Snail和Raf激酶抑制蛋白与非小细胞肺癌侵袭转移的关系

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织中Snail和Raf激酶抑制蛋白(RKIP)的表达情况。方法采用免疫组织化学方法检测124例NSCLC及67例癌旁正常肺组织中Snail和RKIP的表达情况,比较临床病理特征与Snail和RKIP阳性表达率的关系,分析Snail和RKIP的相关关系。结果 Snail蛋白在肺癌中表达率为79.03%,高于正常肺组织的19.40%(χ2=63.538,P<0.01);RKIP在肺癌中的表达率为36.29%,低于正常肺组织的77.61%(χ2=29.716,P<0.01)。两者的表达水平均与肺癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移及术后生存时间有关;Snail与RKIP的蛋白表达水平呈负相关(P<0.05)。结论 Snail高表达与RKIP低表达可能是NSCLC侵袭转移的重要生物学标志,可作为NSCLC的预后指标。

老年非小细胞肺癌中Raf激酶抑制蛋白与p-AKT的表达及意义

目的探讨Raf激酶抑制蛋白(RKIP)及p-AKT在老年非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义。方法对RKIP和p-AKT的蛋白进行间接免疫荧光标记,采用流式细胞仪对78例NSCLC及相应癌旁正常肺组织进行定量检测。结果 RKIP在NSCLC组织中的表达量明显低于癌旁正常肺组织(P<0.05);p-AKT在NSCLC组织中的表达量明显高于癌旁正常肺组织(P<0.05);RKIP、p-AKT的表达量均与肺癌分化程度、TNM分期、淋巴结转移及术后生存期有关(P<0.05)。结论在肺癌发生中RKIP表达减少,p-AKT表达上调,可能是导致NSCLC发生、发展的原因,可作为NSCLC恶性程度及预后判断的指标。

Raf激酶抑制蛋白和P-ERK在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitor protein,RKIP)和磷酸化细胞外信号调节激酶(phos-extracellular signal regulated kinase,P-ERK)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测RKIP和P-ERK在HCC、癌旁及正常肝组织中的表达,并分析其与HCC临床病理学特征的关系。结果:HCC组织中RKIP的表达低于癌旁及正常肝组织,而P-ERK的表达高于癌旁及正常肝组织,差异有统计学意义;HCC组织中RKIP与P-ERK的表达呈显著负相关(r=-0.227,P=0.039);RKIP在HCC组织中的表达与有无肝内或淋巴结转移及肿瘤分化程度相关(P<0.05);P-ERK在HCC组织中的表达与肿瘤分化程度、有无癌栓及有无肝内或淋巴转移相关(P<0.05)。结论:RKIP表达的减少或缺失与HCC的发生、发展密切相关,RKIP表达的减少或缺失可能通过上调P-ERK的表达促进HCC的侵袭和转移。

卵巢上皮性癌中Raf激酶抑制蛋白、核因子κBp65蛋白的表达及相关性研究

目的:研究卵巢上皮性癌组织中Raf激酶抑制蛋白(RKIP),核因子κBp65蛋白(NF-κBp65)的表达,探讨两者在卵巢上皮性癌侵袭转移中的作用和机制,分析RKIP表达水平改变对卵巢上皮性癌侵袭能力和NF-κB信号通路活性的影响。方法:应用免疫组织化学染色方法检测76例卵巢上皮性癌组织、35例良性卵巢上皮性肿瘤组织、22例正常卵巢组织中RKIP和NF-κBp65蛋白的表达,并分析不同卵巢组织临床及病理因素之间的关系。结果:卵巢上皮性癌组织中RKIP的表达低于良性卵巢上皮性肿瘤组织及正常卵巢组织,而NF-κBp65的表达高于良性卵巢上皮性肿瘤组织及正常卵巢组织,差异有高度统计学意义(P<0.01);RKIP和NF-κBp65在卵巢上皮性癌中的表达均与肿瘤分化程度、临床分期及有无淋巴结转移有关(P<0.05);卵巢上皮性癌组织中RKIP与NF-κBp65的表达呈负相关(r=-0.582,P<0.01)。结论:RKIP表达的减少或缺失与卵巢上皮性癌的发生、发展密切相关,可能通过上调NF-κBp65的表达促进卵巢上皮性癌的侵袭和转移,其机制可能与活化NF-κB信号通路有关。

