UPLC和HPLC方法对丹参药材中丹酚酸B含量测定结果的比对

目的:比对超高效液相色谱与高效液相色谱方法测定丹参药材中丹酚酸 B 的含量结果。方法:采用中国药典2005年版(一部)丹参药材含量测定项下有关标准对原高效液相色谱方法进行转换并优化为超高效液相色谱方法。原高效液相色谱方法色潜柱为 Waters X-Bridge^(TM)BEH C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-甲醇-水-甲酸(10:30:59:1),流速:1mL·min^(-1),检测波长:286 nm,柱温:30℃;超高效液相色谱方法色潜柱为 Waters ACQUITY UPLC^(TM)。BEH C_(18)柱(2.1 mm×50mm,1.7μm),流动相:乙腈-甲醇-水-甲酸(8:25:66:1),流速:0.4 mL·min^(-1),检测波长:286 nm,柱温:30℃。结果:2种方法所得含量测定结果一致。结论:超高效液相色谱方法能够替代高效液相色谱分析方法测定丹参药材中丹酚酸 B 含量,既加快了分析速度,达到了样品分析的高通量,减少有机溶剂的使用,又得到更高的分析灵敏度。

丹参水提液絮凝澄清工艺研究

目的:优选丹参提取液絮凝澄清工艺。方法:采用单因素实验法,以澄清处理后的丹参提取液的浊度和指标成分丹酚酸B、丹参素、原儿茶醛含量为考察对象,优选两种絮凝澄清剂的用量和絮凝温度。结果:使用壳聚糖进行絮凝澄清处理后的丹参水提液上清液浊度低于用ZTC1+1Ⅱ型絮凝剂处理后的浊度,并能够更好地减轻膜污染程度。结论:壳聚糖作为丹参水提液絮凝澄剂效果优于ZTC1+1Ⅱ型絮凝剂。

不同产地丹参的HPLC和TLC图谱分析

目的:根据丹参药材的HPLC和TLC图谱,分析比较不同产地丹参成分的异同。方法:采用HPLC和TLC法测定不同产地的丹参成分。结果:不同产地丹参的成分不一,含量不同,其中代表性成分丹参酮ⅡA含量差异较大,山东青岛的丹参酮ⅡA含量最高,是陕西商洛(含量最低)含量的3.5倍。结论:两种方法鉴别特征很显著,且操作简便,重现性好。该测定结果可为临床和科研单位选用丹参提供参考依据。

加热方式对丹酚酸提取物质量的影响

目的研究中药提取时加热方式(温度控制策略)对丹参提取物中活性物质含量的影响。方法比较在3种加热方式下丹参提取物共有色谱峰面积及标记性成分丹酚酸B含量的差异。结果以加热方式1下所得提取物的色谱为基准,加热方式2所得提取物的丹酚酸B含量低21.73%,加热方式3下丹酚酸B含量低55.44%。结论提取时温度波动与控制策略对丹酚酸提取物质量影响很大,在热敏性物质为活性成分的中药提取过程中应当严格控制加热方式。

替代对照品法用于丹参和复方丹参片含量测定的研究

目的:建立HPLC替代对照品法测定丹参和复方丹参片的含量。方法:选取对羟基苯甲酸甲酯作为丹参和复方丹参片含量测定对照品丹酚酸B的替代对照品,在不同的条件下测定替代对照品相对对照品的校正因子,利用校正因子和替代对照品对羟基苯甲酸甲酯进行丹参和复方丹参片中丹酚酸B的含量测定。结果:丹酚酸B和对羟基苯甲酸甲酯进样量分别在0.09～2.71μg(r=1.0000)和0.015～0.45μg(r=1.0000)内与峰面积呈良好的线性关系(n=7),测得校正因子f=5.2884,用替代对照品测定方法测得回收率为100.5%(n=9)。结论:本文首次在高效液相色谱仪上使用替代对照品测定了丹参和复方丹参片中丹酚酸B的含量,结果证明用替代对照品对于丹参和复方丹参片进行药品质量控制是可行的、实用的。

