Two New Glucosides from Radix Polygoni multiflori Preparata

2,3,5,4'-tetrahydroxystilbene-2-O-(2'-O-feruloyl)-beta -D-glucopyranoside, 2,3,5,4'-tetra hydroxystilbene-2-O-(2'-O-p-coumaroyl)-beta -D-glucopyranoside were isolated from Radix Polygoni multiflori Preparata. Structures were elucidated by chemical and spectral evidences.

制首乌不同配伍方式对黑色素及酪氨酸酶活性的影响

目的观察制首乌不同配伍方式的水提物对黑色素上调率及酪氨酸酶活性的影响,优选制首乌“乌须发”最佳的配伍方式。方法分别采用蘑菇酪氨酸酶NaOH裂解法及多巴胺速率氧化法研究制首乌不同配伍方式对黑色素生物合成及酪氨酸酶活性的影响。结果制首乌不同配伍方式均具有黑色素上调的作用,整体表现为制首乌-黑芝麻>制首乌-侧柏叶>制首乌-桑椹>制首乌-女贞子,且在一定范围内呈一定的剂量依赖性;制首乌不同配伍方式对酪氨酸酶的激活率均不同,其中制首乌-侧柏叶和制首乌-桑椹对酪氨酸酶具有抑制作用,但是随着浓度的增加,抑制作用逐渐减弱;制首乌-黑芝麻和制首乌-女贞子对酪氨酸酶具有激活作用,制首乌-黑芝麻较制首乌-女贞子激活作用明显。结论制首乌-黑芝麻为制首乌“乌须发”的最佳配伍,制首乌-黑芝麻配伍能够激活酪氨酸酶的活性,上调黑色素含量。

红参-制何首乌药对抗衰老作用的HT22细胞和秀丽隐杆线虫模型初步研究

目的初步探讨不同提取工艺下红参-制何首乌药对对神经细胞的抗衰作用,为红参-制何首乌药对在抗衰及抗阿尔茨海默病(AD)作用的应用提供数据支撑。方法分别制备30%和70%乙醇回流提取物,30%和70%乙醇渗漉提取物和水提取物。通过流式细胞术检测不同提取物对HT22细胞中β-半乳糖苷酶含量的影响,初步筛选红参-制何首乌药对神经细胞抗衰效果最佳的提取物,并通过β-半乳糖苷酶染色直观分析该提取物对神经细胞的抗衰效果,用秀丽隐杆线虫寿命试验及瘫痪实验验证其抗衰及抗AD作用。结果红参-制何首乌药对的不同提取方式均对HT22细胞具有显著的抗衰老作用,其中70%乙醇渗漉提取物效果最佳。对其进行多浓度验证,显示具有剂量依赖性的保护作用。浓度为0.2 mg·mL^(-1)的70%乙醇渗漉提取物对秀丽隐杆线虫的寿命有明显的延长作用,浓度为0.008 mg·mL^(-1)的70%乙醇渗漉提取物具有缓解瘫痪的趋势。结论红参-制何首乌药对的70%乙醇渗漉提取物具有明显抗神经细胞衰老的作用,具有抗衰老延长寿命与治疗AD的潜力,应深入研究。

HPLC法测定不同产地生何首乌和不同炮制工艺制首乌中顺(反)式二苯乙烯苷含量

目的比较不同产地何首乌及不同炮制工艺制何首乌中顺(反)二苯乙烯苷含量的变化,探究其炮制减毒增效的作用机制,为何首乌质量控制及饮片炮制标准研究提供数据参考,以期降低临床用药风险。方法采用高效液相色谱法,测定何首乌和制何首乌中顺(反)式二苯乙烯苷(2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷)的含量。结果不同批次何首乌和制何首乌中顺(反)式二苯乙烯苷含量范围分别为27.23~358.19μg·g^(-1)和10.30~52.00 mg·g^(-1)。结论本方法操作简单,准确度高,重复性好,可以用于何首乌和制何首乌中顺(反)式二苯乙烯苷含量测定。

基于UPLC-QTOF-MS/MS分析的芪葵颗粒化学成分系统筛选与识别

目的系统定性表征芪葵颗粒(黄芪、制首乌、黄蜀葵花)中的化学成分。方法采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS/MS)联用分析方法对芪葵颗粒水提液进行分离检测,获取正、负离子模式下的原始分析数据;借助AB Sciex PeakView软件,综合采用靶向和非靶向的筛选方法,对获得的原始分析数据进行处理,系统筛选鉴定芪葵颗粒中的化学成分;以不少于2个准分子离子的同时出现,排除碎片离子的干扰,锁定筛选所得目标化合物;依据准分子离子及特征二级子离子质谱信息,结合标准品比对,并参考数据库搜索匹配和文献数据比对,对锁定的化合物进行鉴定或合理归属。结果从芪葵颗粒中共筛选出89个化合物,鉴定出71个化合物,包括黄酮类45个,皂苷类14个,蒽醌类4个,二苯乙烯苷类3个,多糖类2个,有机酸类3个。鉴定结果表明羟基化、糖基化、葡萄糖醛酸化、乙酰化、甲基化、丙二酰化等多种转化反应参与了芪葵颗粒多样化学成分的形成。结论基于UPLC-QTOF-MS/MS靶向和非靶向相结合的筛选鉴定方法可快速全面表征芪葵颗粒中的主要化学成分及其涉及的转化反应,为深入探讨芪葵颗粒的质量控制、组方优化和药效物质等奠定了基础。

