基于HPLC指纹图谱结合化学模式识别以及多指标成分定量评价前胡药材质量

基于HPLC指纹图谱和多指标成分含量测定,并结合化学模式识别,评价不同产地前胡药材质量。采用Agilent SB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.5%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.5 mL/min,检测波长321 nm,建立指纹图谱并对4个香豆素类成分进行定量,采用聚类分析(hierarchical clustering analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、偏最小二乘法-判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)对不同产地前胡药材进行质量评价。结果显示16批前胡药材HPLC指纹图谱相似度为0.966~0.999,确定了21个共有峰,共指认了9个成分。通过化学模式识别分析,将16批样品聚类为三类:以安徽宁国、亳州等为主的道地产区前胡,以湖南、贵州、重庆等为主的前胡,以及高海拔云南产区的前胡,并确立8个差异性质量标志物。多指标含量测定不同产地前胡的佛手柑内酯、白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡素E含量分别为0.0167~0.1319 mg/g、6.0696~16.2255 mg/g、0.4265~2.0100 mg/g、1.3407~3.1155 mg/g。本研究所建立的指纹图谱和含量测定方法专属性强,稳定性高,分离度良好,结合化学模式可用于前胡药材的质量评价。

浅析前胡之推陈致新功用

前胡味苦、辛,性微寒,归肺经,《神农本草经》《本草经集注》等均记载其有推陈致新功效,可祛除在表之水饮,解在表之邪气,从而达到“推陈”之功,且其味甘可健中焦,补益胃气,故在祛除病理产物的同时还具有补益之功。柴胡、前胡均能疗伤寒寒热,发表散风,推陈致新,清里散结,而前胡更偏于除里之痰饮水气,散表之风邪,其与半夏相配能制痰饮痞结,降逆化浊;与黄芩相配可泻厥阴伏火;与桂枝相配能散表之风邪;与生姜相配意在温胃化饮。前胡之推陈致新功用既体现在气机层面,可理气、散气,对不同程度的气机瘀滞、气机凝结等均有效;又表现在活血通脉方面,在理气的基础上,通行血脉,活血化瘀。散气、活血均是“推陈”的体现,“陈”包括机体的病理产物如痰浊、水饮、瘀血、滞气、燥矢等,推出体内陈旧之代谢废物,促使新生之物产生,从而使机体达到气血通畅、五脏安和的状态。

前胡生产加工过程中香豆素类成分含量的影响因素研究

目的:考察栽培方式、产地、加工方法及外观性状对前胡中香豆素类成分含量的影响。方法:采用超高效液相色谱法,测定不同生长模式(大田栽培、山地栽培和山地野生)、产地、加工方法(“统个”、薄片、不同干燥温度)及外观性状(根部分叉或不分叉)前胡中白花前胡香豆精Ⅱ、白花前胡甲素、白花前胡乙素、白花前胡素E质量分数及4个香豆素质量分数的和(TC)。ACQUITY UPLC■BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相A为甲醇-四氢呋喃(60∶40)、流动相B为超纯水,梯度洗脱(0~25 min,40%~65%A);检测波长为321 nm;柱温为30℃;流速为0.25 mL·min–1;进样量为2μL。结果:TC为山地野生>山地栽培>大田栽培;不同产地前胡的香豆素含量差异有统计学意义;不同干燥方法加工的前胡香豆素含量差异有统计学意义;根部分叉的前胡中白花前胡甲素含量显著低于不分叉的前胡。结论:前胡生产和加工过程中,应选择山地栽培,尽可能减少根部分叉,加工应选择50℃以下“统个”干燥,该方法可以显著提高前胡中香豆素类成分的含量。

基于近红外光谱技术绿色快速预测前胡中白花前胡甲素含量

目的:基于近红外光谱技术(NIRS)建立前胡中白花前胡甲素的定量模型,实现对前胡质量的绿色快速评价。方法:运用高效液相色谱法(HPLC法)测定130份前胡样品的白花前胡甲素含量并采集其漫反射NIRS光谱,采用标准正态变换(SNV)法预处理光谱,并基于最小偏二乘回归法(PLS)建立前胡中白花前胡甲素的定量校正模型。结果:此模型校正集的均方根误差和相关系数分别为0.1047和0.9380,交叉验证的均方根误差和相关系数分别为0.1230和0.9180,预测集的均方根误差和相关系数分别为0.1251和0.8815。从此模型的校正集、预测集以及交叉验证结果来看,模型具有很高的预测精度。结论:此研究使用NIRS技术所建前胡的定量模型稳定可靠,可实现对市场前胡的质量的绿色快速鉴别,并为维护消费者利益和临床使用安全性,提供了科学依据。

