川续断超微粉与普通粉中川续断皂苷Ⅵ溶出特性比较研究

目的:比较川续断超微粉和细粉川续断皂苷Ⅵ的溶出特性。方法:采用HPLC法测定川续断超微粉和细粉中川续断皂苷Ⅵ绝对含量、1h体外溶出量和溶出速率。结果:川续断超微粉和普通粉中川续断皂苷Ⅵ绝对含量分别为4.87%、4.74%,1h后溶出量分别为48.2mg/g、47.5mg/g,溶出速度参数T0.9分别为0.23min、10.41min。结论:川续断超微粉碎并不会影响川续断皂苷Ⅵ的绝对含量和体外溶出量,但可明显提高其溶出速率。

HN Saponin F通过雄激素受体抑制雄激素依赖的前列腺癌细胞LNCaP增殖

目的研究HN Saponin F的类雄激素活性,探讨其对雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCa P增殖的调控作用及作用机制。方法细胞免疫荧光法检测HN Saponin F对LNCa P细胞中本底水平和双氧睾酮DHT刺激时雄激素受体AR的细胞核转位的影响;MTT法检测HN Saponin F对本底水平和DHT诱导的LNCa P细胞增殖的影响;转染AR的特异si RNA进一步检测HN Saponin F调节LNCa P细胞增殖的机制。结果与DHT类似,HN Saponin F剂量依赖性地促进LNCa P细胞中AR从细胞质转位到细胞核;与DHT联用后,HN Saponin F还可抑制DHT诱导的AR核转位。DHT可以明显促进LNCa P细胞增殖,HN Saponin F可以剂量依赖性地抑制LNCa P细胞的增殖,且可以抑制DHT诱导的LNCa P细胞增殖。AR的特异si RNA抑制AR的表达后,LNCa P细胞本底和DHT诱导的增殖水平被明显抑制,但HN Saponin F失去了进一步抑制LNCa P细胞增殖的作用。结论 HN Saponin F通过AR拮抗雄激素活性,抑制雄激素依赖的前列腺癌细胞增殖,提示HN Saponin F可以作为潜在的AR拮抗剂,用于雄激素依赖性前列腺癌药物的开发。

根痛平胶囊和根痛平片中川续断皂苷Ⅵ的含量测定方法研究及续断的投料情况分析

目的建立根痛平胶囊和根痛平片中川续断皂苷Ⅵ的含量测定方法,监测生产企业续断投料情况。方法采用高效液相色谱(HPLC)法,Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水(27∶73)为流动相等度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长为212 nm。结果川续断皂苷Ⅵ在30~280μg·mL-1的范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=2 029.357 0 X+3.688 5,R2=0.999 7,平均回收率为96.08%,RSD为1.01%。结论该法简单准确,可用于测定根痛平胶囊和根痛平片中川续断皂苷Ⅵ的含量,为根痛平系列制剂的质量标准提高提供理论依据;制定了川续断皂苷Ⅵ含量参考限度值,考察企业续断的投料情况,提示个别企业未投料或投料用续断质量差。

续断鉴别及川续断皂苷Ⅵ的含量测定

目的:《中国药典》2020版第一部"续断鉴别及含量测定"项下的方法较为复杂,应重新建立续断的薄层鉴别方法及川续断皂苷Ⅵ的含量测定方法。方法:采用薄层鉴别法(TLC)对续断及其有效成分川续断皂苷Ⅵ进行鉴别。建立高效液相色谱法(HPLC)测定川续断皂苷Ⅵ,色谱柱为C_(18)(250mm×4.6mm,5μm),柱温35℃,流动相为乙腈∶水(30∶70),体积流量1mL/min;检测波长212nm。结果:薄层鉴别方法具有较好的分离度及较强的专属性。川续断皂苷Ⅵ在一定范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为101.74%(RSD=1.16%)。结论:该方法简便、准确、重现性好,可用于续断的薄层鉴别及川续断皂苷Ⅵ的含量测定。

续断防治骨质疏松的研究进展

该文主要对续断防治骨质疏松的现状进行了综述。参考相关文献进行总结及归纳,重点对续断抗骨质疏松的物质基础、药理作用、作用机制和临床应用进行了综合性论述。为深入研究与开发利用续断防治骨质疏松提供参考。

续断饮片、水煎剂、配方颗粒HPLC指纹图谱对比研究

目的建立并比较续断饮片、水煎剂、配方颗粒的HPLC指纹图谱。方法采用Wondasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长212 nm,柱温30℃。结果分别建立了12批续断饮片、水煎剂、配方颗粒的指纹图谱。12批续断配方颗粒HPLC指纹图谱的14个共有峰均能在水煎剂中得到追踪,有13个共有峰可在饮片中得到追踪,并指认出川续断皂苷Ⅵ、绿原酸2个成分。结论建立的HPLC指纹图谱方法重复性好、稳定。续断饮片、水煎剂、配方颗粒所含化学成分组成基本相同。