制首乌中1个新的四羟基二苯乙烯苷的结构鉴定及其心血管活性研究

目的 从制首乌 (RadixPolygonimultifloriPreparata)水溶性部分寻找心血管活性成分。 方法 采用体外抑制血管平滑肌细胞 (SMC)增殖活性跟踪筛选 ,利用Sephadex ,反相硅胶柱色谱、HPLC对制首乌水溶性成分进行分离纯化 ,应用理化常数测定和光谱 (UV ,IR ,MS ,1HNMR ,13 CNMR ,2D NMR)分析技术鉴定结构。结果 分离并鉴定了 1个单体化合物 2 ,3,5 ,4′ 四羟基二苯乙烯 2 O (6″ O α D 吡喃葡糖 ) β D 吡喃葡糖苷 (I)。 结论 I为新化合物 ,具有较强的抑制SMC增殖活性。

大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的促智活性及其机制

目的 研究制首乌活性单体化合物大黄素 - 8- O-β- D -吡喃葡萄糖苷 (PMEG)的促智活性以及作用机制。方法 小鼠跳台实验以及胆碱酯酶活力测定。结果 ig PMEG后 ,正常小鼠及东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠错误次数显著减少 ;离体实验和整体实验中 PMEG对酶活力具可逆性抑制作用 ,体内外酶活力恢复 5 0 %所需时间分别为 T1 /2 =115 m in,T1 /2 =16 5 m in。结论 PMEG能提高正常小鼠学习记忆功能 ,对东莨菪碱所致学习记忆障碍具防护作用 ;初步认为

制首乌中两个新化合物

目的 :研究制首乌 (RadixPolygonimultifloriPreparata)化学成分。 方法 :应用硅胶、Sephadex、反相硅胶柱色谱对制首乌正丁醇萃取部分中化学成分进行分离纯化 ,应用理化常数测定和光谱 (IR ,MS ,1HNMR ,13 CNMR ,2D NMR)分析技术鉴定结构。结果 :分离并鉴定了 5个单体化合物 :大黄素甲醚 8 O β D 葡糖苷 (I)、大黄素 8 O β D 葡糖苷 (II)、决明蒽酮 8 O β D 葡糖苷 (III)、6 甲氧基 2 乙酰基 3 甲基 1,4 萘醌 8 O β D 葡糖苷 (IV)、2 ,3,5 ,4′ 四羟基二苯乙烯 2 O (2″ O 乙酰基 ) β D 葡糖苷 (V)。结论 :IV和V为新化合物。

制首乌中一种新脂肪酮

目的 :考察制首乌 (RadixPolygoniMultifloriPreparata)化学成分。 方法 :应用硅胶硅胶柱层析对制首乌氯仿萃取部分中化学成分进行分离纯化 ,应用理化常数测定和光谱 (IR ,MS ,1H NMR ,13 C NMR)分析技术鉴定结构。结果 :分离并鉴定了 2个单体化合物 ,分别为 :1,2 二羟基十九酮 3(1,2 dihydroxynonadecone 3,Ⅰ )、没食子酸 (gallicacid ,Ⅱ )。结论 :Ⅰ为新化合物。

斑秃生发颗粒质量标准的研究

目的 :建立斑秃生发颗粒的质量标准。方法 :用HPLC法对斑秃生发颗粒中主要成分 2 ,3,5 ,4′ 四羟基二苯乙烯 2 0 β D葡萄糖苷进行含量测定 ,流动相为乙腈 - 3%冰乙酸水 (12∶88) ,检测波长 32 0nm。同时对制剂中的主要药味黄芪、何首乌、当归、羌活进行薄层鉴别。结果 :平均加样回收率为 99 33% ,RSD =1 74 % (n =6 )。薄层图谱斑点清晰 ,阴形对照无干扰。结论 :本方法可靠准确、重现性好 ,可有效控制制剂的质量。

