Puerariae Radix protects against ulcerative colitis in mice by inhibiting NLRP3 inflammasome activation

Ulcerative colitis(UC)is a common inflammatory disease of the gastrointestinal tract.Traditional Chinese medicine(TCM)has long been used in Asia as a treatment for UC and Puerariae Radix(PR)is a reliable anti-diarrheal therapy.The aims of this study were to investigate the protective effect of PR using the dextran sulfate sodium salt(DSS)-induced UC model in mice and identify molecular mechanisms of PR action.The chemical constituents of PR via ultra-performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry and identified potential PR and UC targets using a network pharmacology(NP)approach were obtained to guide mouse experiments.A total of 180 peaks were identified from PR including 48 flavonoids,46 organic acids,14 amino acids,8 phenols,8 carbohydrates,7 alkaloids,6 coumarins and 43 other constituents.NP results showed that caspase-1 was the most dysregulated of the core genes associated with UC.A PR dose of 0.136 mg/g administered to DSS treated mice reversed weight loss and decreased colon lengths found in UC mice.PR also alleviated intestinal mucosal shedding,inflammatory cell infiltration and mucin loss.PR treatment suppressed upregulation of NOD-like receptor protein 3(NLRP3),cysteinyl aspartate-specific proteases-1(caspase-1),apoptosis-associated speck-like(ASC)and gasdermin D(GSDMD)at both the protein and m RNA expression levels.The addition of a small molecule dual-specificity phosphatase inhibitor NSC 95397 inhibited the positive effects of PR.These results indicated that PR exerts a protective effect on DSS-induced colitis by inhibiting NLRP3 inflammasome activation in mice.

Effects of Radix Puerariae, Radix Rehmanniae and Their Compatibility on Blood Glucose and Blood Lipids in Mice

[Objectives]To explore the effects of the compatibility of Radix Puerariae and Radix Rehmanniae on blood glucose and blood lipids in diabetic mouses.[Methods]Diabetic mouse model was established.The body weight and fasting blood glucose of mice were measured after 7 and 14 d of administration,and the biochemical indicators of blood lipids(TC,HDL-C,and LDL-C)were detected after 14 d of administration.[Results]Compared with the Radix Puerariae group and Radix Rehmanniae group,the compatibility group(1:2)had the best hypoglycemic effect(P<0.05),and TC and LDL-C in the compatibility group(2:1)significantly decreased(P<0.05),while HDL-C in the compatibility group(1:1)significantly increased(P<0.05).[Conclusions]Radix Puerariae,Radix Rehmanniae and their combination can reduce the blood glucose of diabetic mice.The compatibility group(1:2)had a significant hypoglycemic effect(P<0.05),and LDL-C in the compatibility group(2:1)significantly declined,while HDL-C in the compatibility group(1:1)rose significantly.

Optimization of Preparative Separation and Purification of Total Flavonoids from Radix Puerariae by Macroporous Resin Method

Aim To screen the optimum macroporous resin and conditions for the isolation and purification of flavonoids from Radix Puerariae. Methods The static and dynamic adsorption/desorption methods were used, and the separation and purification process was evaluated by measuring the concentration of total flavonoid in the fractions with UV spectrophotometer. Results The SP70 macroporous resin was the most effective compared with other macroporous resins. The optimum conditions were screened, which were 0.5 g· mL^- 1 corresponding to crude drug for concentration of extract, pH 5 - 6, and appended 60 times the volume of the resin bed （BV） with the adsorption speed 2 BV·h^-1, and the volume of aq. 70% （V/V） ethanol as eluant was 5 BV with desorption speed 2 BV·h^-1. By this method, the final contents of total flavonoids exceeded 80%. Conclusion The SP70 macroporous resin is the most effective one for large-scale isolation and purification of flavonoids from Radix Pueraria, which meets industrial needs.

Response surface optimization of microwave-assisted extraction for HPLC-fluorescence determination of puerarin and daidzein in Radix Puerariae thomsonii

Microwave-assisted extraction was optimized with response surface methodology for HPLC-fluorescence determination of puerarin and daidzein in Radix Puerariae thomsonii.The optimized extraction procedure was achieved by soaking the sample with 70% methanol（1∶15,v/v）for 30 min,and then microwave irradiation for 11 min at a power of 600 W.Coupling the extraction process with HPLC-fluorescence presented good recovery,satisfactory precision,and good linear relation.Compared with a method from the Chinese Pharmacopoeia,the proposed method enables higher extraction efficiency and more accurate analytical results.It can be of potential value in quality assessment of Radix Puerariae thomsonii medicinal materials.