中药防风与前胡的比较研究概况

防风和前胡为常用中药,因药材性状相似,鉴定较为困难,经常出现混用或错用的现象。两者均来源于伞形科植物的干燥根,化学成分相似,临床上均可用于治疗感冒,但两种药材之间存在明显的差异。防风始载于《神农本草经》,为祛风要药,主要化学成分为色原酮类化合物;前胡始载于《名医别录》,为化痰止咳平喘药,主要化学成分为香豆素类化合物。通过对防风与前胡的异同点进行梳理总结,以期为两者的快速、准确鉴定和选用提供新的研究思路和解决方法,同时保障临床用药的安全性。

基于代谢组学分析揭示白花前胡和紫花前胡的差异代谢物

为探究白花前胡和紫花前胡中代谢物的种类及相对含量,借助于广泛靶向代谢组学的方法,利用UPLC-MS技术对白花前胡和紫花前胡成分进行分析、鉴定,确定主要差异代谢产物,并对其进行相对定量分析;从整体角度出发,结合多元统计分析,对二者中主要差异性成分进行系统鉴定,并对差异代谢物进行KEGG通路富集分析。从白花前胡和紫花前胡中共鉴定出12类1556个代谢产物,主要差异代谢物12类共1085种,其中酚酸类、黄酮类、木脂素及香豆素类、生物碱类和脂类等化合物差异较大,分别占比为19.2%、15.9%、10.1%、9.4%和9.2%;其中421种成分上调,664种成分下调。差异代谢产物以biosynthesis of phenylpropanoids(ko01061)、linoleic acidmetabolism(ko00591)、pentose phosphate pathway(ko00030)、biosynthesis of secondarymetabolites(ko01110)、phosphotransferase system(ko02060)、phenylalanine和Tyrosine and tryptophan biosynthesis(ko00400)等6条通路富集显著,主要为酚酸类、脂肪酸类等成分的关键代谢通路。研究表明,白花前胡和紫花前胡化学成分差异较大,2020版《中国药典》将其单列为不同的药材,具有一定的先进性。本研究可为白花前胡和紫花前胡的标准修订及品质评价提供参考。

前胡对大鼠缺氧性肺动脉高压逆转效应的实验观察

本实验用生理指标测定、心脏解剖称重、形态学观察和形态计量学方法，动态观察中药前胡对低氧大鼠腺泡内肺动脉（ＩＡＰＡ）构形重组及肺动脉高压（ＰＨＴ）形成的逆转恢复作用。结果表明：前胡不仅能拮抗缺氧性ＩＡＰＡ收缩，降低肺动脉压力，抑制肺动脉壁细胞增殖与肥大，还能在一定程度上逆转肺动脉高压的结构和功能。提示前胡也是治疗低氧性ＩＡＰＡ构型重组和肺动脉高压的有效药物之一。

基于电子鼻技术分析开花对前胡气味的影响

为研究开花前后两种前胡样品的气味指纹变化,探讨电子鼻应用于中药质量评价的可能性。采用电子鼻检测开花前后两种前胡样品气味在传感器上的响应值,采用主成分分析法(PCA)、判别因子分析法(DFA)进行分析,建立气味指纹图,并进行统计质量控制分析(SQC)。结果表明,电子鼻对开花前后两种前胡样品气味变化反应灵敏,可以完全区分,可以应用于中药气味鉴别研究。

前胡诱导水稻抗稻瘟病的活性及其有效成分

目的分离、纯化和鉴定中药前胡诱导水稻抗稻瘟病的活性成分。方法以诱导水稻抗稻瘟病的活性为追踪目标,对前胡的丙酮提取物进行硅胶柱层析分离得到活性最强的部分,再用SephadexLH-20和液相制备色谱分离得到诱抗活性的主活性成分,采用紫外-可见光谱、红外光谱、ESI-MS质谱和核磁共振(1HNMR和13CNMR)波谱法对其进行结构解析与鉴定。结果该植物的丙酮提取物通过硅胶柱层析得到7个馏分,其中4、5、6三个馏分对水稻稻瘟病有较强的诱导抗病性,质量浓度为50mg·L-1时,其诱抗效果分别为55.18%、59.54%、54.36%,经过SephadexLH-20和液相制备色谱分离得到3个主活性成分,质量浓度为10mg·L-1时,其诱抗效果分别为52.77%、60.76%、60.28%,波谱结构解析表明,三者分别为北美芹素、前胡香豆素Ⅱ、前胡香豆素Ⅲ,其中前胡香豆素Ⅲ为国内首次从前胡中分离得到。结论香豆素是前胡诱导水稻抗稻瘟病的主要活性成分。

