Histological Study on Reproductive Organ of Rana Temporaria Chensinesis David

The experiment was designed to study the histology of reproductive organ of Rana temporaria chensinesis David in reproductive season and dereproductive season, The results displayed that the sexual gland weight and oviduct weight of the Rana temporaria chensinesis David were significantly different between reproductive season and dereproductive season.

哈蟆油动物基原问题探讨

目的 :根据历史文献及现代在中国林蛙分类方面研究成果 ,确定哈蟆油的正品动物基原。方法 :查阅历代本草著作及相关历史文献资料与近代国内外对中国林蛙有关研究报道 ,进行整理、分析、总结。结果 :本草著作中记载的山蛤原动物为中国林蛙 ;中国林蛙是独立的种 ,而不是欧洲林蛙的一个亚种 ;中国林蛙有 4个亚种 ,分别为中国林蛙指名、兰州、康定、长白山亚种 ;哈什蟆的原动物为中国林蛙长白山亚种。结论 :中国林蛙长白山亚种为哈蟆油正品动物基原。

不同温度条件下环境水分对中国林蛙幼体存活的影响

中国林蛙（ＲａｎａｃｈｅｎｓｉｎｅｎｓｉｓＤａｖｉｄ）主要生活于东北地区的森林中。由于过量捕捉和当地生境的破坏，野生资源已逐渐枯竭，不少地区已处于灭绝的边缘［１，２］。因此，开展中国林蛙的人工养殖不仅具有重要的经济价值，而且对保护生物多样性也有积极意...

温度变化对中国林蛙胚胎发育的影响

开展中国林蛙南移和人工养殖是一项很有意义的工作，而南方多变的气温是否影响其胚胎发育是一个尚未研究的课题。本文利用受精卵在不同温度的恒温培养箱间移换，研究了温度变化对中国林蛙早期胚胎发育的影响，结果表明：（１）快速升温对中国林蛙胚胎孵化率、正常率均有影响，且温差越大影响越大；缓慢升温对胚胎的影响与温差大小和升温起点有关，高起点的升温对胚胎的影响比低起点的升温更大，生产中快速升温以不超过２℃，慢速升温以不超过４℃为宜。（２）慢速降温幅度为４℃时，对胚胎发育无影响，为８℃时，有影响；快速降温幅度为４℃时，对胚胎孵化率和正常率均有影响，生产中慢速降温以不超过８℃，快速降温以不超过４℃为宜。（３）变温幅度相同时，变温速度越大，对胚胎的影响越大。（４）原肠期是中国林蛙胚胎发育的升温敏感期，神经管期为升温非敏感期，中国林蛙胚胎发育中对升温变化较降温敏感。（５）中国林蛙的胚胎发育不会因南方天气的异常而遭到严重的影响。

中国林蛙卵油的中枢抑制作用

目的揭示CO2 超临界萃取的中国林蛙卵油 (eggoilofRanatemporariachensinensisDavid ,EORTCD)的镇静和抗惊厥作用。方法通过自主活动监测、协同巴比妥催眠和士的宁诱发惊厥等实验 ,探索中国林蛙卵油的药效和最大效能 ,并与安定、佳静安定进行比较。结果EORTCD对小鼠自主活动有明显的抑制作用 ,对戊巴比妥钠诱导的睡眠有协同效果 ,显著对抗士的宁引起的小鼠惊厥反应 ,通过最大效能比较EORTCD的抗惊厥潜伏期长于安定和佳静安定 ,最大效能三者在同一水平。结论EORTCD具有显著的中枢抑制作用 ,对惊厥动物产生保护作用。

哈士蟆卵油化学成分研究

Three compounds were isolated from the ovum oil of Rana temporaria chensinensis David. by column chromatography,and they were i dentif ied by examining their physical and chemical properties and spectroscopic analys is as cholesterol,palmitote and palmitic acid.The fatty acids in the ovum oil of Rana temporaria chensinensis David. have been analyzed qualitat ively by GC-MS and 21 kinds of the compounds were identified.

