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连翘脂素调节Ras/Raf/MEK/ERK信号通路对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响
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作者 郑声友 李叶若 肖嘉伍 《河北医药》 CAS 2024年第12期1771-1776,共6页
目的 探究连翘脂素(PG)对结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡以及上皮间质转化的影响及机制。方法 培养HCT116结直肠癌细胞,采用10~200μmol/L的连翘脂素处理细胞,检测细胞存活率,筛选最佳实验浓度。将细胞分为对照组(Control组),连翘... 目的 探究连翘脂素(PG)对结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡以及上皮间质转化的影响及机制。方法 培养HCT116结直肠癌细胞,采用10~200μmol/L的连翘脂素处理细胞,检测细胞存活率,筛选最佳实验浓度。将细胞分为对照组(Control组),连翘脂素低、中、高浓度组(PG-L组、PG-M组、PG-H组),连翘脂素高浓度+转染慢病毒阴性对照组(PG-H+NC组),连翘脂素高浓度+Ras慢病毒组(PG-H+Ras组)。平板克隆形成实验检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移;Transwell小室法检测细胞侵袭;流式细胞术以及Hoechst33258染色法检测细胞凋亡;Western blot法检测上皮间质转化(EMT)标志蛋白E型钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)以及信号通路相关蛋白p-Raf、p-MEK、p-ERK表达;建立荷瘤小鼠模型评价连翘脂素对结直肠癌肿瘤生长的影响。结果 10~200μmol/L的连翘脂素处理HCT116结直肠癌细胞,可以显著抑制细胞存活率,经计算IC50值为(140.4±2.147)μmol/L,选择10、50、100μmol/L连翘脂素进行后续实验;与Control组比较,PG-L组、PG-M组、PG-H组HCT116细胞克隆形成率、划痕愈合率、细胞侵袭个数以及Vimentin、p-Raf、p-MEK、p-ERK表达显著降低,细胞凋亡率以及E-cadherin表达显著升高,且呈浓度依赖性(P<0.05);与PG-H+NC组比较,PG-H+Ras组HCT116细胞克隆形成率、划痕愈合率、细胞侵袭个数以及Vimentin、p-Raf、p-MEK、p-ERK表达显著升高,细胞凋亡率以及E-cadherin表达显著降低(P<0.05);连翘脂素可以显著抑制结直肠癌移植瘤的生长。结论 连翘脂素可以抑制结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡以及上皮间质转化,其作用机制可能与抑制Ras/Raf/MEK/ERK信号通路激活有关。 展开更多
关键词 连翘脂素 Ras/raf/mek/erk信号通路 结直肠癌 上皮间质转化 增殖 凋亡
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基于Raf-MEK-ERK信号通路探究梓醇对蛛网膜下腔出血大鼠脑组织损伤的影响
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作者 孟艳举 王路 +1 位作者 王献清 郝志勇 《天津中医药》 CAS 2023年第8期1059-1064,共6页
[目的]通过考察梓醇对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠脑组织丝/苏氨酸蛋白激酶(Raf)-丝裂原活化蛋白激酶(MEK)-细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的影响,探讨其抗SAH脑损伤的作用机制。[方法]将大鼠随机分为假手术组、SAH组、梓醇组、梓醇+U012... [目的]通过考察梓醇对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠脑组织丝/苏氨酸蛋白激酶(Raf)-丝裂原活化蛋白激酶(MEK)-细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路的影响,探讨其抗SAH脑损伤的作用机制。[方法]将大鼠随机分为假手术组、SAH组、梓醇组、梓醇+U0126组(梓醇+Raf-MEK-ERK信号通路抑制剂U0126)。采用血管内穿孔法构建大鼠SAH模型,评估大鼠神经功能和SAH分级,伊文思蓝(EB)检测血脑屏障通透性,苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织病理变化,免疫荧光染色检测神经元细胞凋亡及微管连接蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、p-ERK阳性细胞表达,蛋白免疫印迹(Western blot)检测脑组织Raf、MEK、磷酸化(p)-MEK、ERK1/2、p-ERK1/2、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、自噬基因Beclin-1、LC3-Ⅱ表达。[结果]与假手术组相比,SAH组神经元细胞排列松散,数目减少,SAH分级、脑组织含水量、EB渗出量、原位末端标(TUNEL)阳性细胞数显著增加,凋亡率、LC3-Ⅱ、p-ERK阳性表达、Bax、Beclin-1、LC3-Ⅱ、Raf、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2表达显著升高,神经功能评分减少,Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);与SAH组相比,梓醇组神经元损伤明显减轻,细胞死亡较少,SAH分级、脑组织含水量、EB渗出量、TUNEL阳性细胞数显著减少,凋亡率、Bax显著降低,神经功能评分、Bcl-2表达升高,LC3-Ⅱ、p-ERK阳性表达及Beclin-1、LC3-Ⅱ、Raf、p-MEK/MEK、p-ERK1/2/ERK1/2表达进一步升高(P<0.05);Raf-MEK-ERK通路抑制剂U0126可逆转梓醇对脑组织损伤的改善作用(P<0.05)。[结论]梓醇可能通过激活Raf-MEK-ERK信号通路,促进神经细胞自噬,改善SAH大鼠脑损伤。 展开更多
关键词 梓醇 蛛网膜下腔出血 脑组织损伤 raf-mek-erk信号通路
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MEK/ERK signaling pathway in apoptosis of SW620 cell line and inhibition effect of resveratrol 被引量:4
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作者 Hao Chen Zhi-Liang Jin Hai Xu 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2016年第1期46-50,共5页