乳疾灵合剂质量标准研究

目的：建立乳疾灵合剂的质量标准。方法：采用薄层色谱法对乳疾灵合剂中白芍、淫羊藿、丹参进行定性鉴别；采用高效液相色谱法测定白芍中主要成分芍药苷的含量。结果：供试品色谱中，在与白芍、淫羊藿、丹参对照药材相应的位置上，分别显相同颜色的斑点；芍药苷检测浓度在80～1280μg／ml范围内与峰面积积分值线性关系良好（r=0．9997），平均回收率为99．4％（RSD=1．8％）。结论：本方法简便、准确，可用于乳疾灵合剂的质量控制。

不同酒制工艺对丹参中丹参酮Ⅱ_A含量的影响

目的:考察不同酒制工艺对丹参中丹参酮Ⅱ_A含量的影响,筛选最佳炮制工艺。方法:取二年生丹参,分为原药材、酒炙品、酒蒸品、酒炖品4组样品,分别用相应方法炮制、提取,采用高效液相色谱法对4组样品中丹参酮Ⅱ_A进行含量测定。结果:丹参酮Ⅱ_A含量:原药材(5.89μg·m^(-1))>酒炖品(4.59μg·m^(-1))>酒蒸品(3.99μg·m^(-1))>酒炙品(3.39μg·m^(-1)),酒炖、酒蒸、酒炙样品中丹参酮Ⅱ_A损失率分别为22.07%、32.26%、42.44%。结论:酒制使丹参在祛除寒性、引药上行同时也使丹参酮Ⅱ_A含量有所降低,酒炖为最佳炮制工艺。

丹参与甲基泼尼松龙联用对急性肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白-1表达的影响

目的:观察联合应用丹参和甲基泼尼松龙对急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织水通道蛋白-1(AQP-1)表达的影响及其机制。方法:使用内毒素(LPS)3mg/kg气管内滴入建立大鼠LPS吸入性ALI模型。50只大鼠随机分为:生理盐水对照组、LPS损伤组、甲基泼尼松龙组(LPS+甲基泼尼松龙)、丹参组(LPS+丹参)、联合用药组(LPS+甲基泼尼松龙+丹参)。观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、肺组织湿/干重(W/D)比、肺脏病理改变,免疫组化法测定AQP-1表达。结果:经气管滴入LPS可致大鼠发生ALI。与LPS损伤组相比,单用甲基泼尼松龙或丹参组BALF中蛋白含量、肺组织W/D比值均明显降低(P<0.01),肺组织AQP-1表达则明显升高(P<0.01),以联合用药组更为明显(P<0.01)。结论:联合应用甲基泼尼松龙和丹参对ALI大鼠具有良好的治疗作用,其机制可能与促进肺组织AQP-1高表达有关。

丹参对幼年大鼠癫痫持续状态学习记忆及海马ChAT、AChE活性的影响

目的：观察丹参（RSM）对幼年大鼠癫痫持续状态（SE）学习记忆及海马胆碱乙酰转移酶（ChAT）和乙酰胆碱酯酶（AChE）活性的影响。方法：戊四氮（PTZ）诱导大鼠SE,丹参（RSM）进行干预,苯巴比妥钠（PB）作为对照,采用Morris水迷宫观察大鼠空间记忆的改变,应用匀浆比色法检测大鼠海马ChAT、AChE活性。结果：Morris水迷宫测试中PTZ组逃避潜伏期延长（P〈0.05）,有效搜索策略百分比降低（P〈0.01）,平台象限游泳时间百分比降低（P〈0.01）,海马ChAT、AChE活性降低（P〈0.01）;RSM组SE后下降的ChAT、AChE活性有所提高,平均潜伏期较PTZ组显著缩短,目标象限停留时间显著高于PTZ组,第1～3天有效搜索策略百分比高于PTZ组,第2～3天高于PB组（P〈0.05）;PB组仅提高AChE活性,PB组平均潜伏期较PTZ组有缩短趋势,但仅第1天有统计学意义,PB组目标象限停留时间显著高于PTZ组。结论：SE可使幼年大鼠学习记忆受损,ChAT、AChE可能参与这一变化的病理生理过程。丹参用药可能通过修复海马胆碱能系统改善幼年大鼠SE学习记忆损伤。