中国林蛙卵油的抗焦虑作用

目的研究中国林蛙卵油 (eggoilofRanatemporariachensinensisDavid ,EORTCD)的抗焦虑作用。方法应用高架十字迷路和小鼠爬梯实验评价中国林蛙卵油的抗焦虑活性及其量效、时效关系。结果与对照组比较 ,EORTCD 2 0、4 0 g·kg-1能显著延长大鼠在十字迷路开放通路连续停留时间 ,增加大鼠进入开放通路次数 ,而对封闭通路连续停留时间和进入封闭通路次数无明显影响 ;小鼠爬梯实验中 ,EORTCD 1 4～5 6g·kg-1组小鼠站立数明显减少而爬梯数无显著差异 ;EORTCD抗焦虑时效实验表明在给药后 3 0、60min抗焦虑活性较强 ;γ 氨基丁酸 (γ aminobutyricacid ,GABA) 5 0、1 0 0mg·kg-1分别与EORTCD 1 2 g·kg-1联合给药组的小鼠站立数显著降低而爬梯数无显著减少 ,且比单独给予EORTCD组小鼠站立数少。结论中国林蛙卵油有明显抗焦虑作用。

哈士蟆卵油化学成分研究(Ⅱ)

目的分离鉴定哈士蟆卵油化学成分。方法硅胶、LH 2 0柱色谱分离 ,通过IR、NMR及MS光谱分析法确定结构。结果分得 6个化合物 ,分别鉴定为 (Ⅰ )棕榈酸 α 单甘油酯、(Ⅱ )棕榈酸 α,α′ 甘油二酯、(Ⅲ )油酸 α 单甘油酯、(Ⅳ )硬脂酸、(Ⅴ )棕榈酰胺和 (Ⅵ )棕榈酸乙酯及硬脂酸乙酯。结论 6个化合物均为首次从哈士蟆卵中分离得到。

性激素对中国林蛙性腺分化的影响

在我国林蛙养殖地区，性别比例失调问题十分严重，部分地区雌蛙和雄蛙的比例只有３∶７，严重影响养殖效益，制约养蛙业的发展．为调整林蛙性别比例，分别在实验室内和抚松林蛙养殖场采用在蝌蚪饵料中添加性激素的方法，诱导性腺分化，达到了调整林蛙性别的目的，并对激素诱导的合适浓度和最佳时期进行了研究．为促进林蛙养殖业的发展提供了切实可行的诱导技术．

中国林蛙皮多糖类天然保湿因子的提取与鉴定

采用复合酶解法从中国林蛙皮中分离提取出天然保湿因子,并采用红外吸收光谱法对天然保湿因子进行了定性测试,采用咔唑(cabazole)法和Elson-Morgan法对天然保湿因子的含量及纯度进行了测定。结果表明:采用本研究方法分离、提纯的天然保湿因子为透明质酸(Hyaluronic acid,HA),其外观呈白色粉末状,葡糖醛酸含量43.2％,氨基葡糖含量39.7％,无臭、无味、无毒,具有强保湿性,可应用于保健食品、化妆品及眼科药物。

蛤蟆油紫外谱线组法真伪鉴别的研究

目的利用紫外谱线组法对蛤蟆油进行检测,绘制出蛤蟆油的紫外谱线组图谱。方法对蛤蟆油进行石油醚、三氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇、95%乙醇超声波提取后,再进行相应的紫外及其一阶导数光谱检测。结果蛤蟆油的紫外谱线组图谱重现性较好。结论通过紫外谱线组法,可以绘制出蛤蟆油的紫外谱线组图谱,达到蛤蟆油真伪鉴别的目的。

高压脉冲电场提取中国林蛙多糖的研究

通过单因素考察及正交试验优化了用高压脉冲电场提取中国林蛙多糖的试验条件,并与碱提取法、酶提取法以及复合酶提取法进行了比较。结果显示用0.5%KOH提取液,在电场强度为20kv/cm和脉冲数为6μs的条件下用高压脉冲电场提取林蛙多糖的提取率最大为55.59%。比较高压脉冲电场提取法与碱法、酶法以及复合酶法在林蛙多糖提取率、总糖含量方面的差异,高压脉冲电场提取的林蛙多糖提取率和总糖含量均高于其他三种方法,其提取率是复合酶法的1.77倍,总糖含量高于复合酶法6.34%,且提取物中杂质少。因此,高压脉冲电场提取多糖是一种很有希望的多糖提取新方法。

中国林蛙卵油抗士的宁惊厥的机制

目的揭示CO2超临界萃取的中国林蛙卵油(Rana temporaria chensinensis Davidegg oil,EORTCD)抗士的宁惊厥作用的机制。方法以士的宁为致惊剂,评价中国林蛙卵油抗惊厥活性的时效和量效关系。通过利血平耗竭单胺神经递质和奥单西隆阻断5-HT3受体,在士的宁致惊厥的小鼠模型中探讨中国林蛙卵油抗惊厥作用机制。结果中国林蛙卵油给予动物30 min,其抗惊厥作用效果最好。中国林蛙卵油抗惊厥作用呈现良好的剂量-效应关系;利血平耗竭单胺递质后,EORTCD对抗士的宁惊厥的效应消失;奥丹西隆阻断5-HT3受体后,再给EORTCD 1.4 g.kg-1,EOTCD的抗士的宁惊厥作用也被阻断。而高剂量组EORTCD未受奥丹西隆阻断。结论高、低剂量EORTCD抗惊厥作用可能启动不同的通路。低剂量EORTCD抗士的宁惊厥可能与5-HT3受体有关。