Objective:To study the involvement of MAPK MEK/ERK signaling transduction pathway in the apoptosis process of SW620 tumor cell line and the inhibition effect of resveratrol.Methods:SW620 cell lines were divided into 5... Objective:To study the involvement of MAPK MEK/ERK signaling transduction pathway in the apoptosis process of SW620 tumor cell line and the inhibition effect of resveratrol.Methods:SW620 cell lines were divided into 5 groups,namely,control group.PD98059 group,low-dose resveratrol group,mid-dose resveratrol group and high-dose resveratrol group.The inhibition rate of cell proliferation was detected by MTT method.The expression of apoptotic molecules and MEK/ERK signaling pathway related proteins were assayed by realtime PCR and Western blotting.Results:Compared with control group,the proliferation of cells treated with resveratrol was significantly inhibited.In the case of apoptotic molecules,the expression of Bax,Caspase 3 and Caspase 9 was increased significantly while the expression of anti-apoptotic molecule Bcl2 was decreased significantly in resveratrol groups with a dosedependent manner.In the case of molecules in MEK/ERK signaling pathway,the expression of Ras,Raf,MEK and ERKl/2 was decreased significantly in resveratrol groups with a dose-dependent manner.Conclusions:PD98059 and resveratrol can effectively inhibit the proliferation of SW620 through inhibiting the MEK/ERK signaling pathway. 展开更多
关键词 COLON cancer APOPTOSIS mek/erk signaling pathway RESVERATROL Inhibition of proliferation
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基于Raf/MEK/ERK信号通路探讨黄芪建中汤治疗大鼠脾胃虚寒型十二指肠溃疡的作用机制 被引量:11
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作者 宋厚盼 陈小娟 +5 位作者 曾梅艳 陈新怡 杨焘 刘涛 吴海滨 仇婧玥 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1093-1100,共8页
目的探讨黄芪建中汤通过Raf/MEK/ERK信号通路治疗大鼠脾胃虚寒型十二指肠溃疡(DU)的作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、埃索美拉唑组(4.17 mg·kg^(-1))以及黄芪建中汤高、低剂量组(18.54、9.27 g·kg^(-... 目的探讨黄芪建中汤通过Raf/MEK/ERK信号通路治疗大鼠脾胃虚寒型十二指肠溃疡(DU)的作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、埃索美拉唑组(4.17 mg·kg^(-1))以及黄芪建中汤高、低剂量组(18.54、9.27 g·kg^(-1))。采用“苦寒泻下+劳倦过度”法联合阿司匹林、无水乙醇构建脾胃虚寒型DU大鼠模型。灌胃给药,每天1次,连续4 d。观察大鼠十二指肠黏膜损伤情况并计算溃疡指数和治疗指数;采用HE染色法观察十二指肠黏膜组织病理形态学改变;采用酶联免疫吸附试验检测十二指肠组织中前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;免疫荧光法检测十二指肠黏膜磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Raf)、磷酸化有丝分裂原活化蛋白激酶激酶1/2(p-MEK1/2)、磷酸化细胞外信号调节激酶1(p-ERK1)蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠的十二指肠溃疡指数显著升高(P<0.01);小肠绒毛脱落,隐窝脓肿,小肠绒毛长度和隐窝深度均显著降低(P<0.01);肠黏膜PGE2、IL-10含量均明显降低(P<0.01),TNF-α含量显著增加(P<0.01);肠黏膜p-Raf、p-MEK1/2和p-ERK1蛋白表达量均明显增加(P<0.01)。与模型组比较,黄芪建中汤各剂量组的大鼠十二指肠溃疡指数均明显降低(P<0.01);肠黏膜损伤得到明显改善,黏膜形态趋于完整,小肠绒毛长度和隐窝深度均明显增加(P<0.01);肠黏膜PGE2和IL-10含量均明显提高(P<0.01),TNF-α含量显著降低(P<0.01);肠黏膜p-Raf、p-MEK1/2和p-ERK1蛋白表达均显著下调(P<0.01)。结论黄芪建中汤对脾胃虚寒型DU大鼠具有治疗作用,其机制可能与调控PGE2、TNF-α、IL-10等炎症介质水平,抑制Raf/MEK/ERK信号通路活化有关。 展开更多
关键词 黄芪建中汤 十二指肠溃疡 脾胃虚寒证 细胞外信号调节激酶 raf/mek/erk信号通路 大鼠
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异槲皮苷对HepG2细胞中Raf/MEK/ERK信号通路的干预作用 被引量:9
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作者 蒋国君 刘天旭 +3 位作者 黄桂红 巫亭 陶丽群 朱钊铭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1382-1387,共6页
