Ramos免疫组织化学新技术的特异性研究

Ｒａｍｏｓ免疫组织化学新技术的特异性研究马大烈郑青渝黄玲魏建丽作者单位：第二军医大学长海医院病理科，上海２００４３３建立一种快速简便、特异敏感的免疫组化技术，不仅能提高工作效率，利于快速病理诊断，而且对该技术的规范化和标准化具有重要意义。为此，本文利...

Ramos免疫组织化学技术的敏感性研究

观察快速微波一步法（Ｒａｍｏｓ法）免疫组织化学技术的敏感性。选用１５种辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的特异性抗体（ＥＰＯＳ），对５９例相应的恶性肿瘤组织进行快速微波免疫组织化学一步法标记。结果显示５８例为阳性（９８．３％），其中弱阳性４例，中度阳性和强阳性为５４例。结果表明，Ｒａｍｏｓ法具有敏感性高、特异性强、快速而简便等特点。

mM-CSF及其剪切体对淋巴细胞白血病Ramos细胞增殖的抑制作用

目的探讨膜结合型巨噬细胞集落刺激因子(mM-CSF)及其剪切体(mM-CSF-Δ)对淋巴细胞白血病Ramos细胞增殖的抑制作用。方法采用Overlap PCR法构建带有m M-CSF的真核表达质粒pTARGET-mM-CSF,再进一步构建胞内区截短30个氨基酸的表达质粒p TARGET-m M-CSF-Δ,并进行PCR及DNA双向测序鉴定。将空载体p TARGET、p TARGET-mM-CSF、pTARGET-mM-CSF-Δ质粒分别转染Ramos细胞,经G418筛选稳定表达细胞株,并用RT-PCR、Western blotting进行鉴定;MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期。结果成功构建了m M-CSF和m M-CSF-Δ的真核表达载体,获得了稳定转染细胞株Ramos-V、Ramos-M和Ramos-Δ。Ramos-M、Ramos-Δ、Ramos-V细胞增殖能力的OD值分别为0.413±0.014、0.384±0.019、0.463±0.037,Ramos-M细胞与Ramos-Δ细胞比较,Ramos-M、Ramos-Δ细胞分别与Ramos-V细胞比较,P<0.05或<0.01。Ramos-M、Ramos-Δ、Ramos-V细胞处于G0/G1期的比例分别为41.54%±1.22%、45.60%±1.09%、39.20%±1.53%,Ramos-M细胞与Ramos-Δ细胞比较,Ramos-M、Ramos-Δ细胞分别与Ramos-V细胞比较,P<0.05或<0.01。结论 mM-CSF、mM-CSF-Δ均能抑制淋巴细胞白血病Ramos细胞增殖,且后者抑制作用更强。

CXCR4抑制剂AMD3100联合硼替佐米对人淋巴瘤细胞株Ramos增殖、凋亡的影响

目的探讨CXCR4抑制剂AMD3100、硼替佐米对人淋巴瘤细胞株Ramos协同诱导凋亡作用。方法 1检测淋巴瘤患者骨髓单个核细胞中CXCR4及核因子κB(NF-κB)表达水平;2AMD3100、硼替佐米单用以及联合用药分别处理Ramos细胞,利用CCK-8法检测细胞增殖;利用流式细胞术检测细胞凋亡;Wester blot检测NF-κB、Bcl-2、Bcl-xl、c-IAP1及Caspase-3表达水平。结果 1淋巴瘤患者骨髓单个核细胞中CXCR4、NF-κB表达增高;2AMD3100、硼替佐米作用Ramos细胞后,随着药物浓度的增加,对细胞增殖的抑制作用逐渐增强、凋亡增加,两药具有协同作用(P<0.05);3AMD3100、硼替佐米单药组NF-κB、Bcl-2、Bcl-xl及c-IAP1表达降低,Caspase-3表达升高,联合用药组作用增强。结论 AMD3100、硼替佐米对Ramos细胞的增殖抑制、凋亡促进具有协同作用,其作用机制可能是通过抑制NF-κB、Bcl-2、Bcl-xl、c-IAP1及增强Caspase-3表达。

白花蛇舌草对人B淋巴细胞瘤Ramos细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨白花蛇舌草对Ramos细胞增殖和凋亡的影响。方法使用0、10、20、40 m L·L-1白花蛇舌草处理Ramos细胞24 h后收获细胞;采用细胞增殖检测试剂盒检测白花蛇舌草对Ramos细胞增殖的影响,并检测Ramos细胞线粒体膜电位的变化;流式细胞术检测白花蛇舌草对Ramos细胞凋亡的影响,并检测Ramos细胞中caspase-3、caspase-9活性的变化;Western blot法检测Ramos细胞Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果细胞增殖实验结果证明白花蛇舌草处理的Ramos细胞增殖受到明显抑制;20、40 m L·L-1白花蛇舌草干预Ramos细胞24 h后,Ramos细胞线粒体膜电位低于0 m L·L-1(P<0.05,P<0.01);流式细胞术检测结果表明细胞凋亡增加;与0 m L·L-1白花蛇舌草比较,20 m L·L-1白花蛇舌草处理Ramos细胞24 h,caspase-3和caspase-9活性增加了96%和37%(P<0.05),40 m L·L-1白花蛇舌草处理Ramos细胞24 h,caspase-3和caspase-9活性增加了148%和115%(P<0.01)。Western blot法证实Bax蛋白表达量增强,而Bcl-2蛋白表达量减弱,且呈现一定程度的剂量依赖性。结论白花蛇舌草可通过活化调控胱天蛋白依赖的线粒体途径,诱导Ramos细胞凋亡。