RP-HPLC测定不同产地青木香和细辛中马兜铃酸A的含量

目的 :测定不同地区市售青木香、细辛中马兜铃酸A的含量 ,用于指导临床用药和相关研究。方法 :应用高效液相色谱法 ,选用AlltechC18色谱柱 (4.6mm× 2 5 0mm ,5 μm) ,甲醇 水 醋酸 (6 8∶32∶1)为流动相 ,流速为 1.0mL·min-1,柱温为 35℃ ,紫外检测波长为 390nm。结果 :马兜铃酸A在 0 .119～ 1.89μg有良好的线性关系 ,平均加样回收率为 10 1.8% ,RSD为 2 .0 9%。不同产地青木香中马兜铃酸A的含量在 0 .916 9～ 1.90 76mg·g-1,其中以河北安国产青木香的含量较高 (1.90 76mg·g-1) ;细辛中马兜铃酸A的含量在 0～ 35 1g·g-1,其中以吉林市售品含量较高。结论 :本方法精密度高 ,重现性好 ,可用来含马兜铃酸类中药材中马兜铃酸A的含量测定 ;含马兜铃酸的中药中以关木通中马兜铃酸A的含量最高 ,青木香中的含量约为关木通中的含量的 1/3,细辛的含量最低。

23种国产柴胡属植物中柴胡皂苷a、c、d含量的RP-HPLC测定

目的:建立RP-HPLC法,分离和测定中国23种61个产地的柴胡属植物样品中柴胡皂苷a、c、d的含量。方法:采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速1 mL·min～1,检测波长210 nm。结果:不同品种柴胡以及相同品种、不同产地柴胡中的柴胡皂苷a、c、d含量差异悬殊。结论:本研究所建立的HPLC方法适用于柴胡属植物中柴胡皂苷a、c、d定量分析,结果准确可靠。

RP—HPLC法测定7种药用黄芩中黄芩苷和汉黄芩苷的含量

目的:建立测定7种药用黄芩中黄芩苷和汉黄芩苷的反相高效液相色谱法,7种药用黄芩为黄芩,粘毛黄芩,甘肃黄芩,滇黄芩,韧黄芩,川黄芩和丽江黄芩。方法:采用Wakosil;C_(18)柱(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水-冰乙酸(41:59:0.2)和(36:64:0.2)为流动相,流速为1.0mL·min^(-1),检测波长为280nm。应用二极管阵列检测器对峰的纯度进行鉴定。结果:样品中黄芩苷和汉黄芩苷平均回收率分别为98.3％和96.8％,RSD分别为0.48％和1.3％,n=5;黄芩苷在0.08～0.4μg内,r=0.9998,汉黄芩苷在0.04～0.2 μg内,r=0.9995;峰面积与浓度线性关系良好。结论:黄芩苷、汉黄芩苷与其他成分能得到很好的分离,不同品种间2种苷含量差别比较大。

RP-HPLC法测定红芪中两种异黄酮类成分的含量

目的 :建立HPLC法测定中药红芪中毛蕊异黄酮和芒柄花素含量的方法。方法 :采用KromasilC18柱 ,甲醇 水为流动相 (梯度洗脱 ) ,流速为 1 0ml/min ,检测波长 2 5 4nm。结果 :毛蕊异黄酮和芒柄花素的线性范围分别为2 35 0× 10 3 ～ 4 70 0× 10 2 μg、2 32 5× 10 3 ～ 4 6 5 0× 10 2 μg ,平均回收率分别为 98 34%、96 5 3% ,RSD分别为 2 0 0 %、1 6 3%。结论 :该方法简便、可靠、准确 ,具有一定的实用性。

RP-HPLC法测定川牛膝中杯苋甾酮的含量

目的 :首次测定川牛膝中主要成分杯苋甾酮的含量。方法 :采用反相高效液相色谱法。色谱柱YWGC18,流动相为甲醇 -水 (35∶6 5 ) ,流速 1mL·min-1,检测波长 2 43nm。结果 :杯苋甾酮在 0 0 34～ 0 2 7μg范围内线性良好。杯苋甾酮的平均加样回收率为 98 35 % ,RSD为± 1 6 % (n =5 )。结论 :本方法简便、快捷 。

RP-HPLC测定野葛花中3种异黄酮

采用反相高效液相色谱法测定野葛花中3种异黄酮化合物葛花苷、次葛花苷及尼泊尔鸢尾异黄酮.色谱柱为ODS柱,以甲醇-1.0g/L柠檬酸水溶液为流动相,紫外检测波长为265 nm.3种异黄酮化合物线性范围均在0.02～0.2mg/mL,它们的平均回收率分别为99.90%,100.57%和99.80%（n=5）,RSD分别为0.79%,0.60%和0.70%（n=5）.

