女贞子对自由基损伤的红细胞膜流变性的保护作用——分子学机理探讨

目的:为探明女贞子对自由基损伤红细胞膜流变性的保护作用的分子机理。方法:对自由基作用前后红细胞膜分子流动性和分子结构的改变与自由基加女贞子提取液共同作用后的红细胞膜相应参数进行了比较。结果:加入女贞子提取液后:(1)自由基产生率平均降低了64%以上。(2)红细胞膜剪切弹性膜量只增加27.7%。(3)对自由基引起的膜蛋白分子和膜脂分子流动性降低的保护不甚明显。(4)能够防止自由基对氢键的破坏,但不能防止二硫键形成所造成的膜蛋白结构的重构。(5)不能减轻自由基对膜磷脂亲水头部和疏水尾部的过氧化作用。结论:本研究中自由基损伤程度与自由基浓度有一定的量效关系,并在膜脂分子损伤后3h 表现出部分可逆性,但与自由基浓度相关。女贞子可减轻自由基对膜分子的损伤程度。

三胶颗粒质量标准研究

目的 建立三胶颗粒的质量标准。方法 采用TLC法定性鉴别了当归、女贞子、黄芪、陈皮;用HPLC法测定制剂中橙皮苷的含量。结果 制剂样品中橙皮苷的平均含量为1.69 mg·g-1,平均回收率为100.41％,RSD=1.36％(n=5)。结论该方法简单、准确,能有效控制制剂质量。

HPLC法同时鉴别贞芪扶正颗粒中的女贞子和黄芪

目的:建立 HPLC 法同时鉴别贞芪扶正颗粒中的女贞子和黄芪药材,提高贞芪扶正颗粒质量标准。方法:采用 C_(18)色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),以水-乙腈为流动相梯度洗脱,流速1 mL·min^(-1),检测波长275 nm,柱温30℃。结果:样品中有女贞子药材的3个特征峰,其中一个峰为红景天苷;有黄芪药材的2个特征峰,其中一个峰为毛蕊异黄酮顷。结论:本法操作简单、专属性好、耐用性强,适用于贞芪扶正颗粒中女贞子、黄芪药材的同时鉴别。

益视明目颗粒的质量标准研究

目的建立益视明目颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱（TLC）法鉴别制剂中的女贞子﹑陈皮﹑白芍,采用高效液相色谱（HPLC）法测定制剂中芍药苷含量。结果 TLC法可鉴别出益视明目颗粒中女贞子、陈皮、白芍的特征斑点。用键合十八烷基硅胶反相色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液（16：84）为流动相,1 ml/min流速,检测波长230 nm;柱温：30℃,芍药苷对照品线性范围0.060 77~0.607 7μg（r=0.999 9）,平均加样回收率为97.43%,RSD=0.61%（n=6）。结论本法专属性强,重现性好,结果准确,可用于益视明目颗粒的质量控制。

补肾益智颗粒的质量标准研究

目的建立补肾益智颗粒的质量标准研究。方法采用薄层色谱法对补肾益智颗粒中的蛇床子、女贞子和制何首乌进行定性鉴定,采用高效液相色谱法对其中蛇床子素和2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量进行测定。对于蛇床子素,高效液相色谱系统是由Phenomenex Luna C18(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-水(65∶35)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为322 nm。对于葡萄糖苷,高效液相色谱系统包括C18(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-水(30:70)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为320 nm。结果补肾益智颗粒的蛇床子、女贞子和制何首乌供试品薄层色谱中,在与对照品色谱相应位置上,显相同颜色的斑点;蛇床子素在0.09～1.35μg范围内与峰面积积峰值线性关系良好(r=0.999 9)。2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(二苯乙烯苷)在0.84～3.15μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9)。平均回收率分别为100.52%和99.75%。结论建立的质控方法简便,快速,准确,回收率高,重现性好,可用于补肾益智颗粒的质量控制。

墓头回、金耳及贞芪扶正冲剂对小白鼠免疫功能影响的初步观察

我们先后进行了两批实验,观察中草药墓头回、金耳及贞芪扶正冲剂对102只昆明种小白鼠免疫功能的影响。实验结果显示这三种药物对小白鼠ANAE阳性淋巴细胞百分数(尤其是点状颗粒型淋巴细胞)、Ea玫瑰花环形成百分率,巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数均有不同程度的增进作用,本文对其作用机理做了初步讨论。

