为对照组。Western blot法检测NDV-HN蛋白及狂犬病毒糖蛋白(RVG),细胞增殖实验测定新城疫病毒使用的最佳作用浓度;划痕实验及Transwell法测A549迁移;Western blot法及免疫荧光法检测E-cadherin,MMP2蛋白表达。结果空白对照组无NDV、rl-RVG表达,rl-RVG仅在感染rl-RVG细胞组有表达,NDV在感染rl-RVG细胞组及感染NDV细胞组皆有表达;与空白对照组相比,rl-RVG及NDV稀释浓度大于5×10-5对细胞的增殖有抑制作用(P<0.05);rl-RVG组迁移的距离及细胞数明显减少(P<0.05)。与空白对照组及NDV感染组相比,rl-RVG组E-cadherin蛋白表达水平上调(P<0.05),MMP2蛋白表达水平减弱(P<0.05)。结论重组新城疫病毒rl-RVG能抑制人肺癌细胞系A549的迁移,并可能通过影响肺腺癌A549上皮细胞-间质转化(EMT)过程中的调控因子E-cadherin,MMP2蛋白而对细胞迁移而作用。

RVG数字成像系统失真率的初步研究

目的用RVG(radio visio graphy)数字成像系统和离体牙测量法分别测量上颌第一前磨牙的解剖外形特点,观测数字图像的失真率,为临床诊断提供参考依据。方法选取近期拔除的根尖完整的上颌第一前磨牙70颗,用游标卡尺分别测量牙长、冠长、根长、颈宽、颈厚、冠宽和冠厚;用15mm挫针作校准标记拍摄每个牙齿颊舌向、近远中向的RVG数字图像,再用TROPHY测量软件的校准功能在数字图像上分别测量前述各指标,与实际长度比较,计算RVG数字成像系统的失真率。结果失真率分别为牙长1.32%、冠长1.15%、根长2.61%、颈宽3.20%、颈厚1.26%和冠宽0.65%、冠厚0.92%。结论本研究获得了有关RVG数字成像系统根尖片失真率的信息,为临床应用提供参考依据。

数字RVG软件预测根管工作长度的应用体会

目的探讨数字RVG软件预测根管工作长度的准确性。方法从RVG Sopro Imaging图像分析应用软件系统调取图像清晰根尖片287张,同一患者同一牙位在RVG Sopro Imaging图像分析应用软件系统上用电子尺测量根尖片上根管工作长度,临床操作时使用Root-ZX根管长度测量仪测量根管工作长度,共测量352个根管,分别计算平均值。结果用RVG Sopro Imaging图像分析应用软件系统测量的根管工作长度平均值为(18.08±3.72)mm,用Root-ZX根管长度测量仪测量的根管工作长度平均值为(17.22±2.54)mm,两者t检验差异有显著的统计学意义(P<0.01)。结论采用数字RVG软件系统上电子尺测量根尖片的根管工作长度有放大作用,不能直接指导临床操作。

重组新城疫病毒rl-RVG抑制A549荷瘤鼠的瘤体生长

目的探讨稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒疫苗对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠的生长抑制及其可能促凋亡机制。方法将rl-RVG感染到成功建立的A549荷瘤鼠瘤体内,检测对瘤体生长抑制率;RT-PCR检测NDV HN基因及RVG基因的表达;TUNEL检测肿瘤细胞的凋亡;蛋白印迹法测caspase系列、Bax、Bcl-2表达;NDV及PBS作为对照。结果与对照组相比,rl-RVG组荷瘤鼠瘤体增长明显缓慢;RVG及NDV基因表达;rl-RVG组肿瘤细胞凋亡明显增加(P<0.05);rl-RVG组caspase-3,8和9高表达(P<0.01),Bax/Bcl-2比值明显高于对照组(P<0.01)。结论 rl-RVG成功感染至A549荷瘤鼠,其对A549荷瘤鼠瘤体生长有着明显的抑制作用,且可能与rl-RVG激活机体的Bcl-2和caspase家族诱导凋亡相关。

牙种植区不同曝光强度RVG骨密度测量结果比较

目的探讨牙种植区不同曝光强度放射直视影像(RVG)骨密度测量结果比较及在牙种植中对颌骨质量的评估。方法76例患者82个拟种植区域,术前分别在三种不同曝光强度下拍摄RVG,观察和测量种植区域骨密度值变化,分析不同曝光强度下以及灰度调节后RVG骨密度值的变化。结果不同曝光强度下三组之间的骨密度测量值均有显著性差异(P<0.05),随着曝光强度的增加,骨密度值随之降低。灰度调节对同一种曝光强度下的RVG图像的骨密度测量值没有影响(P>0.05)。结论利用不同曝光强度下RVG骨密度测量结果的变化对牙种植区骨质量评价具有快速、经济、辐射量小、直观的特点。