RP-HPLC法同时测定肾康注射液中5种蒽醌类成分

目的建立一种同时测定肾康注射液(大黄、丹参、红花、黄芪)中5种活性成分即芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚方法。方法采用三氯甲烷萃取和RP-HPLC检测,Stamsil-BP C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.2%的磷酸水梯度洗脱,体积流量为1 mL/min,柱温30℃,检测波长为440 nm。结果芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚分别在2.6～130μg/mL(r=0.999 6)、2.67～53.4μg/mL(r=0.999 1)、3.38～67.6μg/mL(r=0.999 3)、6.16～61.6μg/mL(r=0.999 2)、0.32～5.44μg/mL(r=0.999 3)内具有良好的线性关系,加样回收率分别在101.3%、97.9%、103.7%、96.7%及102.4%。结论本方法操作简单、省时、结果准确,重复性好,适用于肾康注射液的质量控制。

RP-HPLC法同时测定丹参中丹参酮Ⅱ_A和隐丹参酮的含量

目的 研究丹参药材中新的质控指标。方法 采用细胞膜色谱法对丹参中的有效成分进行筛选 ,在此基础上建立 RP-HPLC法同时测定丹参中丹参酮 A和隐丹参酮含量的方法。色谱条件为 L ichrosorb C1 8色谱柱 ,流动相为甲醇 -水 (75∶ 2 5 ) ;2 70 nm下检测 ;流速 1.0 m L/min,室温。药材用甲醇超声处理 ,过滤后直接进样分析。结果丹参酮 A和隐丹参酮的回收率分别为 10 1.74%和 99.2 8% ,RSD分别为 3 .68%和 1.78%。重现性的 RSD分别为 1.88%和 1.3 5 %。所收集的 12份丹参药材中丹参酮 A含量为 0 .60 7%～ 0 .14 8% ,隐丹参酮为 0 .0 73 %～0 .0 2 1%。结论 该方法快速、简便、准确 ,当丹参用于治疗心血管疾病时 ,可以同时将丹参酮

RP-HPLC法测定不同栽培品种粉葛中葛根素、大豆苷和大豆苷元的含量

目的:采用反相高效液相色谱方法测定栽培粉葛中葛根素、大豆苷和大豆苷元含量,为栽培粉葛质量控制提供方法学参考。方法:采用 Diamonsil C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为 A-B 二元体系,A 相为甲醇,B 相为1%醋酸。梯度洗脱程序为:0～13 min,保持25%A;13～15 min,A 线性增至40%;15～30 min,A 线性增至60%;30～40 min,A 线性降至25%,洗脱时间为40 min。流速为1 mL·min^(-1),进样量5μL。柱温为室温,检测波长250 nm。结果:葛根素、大豆苷和大豆苷元分别在0.21～1.89,0.05～0.45,0.065～0.585 μg范围内呈良好线性关系;相关系数 r 分别为0.9997,0.9996,0.9996。其平均回收率在99.6%～100.9%范围内,RSD 均小于2%。在测定的3个样品中,小叶粉葛中葛根素、大豆苷和大豆苷元含量均最高。结论:建立的方法简便、准确,分离效果好,可以用于粉葛质量控制。

RP-HPLC法测定中柴1号及其他产地柴胡中柴胡皂苷a、d的含量

目的 用反相高效液相色谱法测定中药柴胡和“中柴1号”中柴胡皂苷a、d的含量,为柴胡的质量评价提供依据。方法 采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相为甲醇-水(68:32);流速1 mL·min-1;柱温26℃;UV检测波长210 nm;外标法定量。结果 北柴胡中柴胡皂苷a、d的含量较狭叶柴胡高,其栽培新品种“中柴1号”的柴胡皂苷a、d的含量与主产区北柴胡相近或略高,锥叶柴胡中柴胡皂苷d含量较高。结论 本方法操作简便,结果可靠。

RP-HPLC双波长法同时测定熟地黄中4种成分的含量

目的建立RP-HPLC双波长同时测定熟地黄中4种成分含量的方法。方法色谱柱为WatersSunfire C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-体积分数0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长为λ1=210 nm和λ2=330 nm;流速为1.0 mL.min-1;柱温为30℃。结果梓醇、麦角甾苷、吉奥诺苷B1和马替诺皂苷质量浓度分别在125.0～2 000.0 mg.L-1(r=0.999 9)、11.0～176.0mg.L-1(r=0.999 9)、15.0～240.0 mg.L-1(r=0.999 9)和7.5～120.0 mg.L-1(r=0.999 8)内与峰面积呈良好的线性关系。加样回收率在97.5%～101.3%内。结论该方法灵敏,操作简便,结果可靠,可用于熟地黄药材的质量控制。