川芎嗪、丹参、丹皮酚和当归对脑缺血后再灌注期脑血流量的影响

目的:研究中药川芎嗪、丹参、丹皮酚和当归对脑缺血后再灌注期脑血流量的影响。方法:利用沙鼠脑缺血后再灌注动物模型;以氢清除法测定脑血流量;药物经腹腔注射。结果:(1)脑缺血后再灌注初期表现为充血反应,再灌注60min 起脑就进入低灌注期,直至再灌注120min。(2)川芎嗪、丹参、丹皮酚和当归均能增加低灌注期脑血流量。结论:川芎嗪、丹参、丹皮酚和当归均能增加低灌注期脑血流量,为缺血后脑组织的恢复提供了条件。

丹参与甲基泼尼松龙联用治疗急性肺损伤的实验研究

目的探讨丹参和甲基泼尼松龙联合应用对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)所致急性肺损伤(acute lunginjury,ALI)大鼠的治疗作用及其机制。方法建立大鼠LPS吸入性ALI模型(LPS3mg/kg气管内注射)。50只大鼠随机分为5组:生理盐水对照组;LPS损伤组;甲基泼尼松龙组(LPS+甲基泼尼松龙);丹参组(LPS+丹参);联合用药组(LPS+甲基泼尼松龙+丹参)。观察支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中蛋白含量、肺脏的大体、光镜下病理改变,以及肺组织湿/干重(W/D)比值,并测定肺组织中一氧化氮(nitric oxide,NO)、丙二醛(malondialde-hyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的变化。结果经气道吸入LPS可致大鼠发生ALI。与LPS损伤组相比,单用甲基泼尼松龙或丹参组BALF中蛋白含量、肺组织W/D比值和MDA、NO水平均明显降低(P<0.05),肺组织SOD、GSH-Px活性则明显升高(P<0.05),以联合用药组更为明显(P<0.01)。结论联合应用甲基泼尼松龙和丹参通过抗氧化作用、调整氧化/抗氧化平衡,对ALI大鼠具有较好的治疗作用。

卡铂联合丹参注射液腹腔化疗对大鼠胃肿瘤细胞凋亡的影响

目的观察中药丹参与卡铂联合应用于胃癌腹腔化疗的疗效。方法利用Walker-256肿瘤细胞株复制成功Wistar大鼠种植性胃肿瘤模型,随机分为对照组(生理盐水组)、卡铂组及丹参+卡铂组,每组20只,于种植成功后1周分别给予生理盐水、卡铂及卡铂+丹参腹腔注射,每日1次,连用5 d。于化疗结束后第7天以颈椎脱位法每组各处死10只,剥离原位肿瘤,测量肿瘤的最大径和最小径,计算肿瘤体积抑制率;将剥离的原位肿瘤以10%中性甲醛固定后24 h内予以常规石蜡包埋后切片,TUNEL法检测细胞凋亡,IMS细胞图像分析系统自动测量凋亡细胞面积及光密度。余下每组10只大鼠,继续相同条件下饲养,观察各组动物的生存时间,并计算出生存时间延长率。结果腹腔化疗结束后1周,给药组肿瘤体积明显缩小,卡铂+丹参组肿瘤体积较卡铂组小;给药组凋亡面积、凋亡强度均增大,卡铂+丹参组肿瘤凋亡面积、凋亡强度较卡铂组明显增大;给药组的中位生存期明显长于对照组,但卡铂组与丹参组的中位生存期无统计学差异。结论卡铂腹腔化疗时联合应用丹参可以增强卡铂诱导肿瘤细胞凋亡的作用以及增加凋亡强度。