目的研究异槲皮苷对Hep G2细胞中Raf/MEK/ERK信号通路的干预作用。方法采用异槲皮苷(0、40、80、160、320μmol·L^(-1))作用于Hep G2细胞,MTT法检测异槲皮苷对Hep G2细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察24、48 h后,细胞形态及生长情况... 目的研究异槲皮苷对Hep G2细胞中Raf/MEK/ERK信号通路的干预作用。方法采用异槲皮苷(0、40、80、160、320μmol·L^(-1))作用于Hep G2细胞,MTT法检测异槲皮苷对Hep G2细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察24、48 h后,细胞形态及生长情况;流式细胞术检测异槲皮苷(0、40、80、160μmol·L^(-1))作用Hep G2细胞48 h后细胞周期情况;荧光定量PCR及Western blot检测异槲皮苷作用Hep G2细胞后Ras、Raf、MEK、ERK mRNA及相关蛋白的表达。结果MTT检测发现异槲皮苷对Hep G2细胞生长有明显抑制作用,且与异槲皮苷的浓度及作用时间呈正相关;不同浓度的异槲皮苷作用Hep G2细胞24、48 h后,倒置显微镜下观察发现随着浓度的增高及作用时间的延长,细胞生存数量逐渐减少,且细胞形态发生明显变化;流式细胞术检测发现随着异槲皮苷浓度的增高,细胞被阻滞在G1期的数量逐渐增加;荧光定量PCR及Western blot结果均表明,与空白组相比,异槲皮苷(80μmol·L^(-1))作用Hep G2细胞后Ras、Raf、MEK、ERK mRNA及其相关蛋白的表达均明显降低(P<0.05),差异有统计学意义。结论异槲皮苷有诱导Hep G2细胞凋亡的作用,其作用机制可能与对Raf/MEK/ERK信号通路中相关因子的干预有关。 展开更多
关键词 异槲皮苷 诱导 HEP G2细胞 raf/mek/erk 信号通路 凋亡
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大鼠增殖抑制基因通过Ras-Raf-MEK-ERK信号通路抑制C6胶质瘤细胞增殖 被引量:2
6
作者 蒋树财 邹有瑞 +5 位作者 高鹏 郭晖 霍国进 王军成 赵巍 沈冰 《中风与神经疾病杂志》 CAS 北大核心 2015年第10期884-888,共5页
目的探讨Ras-Raf-MEK-ERK通路在大鼠增殖抑制基因(r HSG)抑制C6大鼠胶质瘤细胞增殖中的作用。方法用r HSG过表达腺病毒载体(Adv-r HSG-GFP)转染C6细胞后,流式细胞仪分析腺病毒转染效率;Western blot检测r HSG蛋白表达变化;流式细胞仪分... 目的探讨Ras-Raf-MEK-ERK通路在大鼠增殖抑制基因(r HSG)抑制C6大鼠胶质瘤细胞增殖中的作用。方法用r HSG过表达腺病毒载体(Adv-r HSG-GFP)转染C6细胞后,流式细胞仪分析腺病毒转染效率;Western blot检测r HSG蛋白表达变化;流式细胞仪分析细胞周期;qRT-PCR检测H-ras、N-ras、K-ras、Erk1、Erk2基因mRNA表达变化;Western blot检测H-ras、N-ras、K-ras、p-Erk1/2、Erk1/2、p-Rb、Rb蛋白表达变化。结果腺病毒载体能高效的转染C6细胞并表达GFP蛋白,Adv-r HSG-GFP组r HSG蛋白表达显著高于未转染组(PBS)和AdvGFP组,C6细胞被阻滞于G0/G1期(P<0.01);经IGF-1刺激后,Adv-r HSG-GFP组细胞H-ras、N-ras、K-ras、Erk1、Erk2基因的mRNA和蛋白表达水平与PBS组和Adv-GFP组无明显差异(P>0.05);Adv-r HSG-GFP组细胞过表达r HSG能显著抑制IGF-1诱导的Erk1/2的活化,p-Erk1/2蛋白表达量显著低于其余两组(P<0.01);同时其p-Rb蛋白的表达量显著低于其余两组(P<0.01),而Rb蛋白表达量3组无明显差异(P>0.05)。结论 r HSG可能通过抑制Ras-Raf-MEK-ERK信号通路的激活抗C6恶性胶质瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 大鼠增殖抑制基因 rHSG Ras-raf-mek-erk信号通路 RAS erk1/2 胶质瘤
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抑制Raf-MEK-ERK信号传导途径上调食管癌细胞株EC9706柯萨奇-腺病毒受体的表达
7
作者 刘霞 冯婷 +5 位作者 赵继敏 李沛 黄幼田 杨洪艳 赵明耀 董子明 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第19期2567-2569,F0002,共4页
目的研究Raf-MEK-ERK信号传导途径对食管癌EC9706细胞柯萨奇-腺病毒受体(CAR)表达的影响。方法用ERK抑制剂PD9805910、20、40μmol/L作用EC9706细胞24h,利用免疫荧光和RT-PCR、Western-blot检测各种浓度处理前、后CAR表达水平的变化。... 目的研究Raf-MEK-ERK信号传导途径对食管癌EC9706细胞柯萨奇-腺病毒受体(CAR)表达的影响。方法用ERK抑制剂PD9805910、20、40μmol/L作用EC9706细胞24h,利用免疫荧光和RT-PCR、Western-blot检测各种浓度处理前、后CAR表达水平的变化。结果与对照组比较,10μmol/L PD98059组CAR表达水平差异无统计学意义;20、40μmol/L PD98059处理组CAR表达水平显著提高(P<0.05),且呈浓度依赖性。结论用一定浓度的抑制剂抑制Raf-MEK-ERK信号传导途径可上调食管癌EC9706细胞膜表面CAR的表达。 展开更多
关键词 食管癌细胞 柯萨奇-腺病毒受体 raf-mek-erk 信号传导途径
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眼针对脑缺血再灌注大鼠半暗带脑组织中Raf/MEK/Erk通路调控机制的实验研究 被引量:6
8
作者 赵阳阳 张威 王哲 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2022年第8期71-75,I0029,I0030,共7页
