雷帕霉素对内皮祖细胞数量与功能的影响

目的观察雷帕霉素对外周血内皮祖细胞(EPCs)数量与功能的影响。方法采用密度梯度离心法从外周血获得单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板上,培养7天后收集贴壁细胞,加入不同浓度(1·0、2·0、5·0μg/ml)雷帕霉素分别培养6、12、24、48h。激光共聚焦显微镜鉴定,FITC-UEA-I和Dil-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPCs,流式细胞仪检测其表面标志以进一步鉴定EPCs,并在倒置荧光显微镜下计数。然后分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室、黏附能力测定实验和体外血管生成试剂盒来观察EPCs的增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力。结果EPCs数量随雷帕霉素浓度与作用时间增加而减少,其增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力亦随雷帕霉素浓度与作用时间增加而降低。结论雷帕霉素降低EPCs的数量、增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,并呈浓度和时间依赖性。

雷帕霉素对Colo-16细胞系Stat3表达的影响

目的研究雷帕霉素对皮肤鳞状细胞癌Colo-16细胞系Stat3表达的影响。方法用不同浓度的雷帕霉素处理Colo-16细胞,Hoechst33258荧光染色法观察凋亡细胞的形态学变化;Western-blotting法检测Colo-16细胞Stat3,P-Stat3蛋白表达水平。结果雷帕霉素能够诱导Colo-16细胞凋亡,荧光染色可见细胞核染色质凝聚、核裂解的形态学改变;在雷帕霉素作用后Colo-16细胞Stat3,P-Stat3表达显著下调。结论雷帕霉素能诱导Colo-16细胞凋亡,其作用机制可能与Stat3表达下调有关。

雷帕霉素为基础的免疫抑制剂治疗中CsA保留和撤除有效性、安全性的系统评价

目的评价雷帕霉素为基础免疫抑制剂治疗中环孢素A保留与撤除近期与远期有效性和安全性。方法采用Cochrane系统评价方法,检索Medline,EMBASE,Cochrane图书馆、VIP、CNKI电子资料。由2名评价者共同评价纳入研究质量,对同质研究进行Meta分析。结果共纳入8个研究,肾移植术后患者959例。纳入研究根据随机方法、分配隐藏和盲法描述评分,6个为B级,2个为C级。结论研究结果显示,肾移植术后病情稳定患者,以雷帕霉素为基础对免疫抑制剂治疗中环孢素A撤除,1年之内易导致急性排斥反应发生,但是对于人肾存活率影响无统计学意义,有助于肾功能恢复,撤除环孢素A组患者血胆固醇高于环孢素A保留组。但是由于纳入研究存在选择性偏倚和测量性偏倚的高度可能性,势必影响结果的证据强度,期待高质量的随机双盲对照试验提供高质量的证据。