RPHPLC法同时测定玄参中肉桂酸、哈巴酯苷的含量

耳的建立中药材玄参的RP-HPLC法的质量控制方法。方法采用Diamonsil^TM C18色谱柱（200mm×4．6mm，5μm），流动相为体积分数为1％的乙酸水溶液-甲醇（体积比为49：51），检测波长为280nm，流速为0．90mL·min^-1，柱温为32℃，进样量为10μL，外标法同时测定中药材玄参中的肉桂酸和哈巴酯苷的含量。结果以色谱峰面积（A）对质量浓度（P）作图。肉桂酸和哈巴酯苷回归方程分别为：A=8．577×10^7ρ＋7．533×10^4（r=0．9993）、A=2．510×10^7ρ-2．633×10^4（r=0．9997）；线性范围分别为4．65～37．2mg·L^-1、20．6～164．8mg·L^-1；平均回收率分别为99．6％（RSD=1．4％，n=9）、100．1％（RSD=1．3％，n=9）；平均质量分数分别为3．116×10^-2％（RSD=1．4％，n=3）、0．1678％（RSD=0．77％，n=3）。结论本方法可作为玄参药材的质量控制方法。

RP-HPLC法测定黄芪及玉屏风颗粒中4种异黄酮类成分

目的建立定量测定黄芪饮片及玉屏风颗粒中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素的方法。方法采用RP-HPLC法,Phenomenex Luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱;体积流量1 mL/min;检测波长251 nm。结果毛蕊异黄酮苷在0.132～0.792μg、芒柄花苷在0.066～0.396μg、毛蕊异黄酮在0.07～0.42μg、芒柄花素在0.034～0.204μg范围内分别与峰面积积分值呈良好的线性关系;黄芪饮片各成分平均回收率分别为100.7%(RSD为2.4%)、100.0%(RSD为2.0%)、99.7%(RSD为2.0%)和101.0%(RSD为2.0%)。玉屏风颗粒中4个成分的平均回收率分别为99.8%(RSD为2.2%)、101.2%(RSD为2.1%)、100.6%(RSD为2.1%)和98.4%(RSD为1.9%)。结论黄芪与白术和防风混合煎煮提取,可能提高了黄芪中毛蕊异黄酮苷和芒柄花苷两个成分的溶出率。

RP-HPLC法测定保康北柴胡中柴胡皂苷a、d的含量

目的 采用RP-HPLC法测定保康北柴胡中柴胡皂苷a、d的含量.方法 色谱柱：BonChrom C18柱（4.6 mm×200 mm,5 μm）,流动相：乙腈-水（40∶60）,流速：1.0 mL·min-1,检测波长：204 nm.结果 柴胡皂苷a：Y=7.131 4X＋2.0118,r=0.999 7,线性范围：2.136～21.360 μg;柴胡皂苷d：Y=9.032 3X＋3.739 2,r=0.999 0,线性范围：2.656～26.560 μg.平均回收率：柴胡皂苷a 99.3%（RSD=0.73%）,柴胡皂苷d99.4%（RSD=0.82%）.结论 本法简便快捷,结果准确,重复性好,GAP基地的柴胡皂苷含量较高.

RP-HPLC测定大鼠口服葛根后血浆中大豆苷元的含量

目的:建立准确快速测定大鼠口服葛根后血浆中大豆苷元含量的方法,探讨大豆苷元的体内代谢情况。方法:采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定大鼠口服药物后不同时间血浆中大豆苷元的含量,待测血浆样品采用沉淀蛋白法处理,Phenomenex Luna C18高效液相色谱柱(4.60 mm×250 mm,5μm)进行分析,流动相为甲醇-0.1%甲酸水(60:40v/v)。结果:测定方法稳定,给药后5 min血浆中即可检测出大豆苷元,20 min内达到峰值,高、中、中低、低4种浓度的日内精密度均≤5.7%,日间精密度均≤9.3%,回收率分别为89.5%、93.2%、93.9%、84.8%,在0.1～64μg/mL范围内线性关系良好。结论:此方法快捷、灵敏、简便,用于血浆中大豆苷元的含量测定,取得满意结果。

RP-HPLC分离测定甘葛藤茎叶中葛根素、大豆苷和大豆苷元的含量

目的：建立一种RP-HPLC方法,用于分离测定甘葛藤茎、叶中葛根素、大豆苷和大豆苷元的含量,为甘葛藤茎、叶的开发利用提供依据。方法：采用C18色谱柱,甲醇（A）-1%冰醋酸（B）溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1 mL.min^-1,检测波长250 nm,柱温25℃。结果：3个化合物在测定的范围内具有良好的线性（r〉0.9995）,方法的回收率在99.0%-101.6%。甘葛藤的茎中葛根素、大豆苷和大豆苷元的含量较叶中高。结论：所建立的方法准确、可靠,可作为甘葛藤的茎、叶中葛根素、大豆苷和大豆苷元含量测定的方法。