目的 观察眼针疗法对脑缺血再灌注(CIRI)大鼠半暗带脑组织中细胞凋亡和Bcl-2蛋白表达水平的影响,同时检测眼针对CIRI大鼠半暗带脑组织中Raf、p-MEK1/2、p-Erk1/2、p-p90RSK、p-CREB表达的影响,探讨眼针抑制CIRI大鼠半暗带脑神经元凋亡... 目的 观察眼针疗法对脑缺血再灌注(CIRI)大鼠半暗带脑组织中细胞凋亡和Bcl-2蛋白表达水平的影响,同时检测眼针对CIRI大鼠半暗带脑组织中Raf、p-MEK1/2、p-Erk1/2、p-p90RSK、p-CREB表达的影响,探讨眼针抑制CIRI大鼠半暗带脑神经元凋亡的作用机制。方法 SPF级SD大鼠60只,首先分为两组:假手术组(15只),造模组(45只),采用线栓法对造模组45只大鼠制备CIRI模型,模型评价后,将模型复制成功的大鼠随机分为3组:模型对照组、眼针组、穴区外对照组。模型复制后即刻开始进行干预:假手术组不做处理;模型对照组大鼠进行捆绑固定,但不进行针刺干预;眼针组大鼠分别在眼周肝胆区、肾膀胱区、上焦区、下焦区进行针刺干预;穴区外对照组大鼠分别在眼周相应穴区外的2 mm处进行针刺干预,连续干预1周。末次针刺后1 h,采用Zea Longa法评价各组大鼠神经功能缺损评分。然后过量麻醉法处死大鼠,每组大鼠随机选取6只,取全脑,4%多聚甲醛溶液固定;剩余大鼠,取全脑,并分离半暗带脑组织,冻存于-80℃冰箱,备用。采用免疫印迹(Western blot)法检测各组大鼠半暗带脑组织中Bcl-2、Raf、p-MEK1/2、p-Erk1/2、p-p90RSK、p-CREB的表达水平;采用TUNEL法及免疫组织化学法检测各组大鼠半暗带脑脑组织中细胞凋亡及Bcl-2表达的水平。结果 与假手术组比较,模型对照组、眼针组、穴区外对照组大鼠神经功能缺损评分及半暗带脑组织中细胞凋亡数、Raf、p-MEK1/2、p-Erk1/2、p-p90RSK、p-CREB蛋白表达水平显著升高(P<0.01),半暗带脑组织中bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与模型对照组比较,眼针组大鼠神经功能缺损评分及半暗带脑组织中细胞凋亡数、Raf、p-MEK1/2、p-Erk1/2、p-p90RSK、p-CREB蛋白表达水平显著降低(P<0.01),半暗带脑组织中Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.01);模型对照组与穴区外对照组大鼠神经功能缺损评分、细胞凋亡数、Bcl-2、Raf、p-MEK1/2、p-Erk1/2、p-p90RSK、p-CREB表达水平差异均无统计学意义。结论 眼针疗法能够改善CIRI大鼠神经功能缺损评分,减少CIRI大鼠半暗带脑组织细胞凋亡的发生,该作用可能是通过抑制Raf/MEK/Erk信号通路,上调Bcl-2蛋白的表达而实现的。 展开更多
关键词 眼针 脑缺血再灌注 凋亡 raf/mek/erk信号通路
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RAF/MEK/ERK信号通路在胰腺癌发生发展中的作用机制及其临床应用价值 被引量:2
9
作者 郭鑫 任思谦 +3 位作者 阿卜杜·海拜尔·萨杜拉 袁蒙 叶辰 原春辉 《腹部外科》 2020年第5期387-390,共4页
丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的激活在多种肿瘤发生发展过程中起着重要作用。在胰腺癌中,受体酪氨酸激酶的异常活化可以激活MAPK信号通路,在MAPK家族中,细胞外信号调节激酶(RAF/MEK/ERK)信号通路是其中最重要的信号通路,活化的RAF/... 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的激活在多种肿瘤发生发展过程中起着重要作用。在胰腺癌中,受体酪氨酸激酶的异常活化可以激活MAPK信号通路,在MAPK家族中,细胞外信号调节激酶(RAF/MEK/ERK)信号通路是其中最重要的信号通路,活化的RAF/MEK/ERK信号通路能够传递细胞外信号调节肿瘤的增殖、凋亡、侵袭转移和血管生成。因此,RAF/MEK/ERK信号通路被认为是胰腺癌治疗的潜在治疗靶点。该文重点综述了RAF/MEK/ERK信号通路的异常活化在胰腺癌发生发展中的生物学作用,靶向抑制剂的研发及其在临床应用中存在问题和挑战。 展开更多
关键词 raf/mek/erk信号通路 胰腺癌 机制 应用价值
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Ras/Raf/MEK/ERK信号通路与白血病 被引量:11
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作者 刘静 吕娜 +1 位作者 李永辉 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期947-951,共5页
Ras/Raf/MEK/ERK信号通路对白血病的发生和发展具有不可忽视的作用。在该通路中关键信号元件的抑制剂的应用成为白血病治疗的新策略。近年来,对这些抑制剂的筛选和体内外研究成为治疗领域的热点,国内外已开展的体内外实验及早期临床研究... Ras/Raf/MEK/ERK信号通路对白血病的发生和发展具有不可忽视的作用。在该通路中关键信号元件的抑制剂的应用成为白血病治疗的新策略。近年来,对这些抑制剂的筛选和体内外研究成为治疗领域的热点,国内外已开展的体内外实验及早期临床研究,证实了这些抑制剂在白血病治疗中具有较好的效果及应用前景。本综述重点介绍Ras/Raf/MEK/ERK信号通路在白血病发生发展中的作用及其治疗方面的最新研究进展。 展开更多
关键词 Ras/raf/mek/erk信号通路 白血病 抑制剂
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Effect of Guizhi Fuling Pill combined with GnRH analog on cell proliferation and invasion as well as MEK/ERK pathway in endometriosis lesions
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作者 Li-Qiong Chen 《Journal of Hainan Medical University》 2017年第19期93-96,共4页
Objective: To study the effect of Guizhi Fuling Pill combined with gonadotropin-releasing hormone analog (GnRH-a) on cell proliferation and invasion as well as MEK/ERK pathway in endometriosis lesions. Methods: Patien... Objective: To study the effect of Guizhi Fuling Pill combined with gonadotropin-releasing hormone analog (GnRH-a) on cell proliferation and invasion as well as MEK/ERK pathway in endometriosis lesions. Methods: Patients who were diagnosed with endometriosis in Bazhong Hospital of Traditional Chinese Medicine between November 2014 and March 2017 were selected as the research subjects and randomly divided into two groups, observation group received preoperative Guizhi