RVG数字化X线成像与透明牙技术对下颌第一前磨牙根管形态的比较研究

目的:利用RVG(Radio Visio Graphy)数字成像与透明牙技术研究下颌第一前磨牙根管的解剖形态,比较2种方法对根管形态判读的一致性。方法:收集湖北中部地区拔除的下颌第一前磨牙105例,采用RVG数字成像和透明牙技术显示根管系统形貌,以Vertucci分类法进行根管类型分型,采用Kappa统计法对两种方法结果的一致性进行分析。结果:透明牙技术发现Ⅰ型70个(66.7%),Ⅲ型4个(3.9%),Ⅴ型24个(22.8%),Ⅵ型2个(1.9%),Ⅶ1个(0.9%),1-2-3型2个(1.9%),1-2-4型1个(0.9%),罕见类型1个(0.9%);RVG法发现Ⅰ型76个(73.3%),Ⅲ型3个(1.9%),Ⅴ型22个(19.1%),Ⅵ型1个(0.9%),Ⅶ1个(0.9%)。两种方法观察同时判读单根管和多根管的比率为64.8%和20%,分型结果间Kappa值为0.58,为中度一致,而两种方法观察根尖分歧、根尖分叉、根管侧支和管间吻合无一致性。结论:RVG数字图像能反应下颌第一前磨牙根管形态的主要容貌,但对复杂根管系统及细微结构根尖分歧、根尖分叉、根管侧支和管间交通等显示远不及透明牙,RVG法和透明牙法对下颌第一前磨牙根管系统的显示有差异,临床诊疗切不可过于依靠RVG。

牙种植应用RVG的临床效果评价

目的探讨放射直视影像(radiovisiograph,RVG)在牙种植应用中的临床效果。方法 56例共70颗拟种植牙区域,经RVG拍照观测牙槽脊顶与上颌窦底部或下颌神经管的距离,以此判断种植区域和骨质情况。结果应用RVG能较好地设置种植区域,了解术前骨质质量及术后骨质量的变化。结论 RVG对种植体规格的选择及种植手术的操作具有良好的临床指导意义。

基于RVG的企业价值评估模型及其应用

介绍了增长的相对价值(RVG)这一新的衡量标准,论述了RVG的计算方法,分析了RVG的应用问题。

RVG数字成像系统在口腔学科的应用进展

RVG数字成像系统是口腔医学影像领域比较成熟的系统之一,凭借诸多优势逐渐取代传统口内X线摄影技术。就RVG数字成像系统在口腔学科领域的应用进展做一综述。

根管长度电测法准确性的RVG片评价

目的 :用RVG片评价根管长度电测法的准确性。方法 :患者 40人 ,患牙 5 6颗 ,根管 72个。使用ApitEM-S5根管长度电测仪探测根尖的位置 ,然后带针摄RVG片并测量针尖与根尖的距离。结果 :针尖恰好到达根尖的根管有 35个 (4 8.6 % ) ;未达到根尖的有 2 5个 (34 .7% ) ;超出根尖的根管有 12个 (16 .7% )。在误差± 0 .5mm范围内 ,探测到根尖的准确率达 87.3%。探测活髓和死髓根管的准确度无显著差异 (P >0 .5 )。结论 :根管长度电测法临床应用简单方便 ,是一种准确。

重组新城疫病毒疫苗rl-RVG对A_(549)荷瘤小鼠瘤体生长的抑制作用

目的:探讨稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒(NDV)疫苗(rl-RVG)对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠的生长抑制及其可能的免疫机制。方法:建立A_(549)荷瘤鼠模型并随机分为rlRVG组、NDV组和对照组,每组10只,分别于瘤体注射rl-RVG,NDV和PBS,每周2次,共3周。测量三组瘤体体积;PCR法测NDV及狂犬病毒糖蛋白(RVG)的表达,蛋白印迹法检测皮下瘤体组织RVG、NDV蛋白表达;流式细胞术检测荷瘤小鼠脾脏自然杀伤细胞(NK)细胞数。结果:与对照组相比,rl-RVG组及NDV组荷瘤鼠瘤体增长明显缓慢;NDV在rl-RVG组和NDV组中均有表达,而RVG在rl-RVG组中表达,对照组未见二者表达;rl-RVG组及NDV组瘤体NK细胞数明显增多,且rl-RVG组明显高于NDV组。结论:rl-RVG成功转染至A549荷瘤鼠,对其瘤体生长有着明显的抑制作用,可能与rl-RVG激活机体的免疫反应相关。

数字化口内放射成像系统(RVG)后处理技术在牙体牙髓疾病诊断中的临床应用研究

目的:评价数字化口内放射成像系统(RVG)后处理技术在牙体牙髓病研究中的敏感性和特异性。方法选取牙体牙髓病例64例,摄取数字化根尖X光片,5名观测者分别对图像处理前的64张图像及图像处理后的64张图像进行了评分。采用ROC曲线统计分析软件(MedCalc,Ver.6.00)对评分结果进行统计分析。结果图像处理后的数字化牙片相应的ROC曲线面积(AZ=0.902)大于图像处理前的ROC曲线面积(AZ=0.897),两者间差异有显著性(P<0.05)。结论数字化口内放射成像系统(RVG)后处理技术使牙体牙髓病研究在纵向观察龋坏及根尖周微小变化中获取了新的信息,是一种很有价值的诊断方法,在牙体牙髓病的诊断中起到了强大的辅助作用。