复方黄金颗粒的薄层鉴别

目的:建立控制复方黄金颗粒的鉴别方法。方法:采用薄层层析对颗粒中黄芪、金银花、女贞子、枸杞子等中药进行薄层鉴别。结果:该薄层鉴别方法专属性强、重现性好。

基于网络药理学与分子对接探讨黄芪-女贞子药对治疗阿尔茨海默病的作用机制

本研究旨在探讨黄芪-女贞子药对治疗阿尔茨海默病的作用机制。通过中药系统药理学数据库检索黄芪与女贞子的活性成分与预测靶点;通过GEO、Genecards数据库挖掘阿尔茨海默病的相关靶点基因;通过Cytoscape软件与String数据库构建活性成分-靶点网络及蛋白互作网络图。对核心作用基因进行基因本体分析及京都基因与基因组百科全书通路富集分析,最后进行分子对接验证。结果筛选出黄芪-女贞子药对有效成分21个,关键作用基因41个,主要富集在阿尔茨海默病相关通路、AGE-RAGE信号通路、TNF信号通路及IL-17信号通路等,分子对接显示主要有效成分黄芪甲苷、齐墩果酸、山奈酚、槲皮素、木犀草素及芒柄花黄素均能与靶点较好的结合。综上,本研究根据黄芪-女贞子药对治疗阿尔茨海默病具有多成分、多靶点协同作用的特点,初步预测了其可能的分子作用机制,为后续研究提供了基础。

糖安胶囊鉴别方法研究

目的：研究糖安胶囊中黄连、黄苓、女贞子等各味药的快速鉴别方法。方法：采用薄层色谱法对糖安胶囊中黄连、黄芩、女贞子等进行定性鉴别。结果：结果表明本方法稳定,重现性好,专属性强。结论：此方法可用于糖安胶囊的质量控制。

健脾益肾颗粒的质量标准改进研究

目的提高健脾益肾颗粒的质量标准,为健脾益肾颗粒质量评价提供参考。方法选取薄层色谱法对健脾益肾颗粒中党参、枸杞子、女贞子、白术、菟丝子及补骨脂进行定性鉴别;采用高效液相色谱法同时测定处方中特女贞苷、补骨脂素、异补骨脂素与白术内酯Ⅲ的含量。结果党参、枸杞子、菟丝子、女贞子、补骨脂、白术的薄层色谱图与对照药材或相应对照品在相同位置显相同颜色的荧光斑点且分离度好,阴性样品无干扰;特女贞苷、补骨脂素、异补骨脂素与白术内酯Ⅲ分别在0.0656~1.6391μg(r=0.9998)、0.0080~0.1988μg(r=1.000)、0.0050~0.1255μg(r=1.000)和0.0029~0.0713μg(r=0.9998)与峰面积呈良好的线性关系;精密度、稳定性和重复性试验的RSD值均<5%;检测限为0.01~0.03 ng·mL-1,特女贞苷、补骨脂素、异补骨脂素、白术内酯Ⅲ的低、中、高浓度的平均回收率分别在103.8%~104.7%、96.4%~100.2%、99.2%~101.3%、105.6%~107.4%,RSD分别在0.20%~1.2%、1.1%~2.6%、0.60%~1.4%、1.9%~2.8%(n=3)。结论该方法准确可靠,简单易行,专属性和重复性良好,可用于健脾益肾颗粒的定性鉴别和定量测定,可有效评价与控制健脾益肾颗粒的质量。

鹿鞭回春胶囊中主要药味的薄层色谱鉴别

目的:建立鹿鞭回春胶囊的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法对处方中淫羊藿进行了鉴别。结果:斑点清晰,阴性对照无干扰。结论:所建立的薄层色谱鉴别方法可用于鹿鞭回春胶囊的质量控制。

补肾养血胶囊中主要药味的薄层色谱鉴别

目的:建立补肾养血胶囊的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法对处方中红参、赤芍、当归、女贞子、淫羊藿进行了鉴别。结果:斑点清晰,阴性对照无干扰。结论:所建立的薄层色谱鉴别方法可用于补肾养血胶囊的质量控制。