中国林蛙皮肤抗菌肽基因的cDNA克隆

抗菌蛋白蛙皮抗菌肽,是两栖类动物中存在的天然免疫物质,在蛙类中仍然保持着一定的活性。我们用提取中国林蛙皮肤总RNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增得到DNA片段,并与GenBank上登陆的其他蛙类的皮肤抗菌肽序列进行比较,发现此序列是一个新的蛙皮肤抗菌肽序列。PCR产物与pMD18-T连接,得到阳性重组体pMD18-RTCD,将阳性重组体进行测序,分析蛙皮素的氨基酸序列,显示它属于蛙皮抗菌肽家族。此外,中国林蛙抗菌肽氨基酸序列包含C-末端残基,同时具有两栖类动物抗菌肽的特征。这些信息对将来研究两栖类动物的天然免疫的分子机制具有重要作用,为应用基因工程技术对我国林蛙抗菌肽基因进行克隆表达奠定了基础。

紫外谱线组法在哈蟆油伪品鉴别中的应用

目的:利用紫外谱线组法对哈蟆油进行检测,绘制出哈蟆油的紫外谱线组图谱。方法:对哈蟆油进行石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇、95乙醇超声波提取后,再时行相应的紫外及其一阶导数光谱检测。结果:哈蟆油的紫外谱线组图谱重现性较好。结论:通过紫外谱线组法,可以初步绘制出哈蟆油的紫外谱线组图谱,达到哈蟆油真伪鉴别的目的。

林蛙头多糖抗凝血活性的研究

目的探讨林蛙头多糖对凝血系统的影响。方法体外实验分别测定林蛙头多糖对复钙凝血时间、凝血酶原时间、凝血酶生成时间、凝血酶活性、水解纤维蛋白,激活纤溶酶原和对血凝块的影响。体内实验采用断尾法测定出血时间,玻片法测定凝血时间。结果林蛙头多糖在体外表现出显著的抗凝血效果,其作用随着浓度的增加而增强,但没有表现出溶栓作用。在体内能延长凝血时间和出血时间。结论林蛙头多糖在体内外均有抗凝血活性。

哈蟆油基原物种DNA分子鉴定研究

目的建立一种简单、可行的蛤蟆油基原物种DNA分子鉴定方法,并为其鉴定提供有效的手段。方法以COI作为条形码序列,对蛤蟆油基原物种中国林蛙和黑龙江林蛙进行DNA提取,PCR扩增和双向测序,用CodonCode Aligner V 4.2.7校对拼接,并用MEGA6.0对其样品进行种内分析。结果实验样品可以获得蛤蟆油基原物种的序列,中国林蛙有34个碱基变异位点,种内平均K2P距离为0.042,种内最大K2P距离为0.058。黑龙江林蛙有3个碱基变异位点,种内平均K2P距离为0.003,种内最大K2P距离为0.005。结论运用COI条形码序列能够准确鉴定蛤蟆油基原物种,为其鉴定提供新方法。

长白山区中国林蛙资源及其保护与增殖

中国林蛙主要产于我国的长白山区，具有较高的经济价值。本文根据近年来的生产实践和调查研究资料，着重介绍了吉林省长白山区的中国林蛙养殖生物学特征。

一种中国林蛙抗菌肽的光谱研究

从中国林蛙皮中纯化得到了一种抗多种临床多重耐药菌的抗菌肽(RTCⅠ),初步氨基酸组成分析结果表明其不含碱性氨基酸,此抗菌肽在276·5和356·5nm波长光的激发下发射出448nm的荧光,利用傅里叶变换红外光谱、拉曼光谱、电子吸收光谱及荧光光谱等技术研究了此特定荧光产生的结构依据.此抗菌肽的主要组成是Tyr,Asn(Asp)和Glu(Gln),抗菌肽特殊的荧光光谱和电子吸收谱与Tyr的酚羟基和Asn侧链的强氢键有关.这一特殊的荧光(448nm)及圆二色谱(259,263和267nm)信号为进一步在分子水平上研究此抗菌肽的抗菌机理提供了依据.

长白山区中国林蛙野外封沟养殖技术

对东北长白山区中国林蛙野外封沟养殖技术进行了阐述。内容包括 :养殖场地的选择与基本建设、蛙卵的收集及其野外孵化、蝌蚪与变态蝌蚪的饲养、变态幼蛙的管理、林中生活管理。