Fuling Pill combined with GnRH analog therapy, and control group received preoperative GnRH analog monotherapy. After surgical resection, the endometriosis lesion was collected to determine the mRNA expression of proliferation and invasion-related genes as well as the protein expression of MEK/ERK pathway molecules. Results: Id-1, Sema3A, c-IAP1, OPN and uPA mRNA expression as well as p-MEK, p-EKR1/2, caspase-3 and MMP2 protein expression in endometriosis lesion of observation group were significantly lower than those of control group while Bak, Smac, PAI-1, TIMP1 and TIMP2 mRNA expression as well as caspase-3 protein expression were significantly higher than those of control group. Conclusion: Guizhi Fuling Pill combined with GnRH analog can inhibit the cell proliferation and invasion as well as the MEK/ERK pathway activation in endometriosis lesions. 展开更多
关键词 ENDOMETRIOSIS Gonadotropin-releasing hormone analog CELL proliferation CELL INVASION mek/erk signaling pathway
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基于RAS/RAF/MEK/ERK信号通路探讨黑逍遥散干预AD模型大鼠氧化应激的作用机制 被引量:3
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作者 王虎平 吕育洁 +3 位作者 胡韵韵 孟志鹏 杨娇 陈怡琴 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第17期35-42,共8页
目的:探讨黑逍遥散调控RAS蛋白(RAS)/RAF激酶(RAF)/有丝分裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路干预阿尔茨海默病(AD)大鼠氧化应激的作用及其机制。方法:4月龄SPF级Wistar雄性大鼠100只,随机选取10只作为空白组,1... 目的:探讨黑逍遥散调控RAS蛋白(RAS)/RAF激酶(RAF)/有丝分裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路干预阿尔茨海默病(AD)大鼠氧化应激的作用及其机制。方法:4月龄SPF级Wistar雄性大鼠100只,随机选取10只作为空白组,10只作为假手术组(双侧海马注射生理盐水1μL),其余80只双侧海马注射β淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))溶液1μL复制AD模型。遴选造模合格大鼠50只,随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组(0.5 mg·kg^(-1))及黑逍遥散高、中、低剂量组(15.30、7.65、3.82 g·kg^(-1))。连续灌胃42 d,每天1次。灌胃结束后,Morris水迷宫实验测试大鼠学习记忆能力,尼式染色法检测海马CA3区神经元病理结构改变,免疫荧光观察Aβ沉积和tau蛋白磷酸化水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织RAS、RAF、磷酸化(p)-RAF、MEK、p-MEK、ERK、p-ERK蛋白表达,生化法检测海马组织活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠第5天逃避潜伏期显著延长(P<0.01),目标象限游泳距离显著缩短(P<0.01),尼氏小体数量减少,染色不均;Aβ、p-tau荧光强度显著增强(P<0.01),海马组织中RAS、p-RAF、p-MEK、p-ERK蛋白表达显著增高(P<0.01),ROS和MDA含量显著增高(P<0.01),SOD活性显著降低(P<0.01);与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和黑逍遥散高、中、低剂量组大鼠第5天逃避潜伏期显著缩短(P<0.01),目标象限游泳距离显著增加(P<0.01);尼氏染色显示神经元排列整齐,细胞形态、结构完整,尼氏小体清晰可见,盐酸多奈哌齐组和黑逍遥散高、中、低剂量组Aβ、p-tau荧光强度显著下调(P<0.01),RAS、p-RAF、p-MEK、p-ERK蛋白表达明显增高(P<0.05,P<0.01),ROS、MDA含量显著降低(P<0.01),SOD活性显著增高(P<0.01)。结论:黑逍遥散可能通过RAS/RAF/MEK/ERK信号通路干预氧化应激,降低Aβ和p-tau水平,抑制海马神经元损伤,从而改善学习记忆能力。 展开更多
关键词 黑逍遥散 阿尔茨海默病 RAS蛋白(RAS)/raf激酶(raf)/有丝分裂原活化蛋白激酶激酶(mek)/细胞外信号调节激酶(erk)信号通路 氧化应激
原文传递
FTH1激活RAF/MEK/ERK通路促进肝细胞癌生长
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作者 汪圆松 李卫玲 +7 位作者 乔嘉璐 刘金咪 王海萍 侯晓莹 彭倩 孙宾莲 胡康洪 刘钰晨 《生物技术》 CAS 2024年第4期467-474,共8页
[目的]应用生物信息学和分子生物学手段研究铁蛋白重链1(Ferritin heavy chain 1,FTH1)在肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)中的功能和分子机制。[方法]通过TCGA(The Cancer Genome Atlas)、TIMER(Tumor Immune Estimation Resou... [目的]应用生物信息学和分子生物学手段研究铁蛋白重链1(Ferritin heavy chain 1,FTH1)在肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)中的功能和分子机制。[方法]通过TCGA(The Cancer Genome Atlas)、TIMER(Tumor Immune Estimation Resource)、TNMplot和GEPIA2(Gene Expression Omnibus)等公开数据库的数据进行分析FTH1在肝癌中的表达量和预后生存期,同时应用分子生物学实验在肝癌细胞系中分析FTH1的作用机制。[结果]在肝癌组织中FTH1的表达量高于正常(P<0.01),同时FTH1高表达的HCC患者预后更差(P<0.01)。蛋白免疫印迹分析和荧光定量PCR细胞实验表明,与正常肝细胞L02相比,肝癌细胞系HepG2和Huh7中FTH1的mRNA及蛋白水平明显升高(P<0.01)。MTT和细胞克隆形成实验结果表明FTH1敲低的HepG2和Huh7细胞增殖能力降低40%~50%。进一步蛋白免疫印迹结果显示FTH1敲低的细胞中RAF、MEK和ERK的磷酸化水平明显降低(P<0.05)。[结论] FTH1可通过激活RAF/MEK/ERK信号通路促进HCC细胞的生长。 展开更多