HPLC-MS/MS法同时测定更年宁中11个成分

目的:建立HPLC-MS/MS法同时测定更年宁中哈巴苷、红景天苷、特女贞苷、党参炔苷、蟛蜞菊内酯、哈巴俄苷、王不留行黄酮苷、6-姜辣素、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ共11个成分的含量。方法:采用C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm),以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^(-1),柱温为25℃,进样量为1μL;质谱采用电喷雾离子源(ESI),电离模式为ESI-(哈巴苷、红景天苷、特女贞苷、党参炔苷、蟛蜞菊内酯、哈巴俄苷)和ESI+(王不留行黄酮苷、6-姜辣素、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ),多反应监测(MRM)模式进行定量分析。结果:11个成分的线性范围分别为1.485~29.71、1.620~32.40、7.801~156.0、0.518~10.35、0.167~3.333、0.359~7.179、1.455~29.10、1.520~30.40、0.160~3.205、0.143~2.864、0.157~3.136μg·mL^(-1),r均≥0.9980;平均回收率(n=6)在95.9%~102.6%,RSD在0.90%~3.0%。5个企业生产的10批更年宁样品中上述11个成分的含量分别为14.8~104.5、37.6~288.5、335.8~1332.8、6.2~10.1、6.6~61.8、13.7~75.1、57.4~132.8、16.9~70.6、11.8~33.9、3.4~15.4、6.5~12.9μg·g^(-1)。结论:本方法灵敏、准确,可用于更年宁的质量控制。

六经头痛片HPLC指纹图谱建立及多指标成分定量测定研究

目的建立六经头痛片(LTT)HPLC指纹图谱,并采用波长切换技术同时定量测定3′-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、特女贞苷和大豆苷元,为评价LTT质量提供依据。方法采用HPLC法,以Diamonsil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.1%磷酸水为流动相,分别建立LTT高极性和低极性部分指纹图谱,并采用波长切换技术同时测定LTT中3′-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、特女贞苷和大豆苷元5种指标性成分量。结果分别建立了11批LTT高、低极性部分指纹图谱,其相似度均大于0.90;低极性指纹谱确定了16个共有峰,对其中12个共有峰进行了归属,11、12、13号峰来源于白芷,1、2、3、7号峰来源于葛根,8号峰来源于女贞子,5、6号峰来源于川芎,15号峰来源于藁本,4号峰为川芎和藁本的共有峰,对其中7个共有峰经对照品指认,分别为葛根素(1号峰)、3′-甲氧基葛根素(2号峰)、大豆苷(3号峰)、阿魏酸(4号峰)、大豆苷元(7号峰)、欧前胡素(11号峰)和异欧前胡素(13号峰);高极性指纹图谱确定了10个共有峰,其中2~9号峰来源于葛根,1、10号峰来源于女贞子,对其中5个共有峰经对照品指认,分别为3′-羟基葛根素(2号峰)、葛根素(3号峰)、3′-甲氧基葛根素(4号峰)、大豆苷(7号峰)和特女贞苷(10号峰)。多成分定量测定中,3′-羟基葛根素在71.60~716.00 ng(r=0.999 1)、葛根素在407.78~4 077.80 ng(r=0.999 4)、大豆苷在90.72~907.20 ng(r=0.999 9)、特女贞苷在95.80~958.00 ng(r=0.999 1)、大豆苷元在21.98~219.80 ng(r=0.999 9)线性关系良好,平均加样回收率和相应的RSD分别为101.1%、1.38%,97.8%、0.72%,99.1%、0.75%,97.8%、2.75%,98.7%、0.70%;10批样品中3′-羟基葛根素量为3.08~3.84 mg/m L、葛根素17.71~21.24 mg/m L、大豆苷3.51~4.71 mg/m L、特女贞苷1.40~5.69 mg/m L、大豆苷元0.66~0.86 mg/m L。结论该法稳定可靠、重复性好,通过HPLC指纹图谱结合多指标定量测定方法较全面地反映了LTT内在质量,为其质量控制提供了可靠的科学依据。