上颌第一前磨牙髓腔形态的影像学研究

目的:利用RVG(radio visio graphy)数字化X线成像系统测量上颌第一前磨牙髓腔解剖形态的相关数值,为临床诊断、治疗提供重要参考依据。方法:收集拔除的上颌第一前磨牙70颗,牙齿发育完全、根尖完整,用RVG数字成像系统分别拍摄近远中向数字X线片,在图像上测量髓腔形态的相关数值。结果:上颌第一前磨牙颈部髓室的颊腭向厚度(4.34±0.49)mm,颊尖至颊侧髓角之间的距离(5.84±0.58)mm,腭尖至腭侧髓角之间的距离(5.95±0.56)mm;牙尖至髓顶的距离(7.62±0.75)mm,牙尖至髓底的距离(10.38±1.44)mm;髓室高度(2.98±0.98)mm;髓顶至根分叉的距离(7.67±1.79)mm,髓底至根分叉的距离(4.59±1.48)mm。2根管口之间的距离(3.22±0.76)mm,2根管根中1/2之间的距离(3.71±1.43)mm,2根尖孔之间的距离(3.91±2.23)mm。结论:提供成人上颌第一前磨牙髓腔解剖的形态特征,为临床诊断和治疗时参考。

不同医生多次读X线数字成像牙片结果的一致性研究

目的:研究不同医生多次读X线数字成像(rad io visiography、RVG)牙片结果的一致性。方法:100个离体上颌第一前磨牙,分别拍摄颊舌向和近中远中向RVG牙片共200张。经两位医生的3次盲法读片,判断根管类型,用Kappa值来分析读片结果。结果:两位医生3次比较的Kappa值分别为:0.5255、0.468和0.5373,属中度一致性;每位医生首次读片和间隔2周的3次读片结果Kappa值分别为:0.7704、0.7824、0.7837和0.7722、0.76、0.6904,属高度一致性。结论:RVG牙片对临床诊断和治疗具有一定的参考价值,应充分利用但不能依赖,要参考多方面的信息才能作出正确的判断。

应用直接数字成像技术诊断口腔内科常见疾病的可行性研究

目的 :比较直接数字成像技术和传统E -speed牙片诊断口腔常见疾病的优缺点。方法 :对同一患牙用两法进行诊断比较。结果 :与临床诊断相比 ,直接数字成像技术的诊断符合率略高于传统X线技术 ,但两者相比无统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论

乳牙髓腔形态的影像学研究

目的:探讨乳牙髓腔形态规律。方法:利用RVG数字成像系统采集乳牙唇(颊)-舌向和近-远向X图像,观察髓腔形态并测量相关数据,将测量结果进行统计学分析。结果:乳前牙髓室和根管在牙颈部相连续,无明显界限,大多数乳前牙唇-舌位片显示根尖1/3段根管随牙根明显向唇侧弯曲并且上颌牙比下颌牙明显。上颌乳切牙根颈、根中1/3冠端处根管的唇舌径小于近远中径,而下颌乳切牙则相反,其差异有统计学意义(P<0.05)。乳尖牙根颈、根中1/3和所有乳前牙根尖1/3冠端处根管的唇舌径和近远中径大小无统计学意义。上乳磨牙髓室关系为:颊舌径>近远中径>髓室高度;下颌乳磨牙髓室关系为:近远中径>颊舌径>髓室高度。结论:本研究获得乳牙的RVG数字成像系统的实验结果可为临床应用提供参考。

稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠瘤体生长的影响

目的:探讨重组稳定表达狂犬病毒糖蛋白的新城疫病毒疫苗(recombinant avirulent newcastle disease virus LaSota strain expressing the rabies virus glycoprotein,rl-RVG)对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠的生长抑制作用及其可能的免疫机制。方法:建立A549荷瘤鼠模型并随机分为rl-RVG组、新城疫病毒(NDV)组和对照组,每组10只,分别于瘤体注射rl-RVG,NDV和PBS,每周2次,共3周。测量3组瘤体体积;免疫组织化学法测NDV及狂犬病毒糖蛋白(rabies virus glycoprotein,RVG)的表达;HE染色观察荷瘤小鼠的瘤体、脾、肺等组织病理改变;流式细胞术检测荷瘤小鼠脾脏NK细胞数。结果:与对照组相比,rl-RVG组及NDV组荷瘤鼠瘤体增长缓慢;NDV在rl-RVG组和NDV组中均有表达,而RVG仅在rl-RVG组中表达;rl-RVG组及NDV组瘤体出现大量凋亡坏死组织、脾脏多核巨细胞明显增多、肺组织炎症反应明显;rl-RVG组和NDV组NK细胞数明显增多,且rl-RVG组明显高于NDV组。结论:rl-RVG成功转染至A549荷瘤鼠,对其瘤体生长有着明显的抑制作用,可能与rl-RVG激活机体的免疫反应相关。