关键词 肝细胞癌 FTH1 增殖 预后生存 raf/mek/erk信号通路
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PLX8394,a RAF inhibitor,inhibits enterovirus 71 replication by blocking RAF/MEK/ERK signaling
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作者 Chengyuan Wu Guangyan Zhu +5 位作者 Fang Qiu Fuli Ren Binbin Lin Dingyu Zhang Qingyu Yang Chaolin Huang 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2023年第2期276-284,共9页
Enterovirus 71(EV71)poses a serious threat to human health,with scattered outbreaks worldwide.There are several vaccines against a few EV71 strains but no efficient drug for the treatment of EV71 infection.Therefore,i... Enterovirus 71(EV71)poses a serious threat to human health,with scattered outbreaks worldwide.There are several vaccines against a few EV71 strains but no efficient drug for the treatment of EV71 infection.Therefore,it is urgent and of significance to develop anti-EV71 drugs.Here,we found that PLX8394,a RAF inhibitor,possesses high antiviral activity against EV71 in vitro,being superior to the traditional clinical drug ribavirin.Moreover,PLX8394 exhibits broad-spectrum antiviral activity against enteroviruses.Notably,in a suckling mouse model,PLX8394 provided a 70%protection rate for EV71-infected mice,reduced the viral load in liver and heart tissues,and relieved the inflammatory response.A mechanistic study showed that PLX8394 inhibited EV71 by suppressing the RAF/MEK/ERK signaling pathway.Thus,PLX8394 lays a foundation for the development of new drugs against EV71. 展开更多
关键词 Enterovirus 71(EV71) raf inhibitor Hand foot and mouth disease(HFMD) raf/mek/erk signaling pathway Antiviral agents
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电针对骶上脊髓损伤后逼尿肌反射亢进型大鼠尿流动力学及脊髓Raf/MEK/ERK信号通路的影响 被引量:2
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作者 许明 艾坤 +6 位作者 邓石峰 刘琼 展立芬 陈晓雯 李亚 匡静之 张泓 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期977-985,共9页
目的:观察电针对骶上脊髓损伤(SSCI)后逼尿肌反射亢进型大鼠尿流动力学及脊髓组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Raf)与丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路的影响,探讨电针改善SSCI后逼尿肌反射亢... 目的:观察电针对骶上脊髓损伤(SSCI)后逼尿肌反射亢进型大鼠尿流动力学及脊髓组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Raf)与丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路的影响,探讨电针改善SSCI后逼尿肌反射亢进型大鼠膀胱功能的可能机制。方法:72只SD大鼠随机分为空白组和假手术组各12只,其余48只大鼠采用脊髓横断法造模,在符合模型标准的大鼠中随机抽取36只分为模型组、电针组和电针+PD98059组各12只。电针组大鼠于“次髎”“中极”“三阴交”“大椎”给予电针治疗,20 min/次,1次/d,连续7 d;电针+PD98059组大鼠在同样电针干预前2 h给予腹腔注射PD98059(5 mg/kg)。采用尿流动力学检测大鼠膀胱基础压、漏尿点压、最大压力、最大容量及顺应性,HE染色观察大鼠膀胱逼尿肌组织形态,用TUNEL法测定脊髓组织细胞凋亡情况,用Western blot法检测脊髓组织中环磷酸腺苷直接激活交换蛋白2(Epac2)、小分子G蛋白Rap、磷酸化(p)-Raf、p-MEK、p-ERK 1/2、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白X(Bax)的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠膀胱基础压、漏尿点压、最大压力均升高(P<0.01),而膀胱最大容量减少(P<0.01),膀胱顺应性降低(P<0.01),脊髓组织细胞凋亡率升高(P<0.01),脊髓组织Epac2、Rap、p-Raf、p-MEK、p-ERK1/2及Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.01),Bax蛋白表达水平升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组大鼠膀胱基础压、漏尿点压、最大压力均降低(P<0.05),膀胱最大容量增加(P<0.05),膀胱顺应性升高(P<0.05),脊髓组织细胞凋亡率降低(P<0.05),脊髓组织Epac2、Rap、p-Raf、p-MEK、p-ERK1/2及Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01),Bax蛋白表达水平降低(P<0.05)。