肝癌组织中Raf激酶抑制蛋白的表达及其临床意义

目的探讨Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitor protein,RKIP)在肝癌中的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR方法检测肝细胞癌、癌旁组织及正常肝组织中RKIP mRNA的表达;采用组织芯片的免疫组织化学方法检测RKIP蛋白和磷酸化的RKIP蛋白的表达,并分析RKIP蛋白和磷酸化的RKIP的表达与肝细胞癌临床病理学特征的关系。结果RKIP mRNA在肝细胞癌组织、癌旁肝组织及正常肝组织的表达差异无统计学意义(P>0.05)。肝细胞癌、癌旁肝组织及正常肝组织中RKIP蛋白表达的阳性率分别为22.2%、86%、93.8%,磷酸化的RKIP蛋白表达的阳性率分别为29.2%、84%、93.8%;肝癌组织中RKIP和磷酸化的RKIP蛋白表达均显著低于癌旁及正常肝组织(P<0.05);RKIP和磷酸化的RKIP蛋白表达与肿瘤大小、AFP水平及有无门静脉或胆管癌栓无关(P>0.05);RKIP和磷酸化的RKIP蛋白表达与肝细胞癌分化程度及有无肝内或淋巴转移有关,中高分化组RKIP和磷酸化的RKIP蛋白表达高于低分化组,无肝内或淋巴转移组高于有肝内或淋巴转移组(P<0.05)。结论RKIP和磷酸化的RKIP蛋白表达的减少或缺失与肝癌的发生、发展、侵袭转移密切相关。

Raf激酶抑制蛋白在Ⅱ期结直肠癌的表达及临床意义

目的:探讨RKIP在Ⅱ期结直肠癌中的表达及其与患者预后的关系。方法:收集130例Ⅱ期结直肠癌患者的术后组织标本,采用免疫组织化学SP法检测RKIP在原发肿瘤组织及癌旁组织中的表达,结合患者临床病理特征分析RKIP的表达水平与Ⅱ期结直肠癌患者预后的关系。结果:结直肠癌组织中RKIP的表达水平显著低于相应癌旁组织(P<0.001)。与无复发转移患者相比,复发转移患者癌组织中RKIP的表达明显降低(P=0.034)。RKIP高表达组的10年无疾病进展生存率明显优于RKIP低/中表达组(89% vs 75%,P=0.032);与RKIP低/中表达组相比,RKIP高表达组的10年总生存期有延长趋势,但无统计学意义(71%vs88%,P=0.058)。RKIP表达下降(HR 0.37;95%CI:0.13～0.99;P=0.040)和术前CEA水平升高(HR 3.50;95%CI:1.30～9.37;P=0.013)是Ⅱ期结直肠癌患者术后复发转移的危险因素。结论:RKIP在Ⅱ期结直肠癌原发肿瘤组织中表达下调,高表达患者无疾病进展生存期明显延长,提示RKIP表达水平是Ⅱ期结直肠癌患者术后复发转移的重要预后因素。

Raf激酶抑制蛋白和p-ERK在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达及意义

目的:探讨Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitor protein,RKIP)和磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase,p-ERK)在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达及意义。方法:40只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为2组:正常对照组(N组)和糖尿病肾病组(M组)。苏木精-伊红(hematoxy-lin-eosin,HE)和过碘酸-雪夫(periodic acid-Schiff,PAS)染色观察肾组织病理改变,免疫组化方法检测各组肾组织RKIP和p-ERK1/2表达,Western blotting检测各组RKIP和p-ERK1/2的表达。结果:M组大鼠随着病程的延长,血糖升高,出现蛋白尿,肾重增加,肾组织内p-ERK1/2明显增高,RKIP降低,与N组相比有显著差异(P<0.05)。结论:RKIP表达的减少及p-ERK的表达增加可能促进糖尿病肾病的进展。