高效液相色谱法测定何首乌及其炮制品中蒽醌类成分的含量

目的 :采用反相高效液相色谱法 ,对 9个产地的生首乌和 9个产地的制首乌商品药材中水解前、后蒽醌类成分的含量进行测定。方法 :采用InertsilODS - 3柱 ,以甲醇 - 0 1%磷酸 (85∶15 )为流动相 ,检测波长 2 5 4nm。结果 :大黄素、大黄素甲醚、大黄酸、大黄酚、芦荟大黄素在水解前的加样回收率分别为 98 1% ,98 8% ,99 2 % ,99 9% ,99 8% ,精密度 (RSD )分别为 0 8% ,2 1% ,0 9% ,1 9% ,1 5 % ,n=5 ;水解后的加样回收率分别为 96 2 % ,96 1% ,98 3% ,97 6 % ,97 4% ,精密度 (RSD) 分别为 0 7% ,0 6 % ,1 8% ,1 6 % ,2 2 % ,n =5。结论 :各产地的生首乌和制首乌商品药材中蒽醌类苷元主要为大黄素和大黄素甲醚 ,某些产地的药材中另含微量的大黄酸、大黄酚和芦荟大黄素 ,其含量随产地差异较大。

制首乌中二种新磷脂类化合物

目的 考察中药制首乌 (RadixPolygoniMultifloriPreparata)中磷脂类化学成分。方法 应用硅胶 ,Sephadex柱层析对制首乌正丁醇萃取部分中化学成分进行分离纯化 ,应用理化常数测定和光谱 (IR ,MS ,1H NMR ,13C NMR ,2D NMR)分析技术鉴定结构。结果 分离并鉴定了 2个磷脂类单体化合物 :Ⅰ 1 O 正十八烷酰 2 O Δ4′ ,7′ 正十二碳二烯酰 3 O 磷脂酸 O β D 葡萄糖苷 (1 O stearoyl 2 O Δ4′,7′ dodecenoyl 3 O phosphatidicacid O β D glucoside) ,Ⅱ 1 O 正十八烷酰 2 O Δ4′,7′ 正十二碳二烯酰 3 O 磷脂酸 O (6″ O α D 葡萄糖 ) β D 葡萄糖苷 [1 O stearoyl 2 O Δ4′ ,7′ dodecenoyl 3 phosphatidicacid O (6″ O α D glucose) β D glu coside]。结论 Ⅰ 。

反相高效液相色谱法测定制首乌及其4种中成药中大黄素含量

将制首乌及其 4种中成药在酸性条件下水解 ,提取 ,然后以C18为固定相 ,甲醇— 0 2mol/L磷酸二氢钠溶液 (80∶2 0 ,磷酸调节pH 3 0 )为流动相 ,2 89nm为检测波长 ,测定其中大黄素含量 ,建立了测定制首乌及其中成药中大黄素总量的反相高效液相色谱法。同时对样品的水解及提取条件进行了详细考察。在所拟条件下 ,大黄素线性范围为 32 8～ 4 10ng ,平均加样回收率为 97 83%。

益视颗粒的质量标准研究

目的:建立益视颗粒的质量标准。方法:用 TLC 法对益视颗粒进行定性鉴别;并用 HPLC 法测定益视颗粒中有效成分的含量.结果:薄层色谱法可鉴别方中制何首乌、厚朴、木香的对应斑点;HPLC 法可测定有效成分2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-B-D-葡萄糖苷的含量。结论:本法操作简便,重现性好,结果准确,可作为该制剂的质量控制方法。

大孔吸附树脂法分离制何首乌中的二苯乙烯苷

考察了大孔吸附树脂分离制何首乌中二苯乙烯苷(2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷)的工艺参数。以吸附量为考察指标,主要考察了上样浓度、流速、pH对吸附效果的影响,及洗脱液浓度对洗脱效果的影响。结果表明:S-8型树脂对二苯乙烯苷的吸附性能最好,吸附量为40mg/g湿树脂,洗脱率80%,所得产品含量超过60%。

制首乌联合定量运动对大鼠肝脏微循环及肝功能的影响

目的探讨长期服用制首乌联合定量运动对肝脏微循环和肝功能的影响。方法采用2×2析因设计,大鼠随机分为静止不给药(S/C)组,静止给药(S/D)组,游泳不给药(SW/C)组,游泳给药(SW/D)组,每天给予不同水平的制首乌醇提物(0g·kg-1、20g·kg-1p.o)及不同水平的游泳运动(0h、1h),连续30d。采用激光散斑血流监测视频系统检测大鼠肝脏微循环血流灌注量的变化;检测大鼠血清NOS3含量及肝功能9项生化指标。结果与S/C组比,制首乌醇提物降低大鼠肝脏血流平均灌注量(P<0.01),同时显著降低血清内皮源一氧化氮合成酶(NOS3)含量(P<0.05),并可显著升高大鼠总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL),显著降低间接胆红素(IBIL)(均P<0.001)。游泳对制首乌引起的肝脏微循环灌注量和血清NOS3含量下降均有显著恢复作用,但游泳不能改善制首乌引起的血清胆红素异常。结论本研究首次证明大剂量长期服用制首乌可导致肝脏微循环灌注量障碍,而适当的运动则可能拮抗药源性肝脏微循环障碍。