导种环槽U型孔组合型轮式前胡排种器设计与试验

为推进中草药前胡全程机械化生产,解决前胡种植环节无适用播种装置问题,设计一种导种环槽U型孔组合轮式排种器。阐述播种装置及排种器的结构和工作原理,依据前胡种子的外形特征及主要物理力学参数,分析得出排种器关键结构参数及工作参数,构建充种和排种过程中前胡种子颗粒群的力学模型。应用离散元软件EDEM对排种器的排种性能进行仿真优化试验,研究U型孔深度、U型孔宽度和导种环槽倾角对平均播种量和排种均匀性变异系数的影响,采用Box-Behnken响应面优化法进行三因素三水平正交仿真试验,得到U型孔深度为4.65 mm、U型孔宽度为13.63 mm、导种环槽倾角为47.01°时,平均播种量和排种均匀性变异系数分别为0.199 g/s和12.37%。以排种轮转速、种层初始充填高度为试验因素,以行内排种均匀性变异系数、总排量稳定性变异系数、各行排量一致性变异系数为试验指标,进行供种性能两因素五水平二次回归正交旋转组合台架试验。台架优化试验结果表明,排种轮转速为25.69 r/min、种层初始充填高度为46.70 mm时,行内排种均匀性变异系数、总排量稳定性变异系数、各行排量一致性变异系数分别为18.62%、1.60%、2.96%,排种器工作性能最佳。田间试验表明,作业速度为1.2 km/h时,测得行内排种均匀性变异系数、总排量稳定性变异系数、各行排量一致性变异系数分别为22.54%、1.95%、3.66%,排种性能较好。该研究可为扁平不规整外形作物种子排种器设计提供参考。

前胡、矮地茶、槐米复合提取物在卷烟中的应用及其毒理学评价

为了降低吸烟的危害,对添加前胡、矮地茶、槐米复合提取物卷烟的燃吸品质及其烟气的危害性分别进行了感官评价和毒理学评价。结果表明:①含2‰该提取物的卷烟,香气丰满,烟味谐调,余味舒适;②含2‰该提取物的卷烟烟气急性毒性、染色体损伤的遗传毒性、细胞膜脂质过氧化损伤均明显低于未加提取物的卷烟;没有阳性致突变反应;哺乳动物细胞的细胞毒性和染色体畸变稍低于未加添加提取物的卷烟,但没有统计学差异。

前胡挥发油胆碱酯酶抑制作用及化学成分研究

运用微孔高通量筛选方法研究前胡挥发油胆碱酯酶抑制活性,并用气相色谱-质谱联用技术辅以Kovats指数鉴定挥发油的主要化学成分。结果显示前胡挥发油对乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶均具有明显的抑制作用,当前胡挥发油浓度为1μL/mL时,其抑制率分别为(63.76±1.99)%和(51.53±1.70)%;其挥发油共鉴定出32种化学成分,主要有α-蒎烯、左旋-β-蒎烯、月桂烯、1-甲基-3-(1-甲基乙基)苯、(R)-1-甲基-4-(1-甲基乙烯基)环己烯、萜品醇、2-羟基-5-甲基苯乙酮等。本研究结果提示前胡有可能对老年痴呆等神经退行性疾病有一定的治疗作用。

毛前胡的化学成分

从中国西南应用的前胡品种毛前胡，伞形种植物短片藁本Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍｂｒａｃｈｙｌｏｂｕｍ的根中分离鉴定了５个化合物，分别为香豆素化合物伞形花内酯，ｓｅｌｉｎｉｄｉｎ，ａｎｏｍａｌｉｎ，紫花前胡甙及非香豆素化合物阿魏酸。

中药前胡炮制工艺优化的考察

[目的]探索前胡的炮制工艺(包括净制工艺和蜜制工艺),对影响炮制工艺的因素进行考察。[方法]分析影响炮制工艺的因素,在此基础上进行正交设计实验。利用高效液相色谱法(HPLC),以白花前胡甲素的含量作为评价依据。[结果]净制条件为浸润水量50mL/100g,切3mm薄片,干燥温度60℃;蜜制条件为嫩蜜闷润6h后中火炒制10min,白花前胡甲素含量最高,外观最佳。[结论]该实验可为中药白花前胡的炮制提供参考。

多指标综合评价不同产地前胡药材质量

[目的]采用多指标法研究并建立前胡质量评价系统,进而对不同产地前胡质量进行差异性分析。[方法]对前胡水分、总灰分、酸不溶性灰分和醇溶性浸出物分别进行测定,并且采用高效液相色谱法同时测定前胡中白花前胡甲素、白花前胡乙素的含量,将各个指标与含量相结合,建立前胡质量评价体系,并对不同产地前胡进行差异性分析和评价。[结果]不同产地前胡质量虽有差异,但均能符合《中国药典》2010版规定。[结论]多指标结合含量测定的质量评价体系可用于不同产地前胡的等级评价,可以为扩大前胡的种植、栽培提供了理论依据。