Raf激酶及其活性抑制剂的应用

af/MEK/ERK信号转导通路广泛参与了细胞的生长、分化和凋亡等过程 ,但Raf激酶活化的确切过程尚未阐明。研究发现多种蛋白参与了Raf激酶活性的调节过程 ,因此 ,应用Raf激酶的抑制剂或者通过调节影响Raf活性的蛋白可以达到下调Raf活性 。

索拉非尼对人肝癌HepG2细胞凋亡及其Raf激酶表达的影响

目的观察索拉非尼对人肝癌细胞株HepG2细胞凋亡及其Raf激酶的影响。方法体外构建培养肝癌HepG2细胞,设A、B组。A组加入索拉非尼0.2 ml(将索拉非尼稀释至5μmol/L),B组不加任何药物。继续培养细胞,于加药后第1、3、5、7天采用流式细胞术和荧光共振能量转移法(FRET)观察两组细胞凋亡及其Raf激酶表达变化。结果 A组HepG2细胞Raf激酶活性为45.21%,低于B组的98.11%(P<0.05);A组加药后第1、3、5、7天Raf激酶活性分别为96.34%、78.21%、65.21%、45.11%(P均<0.05)。与B组比较,A组细胞凋亡率明显增加、S期细胞明显减少(P均<0.05)。结论索拉非尼可以有效地抑制人肝癌HepG2细胞Raf激酶的表达,使S期细胞明显减少,从而抑制HepG2细胞的生长。

Raf激酶抑制蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

背景与目的 Raf激酶抑制蛋白(Rafkinase inhibitor protein,RKIP)属于磷脂酰乙醇胺结合蛋白家族的成员,RKIP参与ERK/MAPK、G蛋白偶联受体和NF-κΒ等信号传导过程,且RKIP的表达减弱或丢失与多种肿瘤的发生发展及侵润转移相关。本研究旨在探讨RKIP在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC临床病理特征的相关性。方法应用RT-PCR、Western blot及免疫组化方法检测83例NSCLC及其癌旁组织标本中RKIP的表达,并结合临床病理学资料进行统计学分析,所有病例均经病理诊断确诊,均无其它部位原发肿瘤,术前无化疗、放疗和免疫治疗史。结果 NSCLC中RKIP mRNA及蛋白的表达明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。RKIP与肿瘤分化程度、TNM分期、有无淋巴结转移及生存期有关(P<0.05),但与患者的性别、吸烟、年龄及肿瘤的大小无关(P>0.05)。结论 RKIP的低表达与NSCLC的发生及侵袭转移有关,可作为NSCLC预测及预后评估的指标。

体外周期性单轴压应力下髁突软骨细胞Raf激酶抑制蛋白(RKIP)的动态变化研究

目的:探讨体外周期性单轴压应力对大鼠髁突软骨细胞的Raf激酶抑制蛋白(RKIP)及其mRNA变化的早期影响,以助于阐明力学引起细胞应答反应的分子机制。方法:利用四点弯曲细胞力学加载仪对第3代大鼠髁突软骨细胞进行体外周期性单轴压应力加载,力值为4000μstrain,时间为0、15、30、60、120、240min。采用实时荧光定量PCR技术和Western blot免疫印迹技术研究大鼠髁突软骨细胞在周期性单轴压应力作用下RKIP及其mRNA变化。结果:大鼠髁突软骨细胞RKIP mRNA和蛋白表达呈现几乎相反的趋势。RKIP mRNA的表达于30min上升(P<0.001),60min达到高峰后迅速回落,低于细胞的正常基态水平;而RKIP的蛋白表达30min开始下调(P<0.001),持续至120、240min时回升。结论:RKIP在髁突软骨细胞的早期力学应答机制中可能扮演着相当重要的作用,其蛋白和mRNA水平表达变化不同,转录水平的调控最终要影响蛋白水平的表达。

Raf激酶抑制蛋白表达水平与非小细胞肺癌放射敏感性的关系

目的探讨Raf激酶抑制蛋白(RKIP)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与NSCLC放射敏感性的关系。方法应用免疫组化方法检测106例放射治疗前NSCLC组织中RKIP蛋白的表达。应用logistic回归分析NSCLC放射敏感性相关因素。结果RKIP表达与NSCLC临床分期及淋巴结转移相关(P<0.05)。临床分期及RKIP表达水平与NSCLC的放射敏感性具有相关性(P<0.05),临床分期早、RKIP表达水平高的患者放射敏感性高。RKIP表达是NSCLC放射敏感性的独立相关因素。结论RKIP是评价NSCLC放射敏感性的关键指标。