免疫组织化学RaMOS法在病理诊断中的应用

RaMOS(Rapid microwave one step method)快速微波一步法,是继微波EnVision法、LDP法等二步法之后免疫组织化学染色方法的又一次改进。我们选用了15种RaMOS法抗体,对口腔良、恶性肿瘤进行了相应的免疫组化标记,并与标准Sp法、EnVision法相对照,结果显示RaMOS法是一种快速且染色效果良好的方法。1 材料和方法1.1 材料 活检组织用4％甲醛常规固定、脱水、石蜡包埋、切片。RaMOS法试剂(即用型)和可设定实际辐射时间的ZD—Ⅱ微波仪,均由上海中达医学应用研究所提供。1.2 方法 ①组织切片(4μm)常规脱蜡至水。②微波抗原修复,切片入PBS液(pH7.4)内(250mL),温度控制在80℃～100℃之间(根据抗原类型掌握具体温度),保持10min。

用RamOS降低公用机的维护工作量

RamOS是近年来新兴的一种操作系统安装方式,有其自身独有的显著特点。文章概述了RamOS的相关特点和具体实施的主要步骤,以及利用其特点,解决公共用机维护的特殊需求问题。

便宜又好用 RAMOS DDR 333内存测试

目前DDR内存在性能与价格上取得了很好的平衡,稳稳地占据了主流市场。但是,大家在购买DDR内存时也会遇到一个普遍的问题,那就是名牌产品的价格太高,而普通HY兼容内存的价格虽然低,质量却不让人放心。本次送测的RAMOS DDR 333内存也许能够很好地解决这个问题。外观及用料拿到RAMOS DDR 333内存的第一感觉就是很普通,在包装及内存外观上并没有什么特别之处。在装内存的塑料盒上贴了印有品牌、厂家网址及电话的标签(图1),在里面的内存上贴有该产品的具体规格及参数(图2)。

构建基于RAMOS的安全系统

本文根据笔者对RAMOS的反复实践,以及对病毒、木马和黑客入侵原理的研究,通过对RAMOS的安全性进行分析,提出了以主机防御系统HIPS结合在线杀毒软件构造RAMOS安全防御的方法,将RAMOS打造成实用、安全、快速、稳定的系统,更好地防护计算机系统和保障用户文件及敏感信息的安全。

The Effect of Sagittal Split Ramos Osteotomy Advancement and Setback Mandible on Occlusal Force and Masticatory Efficiency.

The occlusal force and masticatory efficiency in twenty-one patients (mandibular prognathism =11, mandibular retrognathism = 10) undergone sagittal split

Interview with Miguel Angel Ramirez Ramos,Cuba’s ambassador to China

China and Cuba established diplomatic relations on Sept 28,1960,making Cuba the first country in Latin America and the Western Hemisphere to forge diplomatic ties with China.Since then,the two countries have maintained friendly exchanges.Mr Ambassador,what do you think is the best way for China and Cuba to carry out practical cooperation in various fields under the new situation where China has put forward the initiative of jointly building One Belt and One Road?

The 21st Century Should Become the Women's Century——An Interview with Ms. Leticia Ramos Shahani, the Head of the Philippine Delegation

AT the end of the UN Fourth World Conference on Women, Leticia Ramos Shahani, a Senator of the Philippines, gave a speech on behalf of the Group of 77 and China. Ms. Shahani said this Conference proves one fact, that the fate of women has a great bearing On world development. She hopes the Platform

Ram os免疫组织化学技术检测冰冻组织良恶性病变的诊断价值

目的： 探讨Ｒａｍ ｏｓ免疫组织化学技术在冰冻快速病理诊断中的应用价值。方法： 应用Ｒａｍ ｏｓ免疫组织化学技术对１００ 例冰冻活检组织进行免疫组化标记。结果：Ｒａｍ ｏｓ法在冰冻活检组织中有较好的抗原定位及较强的阳性信号，整个检测过程可在１０ ｍ ｉｎ 内完成。结论：Ｒａｍ ｏｓ免疫组织化学技术可应用于冰冻活检诊断，并可能成为其重要的辅助手段。

