局部注射VEGF对皮瓣抗菌力影响的实验研究

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)对皮瓣抗菌力的影响。方法:选用100只SD大鼠,制作背部6 cm×4 cm任意皮瓣的动物模型。术中VEGF组局部注射VEGF 1.0μg/瓣,对照组注射等量生理盐水。术后即刻注射铜绿假单胞菌。结果:术后第3天实验组bFGF阳性细胞数显著增加,术后第4天中段和远段皮瓣SDH活力明显高于对照组,术后第5天白细胞吞噬指数明显升高;细胞内杀菌率较对照组高,术后第11天皮瓣存活面积均与对照组有显著性差异(P<0.01)。同一时相内肉眼及光镜观察,实验组皮瓣各段的病理改变较轻,真皮层发现较多毛细血管,炎细胞浸润较少。电镜观察见实验组成纤维细胞和血管内皮细胞形态和功能较生理盐水对照组好。术后第11天实验组IL-1β阳性细胞数较对照组低,差异有显著意义(P<0.01)。皮瓣在100低倍镜视野计算血管密度实验组较对照组高,差异有显著意义(P<0.01)。结论:VEGF能改善皮瓣微循环、促进血管再生,有明显的促进任意皮瓣成活、抗感染作用。

任意皮瓣局部注射血管内皮生长因子对其抗菌力影响的实验研究

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)对皮瓣抗菌力的影响。方法选用60只SD大鼠,制作背部6cm×4 cm任意皮瓣的动物模型。术中VEGF组局部注射VEGF1.0μg/瓣,对照组注射等量生理盐水。术后即刻注射铜绿假单胞菌。结果①术后第5天VEGF组白细胞吞噬指数(0.12±0.02)较生理盐水对照组(0.08±0.03)高,差异有显著意义(P<0.05);细胞内杀菌率VEGF组(78.58±1.63)%较生理盐水对照组(36.17±2.31)%高,差异有显著意义(P<0.01)。②术后第11天VEGF组皮瓣存活面积为(66.06±5.05)%较生理盐水对照组(50.15±4.46)%大,差异有显著意义(P<0.01)。③同一时相内肉眼及光镜观察,VEGF组皮瓣各段的病理改变较轻,真皮层发现较多毛细血管,炎细胞浸润较少。④术后第11天皮瓣在100低倍镜视野计算血管密度,VEGF组(35.64±5.41)/cm2较生理盐水对照组(16.42±4.13)/cm2高,差异有显著意义(P<0.01)。结论VEGF能改善皮瓣微循环、促进血管再生,有明显的促进任意皮瓣成活、抗感染作用。

疏血通注射液对大鼠随意型皮瓣存活的影响

目的研究疏血通注射液对大鼠背部随意型皮瓣存活的影响。方法采用改良的大鼠McFarlane皮瓣制作方法,将Sprague Dawley大鼠随机分为疏血通实验组和生理盐水对照组,实验组每只每天腹腔注射疏血通注射液1.5mL/kg,对照组每只每天腹腔注射生理盐水1.5mL/kg。术后第7天处死大鼠分别进行皮瓣存活面积比的检测,并取皮瓣近、中、远区组织切片光镜下观察,免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果术后7d,实验组皮瓣的存活面积比为(72.52±2.23)%,对照组皮瓣的存活面积比为(50.36±2.37)%,实验组存活面积比显著高于对照组(P<0.01)。实验组中区皮瓣的组织水肿、炎症细胞浸润情况明显比对照组减轻,并且出现大量的新生血管,中区新生血管密度(27.42±4.21)个/mm2,与对照组(17.45±5.43)个/mm2差异有统计学意义(P<0.05)。实验组VEGF表达量为4731.24±448.99,对照组为2466.01±801.67,差异有统计学意义(P<0.01)。结论疏血通注射液可能通过增加VEGF表达等途径,促进皮瓣新生血管增生,改善皮瓣血供,减轻炎症反应,从而改善大鼠随意型皮瓣的存活。

一氧化氮介导VEGF对大鼠任意型皮瓣存活的影响

目的探讨一氧化氮(NO)介导血管内皮生长因子(VEGF)对任意型皮瓣存活的影响。方法按照随机数字表法将48只Wistar大鼠随机分为实验组(n=24)和对照组(n=24),48只大鼠均在其背部建立任意型皮瓣大鼠模型。实验组以左旋精氨酸作为NO供体,建模后即刻在大鼠腹腔内注射左旋精氨酸(300 mg/kg加2 ml/kg生理盐水),之后每隔24 h注射1次,直至第7天;对照组每次腹腔注射2 ml/kg生理盐水。分别应用SABC免疫组化法及HE染色检测VEGF蛋白的表达及新生血管增生情况,RT-PCR法检测VEGF mRNA的表达;应用皮瓣存活长度比皮瓣实际长度计算皮瓣存活率。结果与对照组比较,实验组胞浆染色为深棕色颗粒,分布密集,皮瓣组织血管内皮细胞内染色加深,棕色颗粒分布集中。实验组和对照组均有不同程度的微血管增生,实验组新生微血管增生更明显。建模后第1天两组皮瓣微血管计数差异无统计学意义(P>0.05);对照组建模后第7天(7.60±2.56)根/每高倍视野,实验组建模后第7天(12.82±4.17)根/每高倍视野,两组差异有统计学意义(P<0.01)。建模后第1天及第7天,实验组皮瓣组织VEGF mRNA相对表达水平均高于对照组[(0.88±0.07)vs(0.52±0.06),P<0.05;(1.74±0.12)vs(1.10±0.08),P<0.01]。术后第7天实验组大鼠皮瓣平均存活率为(74.81±5.36)%明显高于对照组的(50.10±4.17)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 NO介导VEGF的升高可以改善皮瓣移植术后的微循环,对皮瓣移植具有保护作用。

水蛭素对大鼠缺血皮瓣血运恢复与新生血管生成的影响

目的探讨水蛭素对皮瓣远端缺血组织血流灌注量及新生血管生成的影响。方法选取35只SD大鼠，每只背部构建左右缺血皮瓣，将左右皮瓣完全随机分为水蛭素组与对照组。术后即刻（Od）和术后1～3d于皮瓣近段、中段、远段各位点，水蛭素组分别皮下注射O．5U水蛭素生理盐水溶液，对照组分别皮下注射等量生理盐水，分别以激光多普勒血流成像仪、免疫组织化学法及Western印迹法检测每日皮瓣血流灌注状态、微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）和血小板应答蛋白-1（TSP-1）的表达，并于术后6d测定皮瓣成活面积。结果术后1～6d，水蛭素组皮瓣血流灌注量及VEGF表达水平明显高于对照组（P〈0．05）；术后4d水蛭素组MVD明显高于对照组（P〈0．05）；术后1～4d，水蛭素组皮瓣组织中TSP-1表达明显低于对照组（P〈0．05）；水蛭素组皮瓣成活面积显著大于对照组（P〈0．05）。结论水蛭素通过加速恢复血流灌注、调节血管生成相关因子、促进缺血皮瓣新生血管生成，从而提高皮瓣组织的成活率。