不同产地续断木通皂甙D含量比较

本文以HPLC法测定药材中Akebia saponon D的含量为指标,分析不同产地继断的质量,结果显示四川的木里及盐源、湖北的五峰及长阳地区产的继断质量优良,其中以四川省盐源地区质量最佳,湖南省石门地区最次。

星点设计-响应面法优化续断总皂苷提取工艺

目的:优选续断总皂苷的提取工艺。方法:以单因素实验为基础,选择提取浓度、提取时间和溶剂用量为自变量,以续断总皂苷含量和续断皂苷Ⅵ含量的"总评归一值"为响应值,采用星点设计-响应面法对数据进行多元线性和二项式拟合,应用响应面法优选续断总皂苷的提取工艺并对最佳工艺预测分析。结果:二项式拟合方程(R2=0.964 2)优于多元线性回归方程(R2=0.663 0),确定最佳提取工艺为:7倍量55%乙醇回流提取3次,每次2.8 h。经最佳提取工艺提取得到续断总皂苷含量为0.201 1 g·g-1,与预测值偏差1.83%;续断皂苷Ⅵ含量为0.015 4 g·g-1,与预测值偏差3.37%。结论:星点设计-响应面法优化的提取工艺简便可行,且预测性良好,为续断总皂苷的进一步开发利用提供了依据。

正交试验法优选复方益肾利石颗粒的提取工艺

目的运用正交试验法优选复方益肾利石颗粒的提取工艺。方法采用单因素和L9(34)正交试验对复方益肾利石颗粒进行提取工艺优化,以紫外分光光度法及高效液相色谱法测定总黄酮含量、川续断皂苷Ⅵ含量、柚皮苷含量、新橙皮苷含量及得膏率的综合评分为评价指标,对溶媒加入量、提取时间和提取次数进行优选。结果优化最佳提取工艺为加8倍量水,浸泡30 min,提取3次,每次1 h。结论本研究建立的提取工艺稳定可行,质量可控,为复方益肾利石颗粒的进一步开发奠定了基础。

不同加工工艺对续断质量的影响

目的测定川续断皂苷Ⅵ和川续断总皂苷的含量,探讨不同产业化加工工艺对川续断质量的影响。方法采用高效液相色谱法和紫外分光光度法分别对不同片型和不同干燥温度加工的续断饮片中川续断皂苷Ⅵ和川续断总皂苷的含量进行测定。结果切4 mm的续断片,50℃烘干后,川续断皂苷Ⅵ及川续断总皂苷的含量均高于其他加工工艺所得饮片。结论为保证续断饮片的质量,确定了切制片型厚度和烘干温度等工艺参数。

川续断总皂苷对血管性痴呆大鼠的神经保护作用及对海马CA1区凋亡调控基因表达的影响

目的:探讨川续断总皂苷对血管性痴呆(VD)大鼠的神经保护作用及对海马CA1区凋亡调控基因表达的影响。方法:采用永久性结扎双侧颈总动脉的方法建立大鼠VD模型。模型制备成功后第30天,川续断总皂苷低、高剂量组分别灌胃给予25 mg/kg、50 mg/kg的川续断总皂苷,尼麦角林组给予7 mg/kg的尼麦角林,假手术组和模型组给予等量生理盐水。连续给予4周后进行Morris水迷宫实验,对海马组织进行病理学检查,检测海马CA1区组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、聚ADP-核糖聚合酶(PARP)、B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)水平。结果:假手术组大鼠海马CA1区细胞多且排列紧密,层次清晰;模型组大鼠海马CA1区细胞数量减少,排列紊乱,少数神经细胞明显肿胀;川续断总皂苷低剂量组大鼠海马CA1区细胞数量较多,排列较密,少数神经细胞变性、萎缩;川续断总皂苷高剂量组和尼麦角林组大鼠海马CA1区组织形态学变化介于川续断总皂苷低剂量组和假手术组之间。与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期、海马CA1区组织中MDA、PARP、Bax、Caspase-3水平显著升高(P<0.05),穿越平台次数、海马CA1区组织中GSH、SOD、Bcl-2水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,川续断总皂苷低、高剂量组和尼麦角林组大鼠逃避潜伏期、海马CA1区组织中MDA、PARP、Bax、Caspase-3水平显著降低(P<0.05),穿越平台次数、海马CA1区组织中GSH、SOD、Bcl-2水平显著升高(P<0.05)。川续断总皂苷高剂量组和尼麦角林组各指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:川续断总皂苷能改善VD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与调控海马CA1区凋亡基因表达有关。