免疫组化应用于术中病理诊断

目的本研究将免疫组化应用于术中病理诊断，以解决一些疑难问题。方法采用ＲＡＭＯＳ（微波结合ＥＰＯＳ酶标一快速免疫组化一步法技术－Ｒａｐｉｄ ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｏｎｅ ｓｔｅｐｍｅｔｈｏｄ－ＲＡＭＯＳ）法进行冰冻切片免疫组化标记结合 ＨＥ观察切片。结果所有病例可见相应抗体着色，且时间短（１５分钟）、背景低、清晰、特异性强。结论ＢＭＯＳ法可应用于术中病理诊断，能解决以往许多难于解决的问题。

过表达EB病毒潜伏期膜蛋白1(LMP1)的人B淋巴细胞株的建立

目的构建EB病毒潜伏期膜蛋白1(LMP1)基因的真核表达载体,通过电穿孔法转染人B淋巴瘤细胞株Ramos细胞,建立稳定的LMP1表达细胞株。方法扩增带有EcoRⅠ与BamHⅠ酶切位点的LMP1编码基因,克隆至pcDNA3.1-EF1a-mcs-3FLAG-CMV-EGFP真核表达载体,挑取阳性单克隆感受态细胞行PCR以及测序后将重组质粒通过电穿孔法转染Ramos细胞, G418筛选稳定表达LMP1的细胞株, PCR和Western blot法分别检测LMP1 mRNA和蛋白在Ramos细胞中的表达。结果 PCR与测序证实成功构建了LMP1重组质粒,建立了稳定转染的Ramos细胞,且LMP1蛋白可在细胞中成功表达。结论成功建立了稳定表达LMP1的Ramos细胞。

非结核分枝杆菌肺病21例报告并文献复习

目的 研究非结核分枝杆菌肺病的临床表现、耐药情况及化疗效果。方法 分析 2 0 0 0年 8月至2 0 0 2年 10月间太原市结核病医院痰培养分枝杆菌阳性、菌型鉴定为非结核分枝杆菌、并作药敏测定的 2 4例 ,并对其中 2 1例临床表现及治疗效果进行总结。结果 非结核分枝杆菌肺病的临床表现酷似肺结核 ,耐药发生率高。耐H、P发生率为 79.2 % ,耐 Z、E发生率为 75 .0 % ,耐 S发生率为 5 8.3% ,耐 R发生率为 2 9.1%。其中同时对 6种药物耐药者 4例 ,同时对 5种药物耐药者 5例 ,同时对 4种药物耐药者 8例 ,同时对 3种药物耐药者 3例 ,同时对 2种药物耐药者 1例 ,对 1种药物耐药者 2例 ,对 6种药物全敏感者 1例。结论 非结核分枝杆菌肺病确诊靠菌型鉴定。治愈需联合用药 18～ 2 4个月 ,有适应症时可考虑手术治疗。

污泥对白菜·生菜和番茄种子发芽率的影响

[目的]研究城市生活污水厂污泥对生菜(Lactuca sativa var. ramose)、白菜(Brassica pekinensis)和番茄(Lycopersicon esculentum)种子发芽率的影响。[方法]通过盆栽试验,测量污泥施用量对生菜、白菜和番茄的种子发芽率的影响。[结果]随着污泥施用量的增加,生菜、白菜和番茄种子发芽率降低。[结论]污泥对生菜、白菜和番茄的发芽率有明显的抑制作用。

莫氏斑胸鳞石蛾和长叉瘤石蛾幼虫记述(毛翅目:鳞石蛾科和瘤石蛾科)

首次记述了中国毛翅目特有种莫氏斑胸鳞石蛾（Paraphlegopteryx morsel Yang＆Weaver）和长叉瘤石蛾（Goera ramose Yang＆Armitage）幼虫的形态特征和筑巢、化蛹等生物学特性。莫氏斑胸鳞石蛾幼虫主要鉴别特征为头黄褐色，刚毛3特别细长，前胸背板前半部为黑褐色，后半部黄白色，老熟幼虫巢长16．0mm，宽约7.0mm。长叉瘤石蛾幼虫的主要鉴别特征为中胸背板两侧骨片各分为主骨片和侧骨片。主骨片sal刚毛1根，后缘区sa2刚毛3根，sa3位于侧骨片，具刚毛2根；腹节Ⅰ有1背突；老熟幼虫巢长9．3～12．5mm。

以硼为中心支状低聚物电子结构和吸收性质的理论研究

对所设计的以硼为中心、以2,2’–二氮吡啶为官能团的三配位支状低聚物两分子进行优化,得到了两分子的几何构型和电子结构:两分子的HOMO轨道电子云分布较为分散,主要分布在有机取代基上,而LUMO轨道电子云主要集中在中心原子部位;从能量上看分子B的LUMO轨道被降低,能级差变小。在对这两分子的光吸收性质进行的理论研究中,发现增加共轭链长可使光吸收强度增大,且吸收波长变短,即与传统分子的光吸收性质不同。