Raf激酶抑制蛋白对促分裂原活化蛋白激酶通路的调控作用

Raf激酶抑制蛋白是一种高度保守的表达蛋白,它作为促分裂原活化蛋白激酶信号级联反应的内源性调控者,在生物体的生长和分化中扮演着重要的作用。Raf激酶抑制蛋白位于促分裂原活化蛋白激酶级联反应的交叉口,能调控多条信号传导通路,主要通过调节Raf-1的活性来介导其调控机制。因此,Raf激酶抑制蛋白可能是促分裂原活化蛋白激酶级联通路中一个新的关键调控位点。

食管鳞状细胞癌组织Raf激酶抑制蛋白和NF-κBp65表达及临床意义

目的探讨食管鳞状细胞癌组织中Raf激酶抑制蛋白(RKIP)和核因子κBp65(NF-κBp65)的表达,及其与食管鳞状细胞癌各临床病理因素之间的关系。方法用免疫组织化学法检测77例食管鳞状细胞癌和77例癌旁组织的RKIP和NF-κBp65表达,并分析其与食管鳞状细胞癌临床病理学特征关系。结果食管鳞状细胞癌组织中RKIP的表达低于正常癌旁组织,而NF-κBp65的表达则高于癌旁组织,二者比较有显著性差异(P<0.01);RKIP在食管鳞状细胞癌组织中的表达与有无淋巴结转移有关(P<0.05)。NF-κBp65在食管鳞状细胞癌组织中的表达与临床分期、有无淋巴结转移及肿瘤分化程度有关(P<0.05或0.01)。食管鳞状细胞癌组织中RKIP与NF-κBp65的表达呈负相关(P<0.05)。结论RKIP表达减少或缺失与食管鳞状细胞癌的发生、发展密切相关,RKIP表达减少或缺失可能通过上调NF-κBp65的表达促进食管鳞状细胞癌的侵袭和转移。

抗肿瘤药物Raf激酶抑制剂的研究进展

随着分子生物学的发展,对基于肿瘤分子机制研究的肿瘤分子靶向治疗的研究已获重大进展。蛋白激酶抑制剂是目前肿瘤靶向治疗药物研究的重点之一,通过阻碍细胞内分子传导通路,影响肿瘤细胞的存活、增殖以及疾病进展。在Raf/MEK/ERK信号传导通路中,Raf激酶发挥着至关重要的作用,Raf激酶的突变能使ERK通路保持激活状态,这最终导致细胞的增殖和分化。本综述将阐述Raf激酶在正常与肿瘤细胞中的功能并重点关注于近期发表的各种类型Raf激酶抑制剂。

Raf激酶抑制蛋白和上皮钙黏蛋白在结肠癌旁黏膜及结肠癌中的表达及其在结肠癌发生、发展中的作用研究

目的:探究Raf激酶抑制蛋白(RKIP)和上皮钙黏蛋白(E-cadherin)在结肠癌旁正常黏膜及结肠癌组织中的表达及其在结肠癌发生、发展中的作用。方法:随机选取我院于2012年9月至2014年3月收治的结肠癌患者50例为研究对象。取肿瘤组织黏膜为实验组,癌旁正常黏膜组织为对照组,采用免疫组化法检测Raf激酶抑制蛋白及上皮型钙黏蛋白水平。结果:两组患者中结肠癌旁正常黏膜与结肠癌组织黏膜中的Raf激酶抑制蛋白及上皮型钙黏蛋白阳性表达具有明显差异,对照组Raf激酶抑制蛋白阳性率高达96.0%,而实验组阳性率仅为38.0%(χ2=38.03);实验组中的上皮型钙黏蛋白阳性表达率仅26.0%,明显低于对照组的88.0%(χ2=67.48),以上差异均具有统计学意义(P<0.001)。结论:Raf激酶抑制蛋白及上皮型钙黏蛋白在结肠癌患处黏膜的阳性表达显著低于结肠癌旁黏膜,由此我们可以推测这两种蛋白质分子低表达水平可能与结肠癌的发生发展密切相关。