制首乌对大鼠卵巢功能减退的影响

目的雌激素替代疗法治疗卵巢功能减退(DOR)的毒副作用较大。文中研究制首乌对大鼠卵巢功能减退的影响,为临床用药提供更优化的选择。方法将60只SD雌性大鼠随机数字表法分为正常组,模型组,制首乌高、中、低剂量组(4、2、1 g/kg)、阳性对照组(戊酸雌二醇0.18mg/kg)。每天上午10点各组均以雷公藤多甙(TG)75mg/kg灌胃造模(正常组灌服蒸馏水),下午5点制首乌各组和阳性对照组灌服相应药物,正常组和模型组灌服蒸馏水,连续30 d。观察大鼠动情周期,酶联免疫法检测大鼠血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、抗缪勒管激素(AMH)、抑制素B(INHB)的含量,计算大鼠子宫指数和卵巢指数,HE染色观察大鼠卵巢组织形态、计数各级卵泡。结果与正常组相比,模型组大鼠随造模时间的延长出现动情周期延长、不规则,在第11-30天阴道涂片显示为少量上皮细胞或少量角化细胞、持续白细胞;而制首乌各处理组与阳性对照组在第1-10天动情周期正常,在第11-30天出现动情周期相对延长,与模型组相比均有不同程度的恢复。与正常组E2含量[(302.6±42.9)pg/m L]、FSH含量[(7.2±0.5)m IU/m L]、LH含量[(17.4±1.2)m U/m L]比较,模型组大鼠血清E2含量[(155.7±46.8)pg/m L]明显降低(P<0.05),FSH、LH浓度[(21.7±1.2)m IU/m L、(25.0±1.0)m U/m L]显著升高(P<0.05);而血清FSH和LH浓度升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠血清INHB含量明显降低[(494.5±84.1)pg/m L vs(299.2±106.8)pg/m L,P<0.05];制首乌高、中、低组和阳性对照组血清INHB水平[(595.2±66.3)、(741.8±94.1)、(644.3±92.0)、(659.1±84.7)pg/m L]升高(P<0.05)。与模型组相比,制首乌各组和阳性对照组INHB水平显著升高(P<0.05)。与正常组相比,模型组各级卵泡及黄体数量显著减少(P<0.05);制首乌各组和阳性对照组原始卵泡计数降低(P<0.05),生长卵泡计数增多(P<0.05),制首乌高剂量组闭锁卵泡+黄体计数升高(P<0.05),而制首乌低剂量组和阳性对照组闭锁卵泡+黄体计数降低(P<0.05)。与模型组相比,制首乌各组和阳性对照组原始卵泡计数和生长卵泡计数升高(P<0.01),制首乌高、中剂量组闭锁卵泡+黄体计数增加(P<0.05)。结论制首乌干预能抑制TG生殖毒性对大鼠卵巢的破坏,有效保护模型大鼠的生殖功能。

精乌口服液的质量标准研究

目的:完善精乌口服液的质量标准。方法:采用薄层色谱法对精乌口服液中的制何首乌和黄精(制)进行定性鉴别,并采用高效液相色谱法对其中2,3,5,4’—四羟基二苯乙烯—2—O—β—D—葡萄糖苷含量进行测定。结果:精乌口服液中制何首乌和黄精(制)供试品薄层色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;2,3,5,4’—四羟基二苯乙烯—2—O—β—D—葡萄糖苷进样量在0·0562μg^0·6744μg范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0·9996),平均加样回收率为100·1%(RSD=1·89%)。结论:本方法回收率高、重现性好、简便、快速、准确,可用于本品的质量控制。

RP-HPLC法测定制首乌和人参首乌胶囊中大黄素的含量

目的：建立反相高效液相色谱法测定制首乌和人参首乌胶囊中大黄素的含量。方法：采用SPHERI-SORB ODS2（150mm×4.6mm,5μm）色谱柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸（85∶15）,检测波长为254nm,柱温28℃,流速1.0mL.min-1。结果：大黄素进样量在0.03-0.20μg范围内与峰面积线性关系良好（r=0.9996）,平均回收率制首乌药材为97.5%,RSD为2.6%;人参首乌胶囊为98.0%,RSD=2.3%。结论：方法简便快捷,准确灵敏,重复性好,可用于原药材制首乌及其制剂人参首乌胶囊的质量控制。

制首乌低极性油状物成分分析

采用气相色谱- 质谱法(GC-MS),结合计算机检索及标准图谱对照对制首乌醇浸膏的石油醚溶解部分的油状物进行分析,共分离了33种化合物,鉴定了其中的27种,主要为脂肪酸酯。