中药续断的化学成分研究

利用大孔树脂、MCI柱色谱、制备液相等对续断化学成分进行研究,通过NMR、HR-ESI-MS等波谱方法鉴定分离得到的化合物结构。从续断药材中分离得到13个化合物,分别鉴定为5个三萜皂苷:川续断皂苷Ⅵ(1)、威严仙皂苷A(2)、续断皂苷A(3)、3-O-(2-O-乙酰基)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯苷(4)、3-O-(4-O-乙酰基)-α-L-吡喃阿拉伯糖常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯苷(5),6个环烯醚萜苷:马钱苷酸(6)、马钱子苷(7)、当药苷(8)、续断苷A(9)、续断苷B(10)、林生续断苷I(11),以及2个其他类成分:5-羟甲基-2-呋喃甲醛(12)、α-亚麻酸(13),其中化合物4、12、13为首次从续断药材中分离得到,也是首次从川续断属植物中分离得到。该研究进一步丰富了续断药材化学成分组成,对于建立以质量标志物为药材优劣评价依据的续断药材质量标准提供了物质基础,同时为进一步阐释续断“发汗”加工前后化学成分及其含量的变化、化学成分转化机制研究提供了更丰富的化学物质基础。

伤科接骨合剂质量标准研究

目的:建立伤科接骨合剂的质量标准。方法:采用薄层色谱法对伤科接骨合剂中续断、甘草进行定性鉴别,并用高效液相色谱法对川续断皂苷Ⅵ进行含量测定,使用phenomenex Luna Omega PS C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:乙腈-水(30∶70),流速:1.0 mL/min,柱温:25℃,检测波长:212 nm,进样量:10μL。结果:薄层色谱鉴别斑点清晰,专属性强,无干扰;川续断皂苷Ⅵ在0.163,4~5.230,0μg范围内,进样量与峰面积线性关系良好(r=0.999,9),平均加样回收率为100.27%,RSD%为1.56%(n=9)。结论:本法简便、准确、重复性好,可有效控制伤科接骨合剂的质量。

不同炮制方法对续断饮片中川续断皂苷Ⅵ,Ⅹ含量的影响

目的:探讨不同炮制方法对续断中川续断皂苷Ⅵ,Ⅹ含量的影响。方法:采用HPLC同时测定续断中川续断皂苷Ⅵ,Ⅹ含量,考察不同炮制方法对川续断皂苷Ⅵ,Ⅹ含量的影响。结果:与续断生品相比,炮制后川续断皂苷Ⅵ含量增加,川续断皂苷Ⅹ含量减少。结论:不同炮制方法均能影响续断中皂苷类成分含量,证明了传统炮制方法的合理性。

HPLC-ESI/MS法测定续断“发汗”前后绿原酸和川续断皂苷Ⅵ的含量

目的:建立续断"发汗"前后绿原酸和川续断皂苷Ⅵ的高效液相色谱-电喷雾-三重四极杆质谱联用测定方法。方法:采用Agilent Zorbax SB C18(3.5 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱,以水(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱(0～3 min,60%B→100%B;3～7 min,100%B;7～10 min,100%B→60%B)。绿原酸以m/z 353.0为母离子,m/z 191.0、127.0为子离子,川续断皂苷Ⅵ以m/z 927.5为母离子,m/z 603.3、323.3为子离子,采用多反应监测(MRM)负离子模式对续断"发汗"前后进行检测。结果:5个不同批次的续断经"发汗"后,绿原酸含量均有所降低,分别降低了41.18%、20.54%、20.51%、54.27%、5.02%;川续断皂苷Ⅵ的含量均有所增加,分别增加了15.45%、1.18%、12.08%、9.22%、119.72%。结论:产地加工—"发汗"影响续断中绿原酸和川续断皂苷Ⅵ的含量,实验结果为进一步研究"发汗"机理提供依据。

川续断皂苷Ⅵ的研究进展

川续断皂苷Ⅵ（asperosaponinⅥ）又称木通皂苷D（Akebia saponin D）,简称ASD,是中国传统中药川续断的主要活性成分,研究表明ASD具有神经保护、心肌保护、抗骨质疏松、抗细胞凋亡、保肝降脂等药理作用,应用前景广泛。近年来,随着研究的深入,一些新的药理活性相继被发现。ASD可多靶点发挥药效,其神经保护、心肌保护、保肝降脂作用均与抑制细胞凋亡有关,同时还可促进肿瘤细胞的凋亡。虽然ASD的药理作用应用前景广泛,但生物利用度不佳极大地限制了其发展与推广,建议可通过纳米给药系统、缓控释给药系统等制剂技术进一步改善。本文以近年来国内外研究报道的ASD的文献为基础,对ASD的提取分离、含量测定、药理作用、非临床药代动力学等方面的研究内容进行总结,以期为后续ASD的临床应用提供参考。