与电针组比较,电针+PD98059组大鼠膀胱基础压、漏尿点压、最大压力均升高(P<0.05),膀胱最大容量减少(P<0.05),膀胱顺应性降低(P<0.05),脊髓组织细胞凋亡率升高(P<0.05),脊髓组织p-MEK、p-ERK1/2及Bcl-2蛋白表达水平均降低(P<0.05),Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。HE染色结果显示,空白组和假手术组大鼠膀胱逼尿肌组织细胞排列紧密整齐,细胞形态完整;模型组大鼠膀胱逼尿肌移行上皮细胞排列紊乱,固有膜被破坏,伴单核细胞浸润;与模型组比较,电针组膀胱逼尿肌组织弹性纤维增生程度减轻,肌纤维排列层次较清晰,可观察到更多形态饱满的完整细胞;与电针组比较,电针+PD98059组逼尿肌组织肌纤维排列层次欠清晰,细胞间隙大。结论:电针可改善SSCI后逼尿肌反射亢进型大鼠的膀胱功能,其机制可能与电针上调脊髓Epac2、Rap,启动Raf-MEK-ERK级联反应,减少细胞凋亡,改善膀胱神经支配有关。 展开更多
关键词 电针 骶上脊髓损伤 神经源性膀胱 raf/mek/erk信号通路 尿流动力学
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中药通过细胞外信号调节激酶信号通路调控胃癌的研究进展
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作者 赵颖异 吕星 +1 位作者 谭雅兰 韩永光 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第7期1043-1048,1055,共7页
胃癌在我国发病率和死亡率较高,存在发现晚、5年生存率低的特点,手术切除仍然是临床治疗的主要方法。大鼠肉瘤蛋白(Ras)/迅速加速性纤维肉瘤蛋白(Raf)/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在调控细胞... 胃癌在我国发病率和死亡率较高,存在发现晚、5年生存率低的特点,手术切除仍然是临床治疗的主要方法。大鼠肉瘤蛋白(Ras)/迅速加速性纤维肉瘤蛋白(Raf)/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在调控细胞增殖、转移、凋亡等方面具有非常重要的作用,与胃癌的发生与发展密切相关。近年来,很多学者探索调控Ras/Raf/MEK/ERK信号通路治疗胃癌的作用机制,在信号转导机制研究、靶向抑制剂筛选、中医药治疗等方面取得大量成果,实验验证在胃癌的治疗中干预其信号传递具有良好的效果和应用前景。 展开更多
关键词 大鼠肉瘤蛋白/迅速加速性纤维肉瘤蛋白/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶/细胞外信号调节激酶(Ras/raf/mek/erk)信号通路 胃癌 基因突变 抑制剂 靶向治疗 中药 研究进展 作用机制
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Ras信号通路参与调控细胞凋亡作用的研究进展
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作者 范苏苏 罗兴炜 +1 位作者 朱钰珊(综述) 张旋(审校) 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第2期191-196,共6页
细胞凋亡是由体内和体外因素触发的预先存在的细胞死亡过程引起的主动细胞死亡,通过清除老化、受损细胞来维持内部环境的稳定。细胞凋亡在生理和病理状态下均发挥重要作用,并受到细胞内多条信号通路的调节,影响细胞内物质的表达。目前已... 细胞凋亡是由体内和体外因素触发的预先存在的细胞死亡过程引起的主动细胞死亡,通过清除老化、受损细胞来维持内部环境的稳定。细胞凋亡在生理和病理状态下均发挥重要作用,并受到细胞内多条信号通路的调节,影响细胞内物质的表达。目前已知Ras信号通路不仅广泛参与调控细胞生长增殖、分化和凋亡等多个生理病理过程,并具有促进细胞发生自噬性死亡的作用,然而,其参与调节细胞凋亡的具体机制尚未完全阐明。文章从细胞凋亡的分子机制出发,重点从线粒体凋亡途径、死亡受体凋亡途径、内质网应激凋亡途径相关凋亡途径,以及Ras信号通路在细胞凋亡调控中的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 Ras/raf/mek/erk信号通路 Ras/PI3K/Akt信号通路 细胞凋亡
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Ras/Raf/MEK/ERK信号传导通路在阿尔茨海默病中作用的初步研究 被引量:5
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作者 毕胜 赵维娜 +2 位作者 李毅 李国霖 潘尚哈 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第3期508-510,485,共4页
目的:探索Ras/Raf/MEK/ERK信号传导通路在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)中的作用。方法:以7例AD患者、7例帕金森痴呆患者和4例健康老年人为对象,进行离体细胞培养、蛋白质印迹分析研究,探讨HOE140诱导人皮肤成纤维细胞分化... 目的:探索Ras/Raf/MEK/ERK信号传导通路在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)中的作用。方法:以7例AD患者、7例帕金森痴呆患者和4例健康老年人为对象,进行离体细胞培养、蛋白质印迹分析研究,探讨HOE140诱导人皮肤成纤维细胞分化的可能作用机制。结果:阿尔茨海默病患者组ERK蛋白质印迹条带深于帕金森痴呆患者组及健康老年人组,阿尔茨海默病患者组ERK水平为130.21±14.53,帕金森痴呆患者为109.46±13.92,健康老年人组为107.84±12.89,结果分析显示,阿尔茨海默病患者组ERK水平与帕金森痴呆患者组及健康老年人组比较,差异有统计学意义(P<0.05),而帕金森痴呆患者组与健康老年人组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Ras/Raf/MEK/ERK传导通路在AD的发生中起重要作用,为AD的早期诊断和选择治疗靶点奠定理论基础并提供科学依据。 展开更多