基于网络药理学的女贞子-黄芪药对的抗癌机制

目的:筛选女贞子-黄芪药对抗癌治疗的主要活性成分,预测活性成分的作用靶点,建立药物成分-活性成分-作用靶点网络,进一步探讨女贞子-黄芪药对抗癌治疗的潜在作用机制。方法:采用中药系统药理学技术平台(TCMSP)中筛选女贞子-黄芪的潜在活性成分,采用Dis Ge NET数据库与人类孟德尔遗传数据库(Online Mendelian Inheritance in Man,OMIM)预测和筛选其治疗癌症的作用靶点,采用omicshare平台(http://www. omicshare. com/)对药物靶点和疾病靶点进行匹配。借助Cytoscape软件构建"药物-活性成分-关键作用靶点"网络。采用String数据库构建蛋白质相互作用网络。采用DAVID数据库对女贞子-黄芪关键作用靶点进行生物功能及代谢通路分析。结果:通过筛选得到33个药物活性成分,共涉及203个作用靶点,与疾病靶点有关的活性成分为14个,主要通过调控ERBB2,AR,SRC,EGFR,ESR1等靶蛋白及癌症中的蛋白多糖通路、癌症通路、癌症中的微小mRNA(micro RNA)等通路等发挥抗癌治疗作用。结论:女贞子-黄芪药对对癌症的治疗作用体现了中药多成分-多靶点-多途径的特点,为阐释其抗癌治疗的作用机制与物质基础提供了科学依据。

强力健身胶囊定性定量方法的研究

目的:建立强力健身胶囊定性定量方法。方法:采用薄层色谱法对方中女贞子、远志和甘草进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定样品中淫羊藿苷的含量:色谱柱为Kromasil 100-5 C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(24∶76)为流动相,流速1 mL.min-1,检测波长为270 nm。结果:薄层鉴别的色谱斑点清晰,阴性对照无干扰;淫羊藿苷进样量在0.041～3.318μg的范围内呈良好的线性关系(r=0.9999)。结论:本方法具有简便、准确及专属性强的特点,可用于强力健身胶囊的质量控制。

基于网络药理学研究“虎杖-女贞子”配伍治疗急性痛风性关节炎机制及实验验证

基于网络药理学方法预测“虎杖-女贞子”配伍治疗急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)作用机制,并通过动物实验进行初步验证。利用中药系统药理分析平台(TCMSP)收集虎杖、女贞子化学成分及对应靶点,结合文献报道并选择口服生物利用度(oral bioavailability,OB)≥30%和类药性(drug-likeness,DL)≥0.18的有效活性成分及其作用靶点,借助UniProt数据库对靶点进行规范化。通过GeneCards、NCBI、DrugBank数据库收集AGA相关疾病靶点。将药物靶点与疾病靶点取交集得到“虎杖-女贞子”作用的关键靶点,然后对关键靶点进行蛋白互作(protein-protein interaction network,PPI)网络分析、基因本体(Gene Ontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析,并利用尿酸钠晶体诱导的AGA小鼠模型对关键靶点进行验证。结果发现,虎杖和女贞子有效活性成分25个,通过检索并经过标准化处理后获得287个药物靶点。在GeneCards、NCBI、DrugBank数据库中共获得811个AGA相关靶点。药物靶点与疾病靶点取交集后获得88个共有靶点。PPI网络分析发现肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)可能是“虎杖-女贞子”配伍治疗AGA的核心靶点。GO富集分析确定了566个条目(P<0.05),包括炎症反应、免疫反应等多个生物过程;KEGG通路富集分析确定了116条相关信号通路,涉及炎症、免疫等方面,主要有NOD样受体信号通路、TNF信号通路等。动物实验证实“虎杖-女贞子”可以降低AGA小鼠踝关节肿胀度,改善AGA小鼠异常步态,下调关节部位TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白表达,表明“虎杖-女贞子”通过调控TNF-α、IL-6和IL-1β靶点发挥治疗AGA作用,也表明了网络药理学预测药物作用靶点的可行性。该研究初步探讨了“虎杖-女贞子”配伍治疗AGA作用的关键靶点及涉及的生物信号通路,体现了其具有多途径、多靶点作用的特点,为“虎杖-女贞子”配伍治疗AGA研究提供药理学依据,以及进一步的作用机制研究提供参考。