宫颈癌组织Raf激酶抑制蛋白和NF-κB p65表达及其临床意义

目的研究宫颈癌组织中Raf激酶抑制蛋白（RKIP）和核因子xBp65（NF-κBp65）的表达，探讨二者表达之间的相关性及其与宫颈癌各临床病理因素之间的关系。方法用免疫组织化学方法检测69例宫颈癌组织、37例宫颈上皮内瘤变组织和18例正常宫颈组织的RKIP和NF-κBp65表达，并分析其与宫颈癌临床病理学特征的关系。结果宫颈癌组织中RKIP的表达低于宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织，而NF-κBp65的表达高于宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织，差异有统计学意义（Hc=45．124、38．107，Z=4．309～5．159，P〈O．01）；RKIP和NF—κBp65在宫颈癌组织中的表达均与临床分期、有无淋巴结转移及肿瘤分化程度有关（χ^2=5．150～11．917，P〈0．05）。宫颈癌组织中RKIP与NF-κBp65的表达呈显著负相关（r=-0．464，P〈O．01）。结论RKIP表达的减少或缺失与宫颈癌的发生、发展密切相关，RKIP表达的减少或缺失可能通过上调NF—κBp65的表达促进宫颈癌的侵袭和转移。

口腔鳞状细胞癌中RAF激酶抑制蛋白的表达及其与临床特点的相关性

目的:分析口腔鳞状细胞癌(OSCC)中RAF激酶抑制蛋白(RKIP)的表达情况及其与临床特点的相关性。方法:用免疫组织化学染色法和Western blot检测RKIP在OSCC组织(50例)、癌旁正常组织(50例)、头颈部淋巴结转移组织(22例)以及口腔黏膜白斑(30例)的表达,统计分析RKIP蛋白表达与OSCC的临床病理特征之间的相关性。结果:与癌旁正常组织比较,RKIP在口腔鳞状细胞癌中的表达明显减少(P<0.05),在转移的淋巴组织中减少更明显甚至无RKIP表达(P<0.05);RKIP表达下调与OSCC的淋巴结转移和临床分期显著相关(P<0.05)。结论:RKIP的表达下降在口腔鳞状细胞癌的发生发展中起到一定作用,与肿瘤的侵袭及转移相关。

Raf激酶抑制蛋白对鼻咽癌细胞增殖的影响

目的:探讨Raf激酶抑制蛋白(RKIP)对鼻咽癌细胞增殖的影响。方法:采用脂质体转染方法将反义RKIP核酸表达质粒pcDNA3.1(-)-asRKIP及空白载体pcDNA3.1(-)分别转染鼻咽癌细胞系6-10B细胞,用West-ern印迹检测RKIP表达,建立RKIP表达下调的稳定转染细胞和对照细胞系。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术和软琼脂集落形成实验检测RKIP表达下调对鼻咽癌细胞增殖、细胞周期分布和停泊非依赖性生长的影响。结果:建立了RKIP表达下调的6-10B鼻咽癌细胞系;RKIP表达下调促进6-10B细胞增殖和停泊非依赖性生长,并加速其越过G0/G1期。结论:RKIP具有抑制鼻咽癌细胞增殖和停泊非依赖性生长的作用,可能在鼻咽癌发病中具有重要作用。

Raf激酶抑制剂的设计、合成及抗肿瘤活性

目的:设计并合成新型Raf激酶抑制剂并测试其在体外的抗肿瘤活性。方法:根据Raf激酶抑制剂的构效关系和药效团研究成果,设计了一系列双芳基脲类化合物(N-1～N-12);采用MTT法对目标化合物进行4个瘤株(SMMC-7721、A549、BGC-823和HL-60)的体外抑制肿瘤细胞增殖的活性测定;通过FRET法测试对Raf激酶的抑制活性。结果与结论:合成了12个Raf激酶抑制剂,其结构均经IR、1H NMR和MS确证。目标化合物对所测的4种肿瘤细胞均有一定程度的增殖抑制作用;11个目标化合物对Raf激酶有一定程度的抑制作用,其中2个化合物的活性与索拉非尼相当。