关键词 Ras/raf/mek/erk信号传导通路 阿尔茨海默病 蛋白质印迹法
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基于Raf/MEK/ERK信号通路及ROS水平研究石蒜碱调控肝癌HepG-2细胞凋亡的机制 被引量:4
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作者 任丽平 李先佳 +2 位作者 金少举 马永超 徐松涛 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期28-32,共5页
目的:探讨石蒜碱诱导肝癌HepG-2细胞凋亡的的机制。方法:裸鼠成瘤实验检测石蒜碱对体内肝癌细胞增殖能力的影响;MTT法分析石蒜碱对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用;将25、50及100μmol/L石蒜碱作用于HepG-2细胞48 h,倒置荧光显微镜观察细... 目的:探讨石蒜碱诱导肝癌HepG-2细胞凋亡的的机制。方法:裸鼠成瘤实验检测石蒜碱对体内肝癌细胞增殖能力的影响;MTT法分析石蒜碱对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用;将25、50及100μmol/L石蒜碱作用于HepG-2细胞48 h,倒置荧光显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞凋亡;激光共聚焦观察活性氧荧光强度;测定SOD的活性,MDA的水平;Western blot法检测细胞Raf蛋白激酶(Raf)、p-Raf、丝裂原活化蛋白激酶(MEK)、p-MEK、细胞外调节蛋白激酶(ERK2)、p-ERK2、半胱天冬酶3(cleaved Caspase-3)、cleaved Caspase-9蛋白表达水平。结果:裸鼠成瘤实验显示石蒜碱对肝癌HepG-2细胞裸鼠皮下移植瘤生长具有抑制作用;MTT结果显示,石蒜碱对肝癌HepG-2细胞的增长具有抑制作用;Hoechest 33342染色和流式细胞仪检测,细胞凋亡率明显增加(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较,25、50、100μmol/L石蒜碱能增加ROS、MDA含量,降低SOD活性;上调凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达,50、100μmol/L的石蒜碱能降低HepG-2细胞中p-Raf/Raf、p-MEK/MEK、p-ERK2/ERK2比值(P<0.05或P<0.01)。结论:石蒜碱能抑制肝癌HepG-2细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制可能和调控Ras/raf/MEK/ERK信号通路和ROS水平有关。 展开更多
关键词 石蒜碱 raf蛋白激酶/丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶信号通路 活性氧水平 细胞凋亡
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清肝九味散对肝纤维化大鼠Raf/MEK/ERK信号通路的影响 被引量:3
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作者 戈宏焱 王安庆 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期848-854,共7页
目的观察清肝九味散对肝纤维化大鼠的干预作用及其潜机制。方法采用随机数字表法将50只SD大鼠分为正常组、模型组、阳性对照组、蒙药低剂量组及蒙药高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠均通过腹腔注射四氯化碳(CCl_(4))建立肝... 目的观察清肝九味散对肝纤维化大鼠的干预作用及其潜机制。方法采用随机数字表法将50只SD大鼠分为正常组、模型组、阳性对照组、蒙药低剂量组及蒙药高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠均通过腹腔注射四氯化碳(CCl_(4))建立肝纤维化模型。造模成功后,正常组大鼠给予蒸馏水灌胃,阳性对照组灌服水飞蓟素(SIL)10 mg/kg;蒙药低、高剂量组每日分别灌服清肝九味散水煎液0.525、4.725 g/kg。各组均每天灌胃1次,连续8周。采用全自动生化仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性水平;HE染色法观察肝组织病理变化;免疫组化法检测肝组织平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测基质金属蛋白酶2(MMP2)、Ⅰ型胶原α(COL1α)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)mRNA水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)检测肝组织MMP2、TIMP1蛋白表达及Raf蛋白激酶1(Raf-1)、丝裂原活化细胞外信号调节激酶(MEK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)磷酸化水平的变化。结果与正常组比较,模型组大鼠明显消瘦、暴躁,肝脏经HE染色后可见典型纤维化病理表现;阳性对照组和蒙药低、高剂量组大鼠一般状态有明显改善,肝脏病理损伤减轻,血清ALT、AST水平较模型组显著下降(P<0.01);RT-PCR结果显示:与正常组比较,模型组MMP2、COL1α、TIMP1 mRNA表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组、蒙药低、高剂量组MMP2 mRNA表达明显升高,TIMP1、COL1αmRNA表达明显降低(P<0.01)。免疫组化结果显示:与正常组比较,模型组α-SMA蛋白阳性面积显著升高(P<0.01);与模型组比较,蒙药低、高剂量组α-SMA蛋白表达均显著降低(P<0.01)。Western Blot结果显示:与正常组比较,模型组MMP2、TIMP1、p-Raf、p-MEK、p-ERK蛋白表达均显著升高(P<0.05):与模型组比较,阳性对照组及蒙药高剂量组MMP2蛋白表达明显升高,阳性对照组及蒙药各剂量组TIMP1、p-Raf、p-MEK、p-ERK蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01),且蒙药高剂量组较蒙药低剂量组下降更明显(P<0.01)。结论蒙药清肝九味散对CCl_(4)诱导的肝纤维化大鼠一般状态有改善作用,能减轻大鼠肝脏的纤维增生程度,并通过调节MMPs/TIMPs体系促进细胞外基质(ECM)降解,其抗肝纤维化机制可能与抑制Raf/MEK/ERK信号通路有关。 展开更多
关键词 清肝九味散 肝纤维化 raf/mek/erk信号通路 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶抑制剂
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