液质联用技术联合化学计量法分析比较续断盐制前后质量差异

目的通过超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)鉴定续断DipsaciRadix盐制前后化学成分,并寻找其差异性成分。方法液相采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,柱温25℃,体积流量0.8 m L/min,检测波长215 nm。质谱采用电喷雾离子源负离子模式采集样品数据,扫描范围为m/z100~2000。根据质谱信息,结合碎片裂解规律,与数据库、文献及对照品的比对对检测到的化学成分进行综合鉴定;通过主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)对比分析续断盐制前后的质量差异。结果共鉴定和推测出生续断与盐续断中54种共有化学成分,主要包括皂苷类、环烯醚萜类和酚酸类化合物等。通过多元统计分析表明,生续断和盐续断在PCA模型中能清晰地分为2类,OPLS-DA模型筛选得到12个主要差异成分,分别为马钱苷酸、绿原酸、咖啡酸、马钱苷、异绿原酸B、异绿原酸A、茶茱萸苷、异绿原酸C、续断苷B、续断苷A、川续断皂苷Ⅵ、木通皂苷St(b)。结论建立了生续断与盐续断化学成分定性分析的方法,初步筛选了影响续断盐制前后质量变化的主要化合物,为后续对续断药效物质基础的研究提供了依据,有助于提高续断的质量控制水平。

续断总皂苷对阿尔茨海默病小鼠学习记忆能力的改善作用

目的:研究续断总皂苷对阿尔茨海默病小鼠学习记忆的改善作用及机理。方法:采用三氯化铝致小鼠阿尔茨海默病模型,给小鼠造模同时即给予药物治疗,水迷宫检测3组小鼠学习记忆能力,观察各组动物体重、脑重量,HE染色观察海马组织病理改变,免疫组化方法观察老年斑沉积。结果:模型组与正常组比较,小鼠学习、记忆能力明显降低,体重无明显减少,脑重量明显减轻,海马组织神经细胞数量明显减少,颗粒细胞空泡变性,胶质细胞增生,免疫组化结果显示较多老年斑沉积;续断总皂苷组与模型组比较,小鼠学习、记忆能力明显提高,脑重量明显增加,神经细胞增多,颗粒细胞变性减少,无明显胶质细胞增生,老年斑沉积减少。结论:续断总皂苷可提高小鼠的学习记忆能力,其机制可能与减少神经细胞死亡变性和减少老年斑沉积有关。

基于UPLC-Triple-TOF/MS分析续断“发汗”前后化学成分

目的通过超高效液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱法(UPLC-Triple-TOF-MS)快速分析续断DipsaciRadix"发汗"前后的化学成分。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5.0μm)色谱柱;流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,检测波长215 nm,柱温为25℃;质谱采用UPLC-Triple-TOF 5600+飞行时间液质联用仪,负离子模式下扫描检测,扫描范围m/z 100~1500。根据高分辨质谱结合二级质谱所得的信息对续断"发汗"前后化学成分进行快速的鉴定。结果根据化合物保留时间、质谱信息,推测了续断"发汗"前后52个共有化学成分,主要包括三萜皂苷类、环烯醚萜类、酚酸类等,同时分析了主要成分的裂解规律。并比较了续断"发汗"前后化学成分的差异,发现发汗后马钱苷酸、绿原酸、马钱苷、异绿原酸A、川续断皂苷VI等20种成分含量降低,咖啡酸、异绿原酸、异绿原酸C、大花双参苷A等成分含量在发汗后升高。结论研究发现续断"发汗"前后化学成分种类上无明显差异,而在成分含量上存在一定差异,未"发汗"续断化学成分含量普遍高于"发汗"续断。本实验采用UPLC-Triple-TOF-MS技术分析"发汗"对续断的化学成分的影响,为探究续断"发汗"前后化学成分物质基础和进一步为续断产地加工方式的研究提供理论依据。

续断产地加工“发汗”前后总皂苷及常春藤皂苷元的含量测定

目的研究续断产地加工"发汗"前后总皂苷及常春藤皂苷元的含量变化,探索续断产地加工"发汗"的机制。方法采用高效液相色谱法和紫外分光光度法分别测定不同产地续断"发汗"前后常春藤皂苷元和总皂苷的含量。结果经产地加工"发汗"后,续断常春藤皂苷元与总皂苷的含量均降低。结论产地加工工艺"发汗"对续断中总皂苷和常春藤皂苷元的含量均有明显影响,实验结果为进一步研究"发汗"机制和全面评价续断质量提供依据。