产地海拔等对前胡中白花前胡甲、乙含量的影响

目的针对目前前胡含量较难合格的问题,对不同产地前胡的质量进行比较分析。方法采用HPLC-DAD法测定前胡中白花前胡甲素、白花前胡乙素的含量,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm, 5μm),以甲醇-水(75∶25)为流动相,等度洗脱;流速为1.0 mL·min^(-1),柱温25℃,检测波长321 nm,洗脱时间为30 min。并针对实验结果进行了聚类分析、主成分分析。结果 24批不同产地的前胡,白花前胡甲素含量范围在0.83%-1.52%;白花前胡乙素含量范围在0.10%-0.44%,两者均符合规定的占比为45.45%。24批不同产地的前胡聚类分析结果显示,根据海拔可将其分为3类;主成分分析结果显示,综合评分较高的是四川、安徽、重庆、湖北、贵州等高海拔地区。结论由于各地栽培前胡海拔、气候等差异,不同产地高海拔地区前胡的白花前胡甲素和白花前胡乙素含量普遍高于低海拔地区,高海拔地区前胡合格率更高。

抛推组合式草土分离前胡除草机设计与试验

针对丘陵山区前胡种植使用除草机时存在草土不分离导致杂草复生、碎石飞射伤人的问题,设计了一款抛推组合式草土分离除草机。对称螺旋结构的除草轮将土推向两侧,避免碎石飞射伤人。刀齿将杂草抛向后方实现草土分离,防止杂草复生。螺旋结构除草轮采用中轴对称左右旋向相反布置,使得碎石沿轴向两边飞离,有效防止碎石飞射伤到后方机手。通过理论分析确定除草轮的齿形、齿数,分别进行除草轮在杂草-土壤、碎石-土壤模型中的运动分析。使用EDEM和ANSYS耦合仿真,验证其工作性能和物理性能。通过田间试验,验证除草轮能够实现草土分离,得出机具的最佳工作参数为:除草轮转速13 r/s、前进速度400 mm/s、除草深度35 mm,平均除净率为86.7%。

以前胡为例,探讨中药活性成分研究的思路与方法

前胡为中国药典收载的常用中药,我们在对其化学成分和生物活性深入系统研究的过程中,逐渐形成了对中药活性成分研究思路和方法的认识。本文主要结合我们长期的研究工作, 综述了1993年后中药前胡在化学成分、质量标准、资源开发、有效成分的结构修饰与全合成以及药理活性方面的研究近况,其主要目的是介绍如何以前胡活性成分研究为基础,全面提高中药前胡的研究水平,并为新药开发奠定基础。对前胡的研究已初步建立起了活性成分的现代化研究模式,期望其研究思路与方法能为其它中药活性成分的研究提供参考。

清热止咳口服液质量标准及药效学研究

[目的]建立清热止咳口服液的定性、定量测定方法,并建立质量标准。对清热止咳口服液进行药效学观察。[方法]采用薄层色谱法（TLC）对处方中瓜蒌皮、苦杏仁进行薄层鉴别;采用高效液相色谱法（HPLC）对处方中前胡中的白花前胡甲素、白花前胡乙素同时进行含量测定。采用氨水引咳法观察小鼠的咳嗽潜伏期和咳嗽次数。[结果]清热止咳口服液中瓜蒌皮、苦杏仁薄层色谱鉴别特征明显,专属性强;白花前胡甲素、白花前胡乙素分别在10.2～102.00 mg/L,3.96～39.60 mg/L范围内,呈良好的线性关系。白花前胡甲素、白花前胡乙素平均回收率分别为98.94%（RSD 1.39%）、99.74%（RSD 1.75%）。清热止咳口服液可以明显延长浓氨水引起的咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数（P〈0.05）。[结论]该质量控制方法简便、准确、专属性强、重现性好,可用于清热止咳口服液质量控制。清热止咳口服液具有显著的止咳作用。

前胡诱导水稻抗稻瘟病菌活性成分的提取与测定

为探索前胡（Radix peucedani）诱导水稻抗稻瘟病菌（Magnaporthe grisea）活性成分的活性,采用生物活性跟踪法对前胡的诱抗活性成分进行了初步研究,分离了前胡浸提物中的有效成分,并对其生物活性进行了测定。结果表明：前胡丙酮浸提物诱抗水稻抗稻瘟病菌的效果好于其他溶剂浸提物;将丙酮浸提物通过硅胶柱层析,分离得到A4、A5、A6流分,其诱抗水稻抗稻瘟病菌的效果较强,3个流分不同质量浓度的诱抗效果达21.48%~59.54%,且在供试的3个质量浓度范围内,都随着流分质量浓度的降低,防效略有升高。