丹参对大鼠肺缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的:探讨丹参对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其机制。方法:60只Wistar大鼠随机分为3组:手术对照组(A),缺血再灌注组(B),丹参干预组(C)。每组分别于缺血第45min、再灌注30、60、120min,观察肺组织病理形态变化,检测血浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量,测定肺组织湿/干重(W/D)比值,TUNEL法测定肺组织中细胞凋亡指数(AI)。结果:(1)肺组织病理变化:B组肺组织毛细血管充血、水肿、炎性细胞浸润显著,C组肺组织较B组减轻;(2)血浆MDA、SOD含量:经缺血再灌注后,B和C组血浆MDA较A组均明显增加(P<0.05),B组增加的程度明显高于C组(P<0.05);B和C组血浆SOD较A组同时点均显著下降(P<0.05),C组减少的程度明显小于B组(P<0.05);(3)肺组织W/D比值:经缺血再灌注后,B组和C组的肺组织W/D比值都呈进行性上升(再灌注60,120minvs缺血45min,P<0.05);C组上升幅度明显小于B组(再灌注60,120min时,C组vsB组,P<0.05);(4)肺组织细胞AI的变化:B组及C组缺血再灌注后均可见肺组织细胞凋亡现象,但与B组相比,C组相同时点的肺组织细胞凋亡数显著减少(P<0.05)。结论:丹参对于实验性大鼠肺缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其作用机制与清除氧自由基、抗氧化及抗细胞凋亡有关。

市售9批丹参药材中丹参酮Ⅱ_A和丹酚酸B含量测定

目的比较市售9批丹参药材中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量差异。方法按照2010年版《中华人民共和国药典》要求,采用HPLC测定9批市售丹参药材中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量。结果丹参酮ⅡA含量6号(安徽野生)样品最高,为0.309 3%;8号(山东栽培)样品最低,仅为0.044 7%。丹酚酸B含量9号(山东野生)样品最高,为4.410 0%;2号(四川栽培)样品最低,为3.533 3%。结论目前市场上丹参质量差异很大,建议加强对丹参药材种植的规范化管理。

清肝消痤颗粒定性定量方法研究

目的:建立清肝消痤颗粒(栀子、菌陈、浙贝母、丹参、野菊花)的质量标准。方法:采用薄层色谱法对处方中的栀子、菌陈、浙贝母、丹参进行鉴别;采用HPLC测定制剂中栀子苷的含量。结果:TIC色谱中检出栀子、菌陈、浙贝母、丹参;HPLC含量测定中,栀子苷在0．185～7．38μg之间呈良好的线性关系,r=0．999 9,平均回收率为99．7％,BSD为1．8％(n=6)。结论:所建立的鉴别方法专属性强,定量方法简便、准确,可用于清肝消痤颗粒的质量控制。

丹参主要水溶性成分的代谢产物研究进展

丹参是我国传统医学中的常用药物之一,有悠久的临床应用历史,其化学成分主要分为水溶性成分和脂溶性成分两大部分。药理研究证明,丹参水溶性成分具有抗氧化、清除自由基、抑制血小板功能、改善微循环等作用。近年来,国内外学者对丹参水溶性成分的药动学进行了大量研究,其代谢产物及机制的研究也不断深入。现就丹参素、丹酚酸A、丹酚酸B、原儿茶醛和迷迭香酸等5个主要丹参水溶性成分的代谢产物研究进行综述,为阐明丹参主要水溶性成分的体内药动学性质和药效作用及相关制剂的开发提供参考。

穴位注射治疗高脂血症疗效观察

目的观察丹参注射液穴位注射治疗高脂血症的疗效。方法采用丹参注射液穴位注射曲池、足三里、三阴交、丰隆治疗高脂血症患者29例,与舒降之每晚服用20mg22例进行对照比较。结果两组治疗前后的血脂比较均有明显差异(P<0.01),两组治疗后血脂比较降TC、LDLC无明显差异(P>0.05)。丹参注射液穴位注射治疗混合性高脂血症,低高密度脂蛋白血症明显优于舒降之(P<0.01)。结论丹参注射液穴位注射可有效治疗高脂血症。

丹参制剂治疗银屑病的系统评价

目的系统评价丹参制剂治疗银屑病的临床疗效。方法计算机检索MEDLINE(1966—2011.9)、EMbase(1984—2011.9)、Cochrane临床对照试验资料库(2011年第4期)和中国知识资源总库CNK(I1979—2011.9),同时手工检索所有纳入试验的参考文献,评价纳入研究的方法学质量,并提取有效数据用RevMan 5.1.4软件进行Meta分析。结果共纳入3个随机对照试验,包括320例患者。Meta分析结果显示:丹参制剂组与西药抗生素组的有效率差异无统计学意义(P>0.000 1)。3个研究报告了丹参制剂及西药抗生素治疗银屑病的不良反应,其中西药抗生素组与丹参制剂组引起皮肤瘙痒、口干、腹胀及等不良反应差异无统计学意义(P>0.0001)。西药抗生素组出现肝功能异常。结论当前的有限证据表明,丹参制剂组的有效率与西药抗生素组相似。不良反应发生率丹参制剂组比较西药抗菌素差异无统计学意义。由于纳入研究样本量小且质量较低,上述结论尚需要高质量、大样本的随机双盲对照试验加以证实。

丹参对幼年大鼠应激性溃疡预防作用的实验研究

目的应激性溃疡作为重症患儿病情加重或恶化的标志之一,应引起临床高度重视。儿科药物剂量因其特点与成人不尽相同,不宜直接套用成人防治应激性溃疡的方案,且有关用药的利弊、与医源性肺炎的关系及夜间酸突破现象的治疗等都存在很多分歧,有待于进一步探讨和研究。该试验旨在观察复方丹参对幼年大鼠应激性溃疡(SU)的黏膜损伤有无预防作用。方法将30只幼年大鼠随机分成5组,即对照组、实验组,实验组据应激前腹腔注射用药分为以下4组:生理盐水2 mL(Ⅰ组)、丹参2次组(Ⅱ组)、丹参4次组(Ⅲ组)、丹参6次组(Ⅳ组),采用束缚-水浸法制作应激性溃疡动物模型,对照组与实验各组应激时间均为3 h,观察各组病理形态学变化及检测各组胃黏膜溃疡指数(UI)。结果对照组、Ⅰ组胃黏膜溃疡指数分别为57.75±5.71,55.63±7.52,两者之间差异无显著性。Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ组胃黏膜溃疡指数逐渐降低,Ⅳ组最低,为12.12±3.62,其中Ⅲ和Ⅳ组与对照组相比,差异有非常显著性(P<0.01)。丹参可明显减轻损伤模型中的UI。结论丹参对应激性溃疡具有预防作用,其机制尚需继续探讨。

多指标综合评分法优选丹参炮制工艺

目的:用多指标综合评分法优选丹参炮制工艺,探讨不同炮制方法对丹参中各成分的影响,以期得到酒炙丹参的最佳炮制工艺。方法:按《中国药典》法,紫外分光光度法,高效液相色谱法,测定各炮制品的水浸出物、醇浸出物、总丹参酮和丹参酮ⅡA的含量,并采用正交试验设计多指标测试,综合评分优选炮制工艺条件。结果:经测定数据分析,筛选出酒炙丹参的最佳炮制工艺条件为加酒量20%质量分数,加热温度160℃,炒5min。结论:用综合评分法优选出的炮制工艺能较好地保证炮制品的质量。