油菜品种和资源材料对芜菁花叶病毒的抗性鉴定

在人工接种高病害压条件下,对当前生产上应用的13个油菜双低和杂交品种及14份资源材料进行了对芜菁花叶病毒(TuMV)的抗性鉴定。结果表明,参试的13个油菜品种均不抗TuMV,但感病性低于对照品种中油821。14份油菜资源材料间抗性差异显著,有3份材料表现高抗和中抗。大部分油菜推广品种表现的高发病率和病情指数表明在病害流行地区和年份,这些品种不足以抵挡病毒病造成的损失。

油菜芜青花叶病毒鉴定、提纯及血清学

通过寄主范围、粒子形态、血清学测定，鉴定出南京油菜上的两个分离物为芜青花叶病毒（ＴｕＭＶ），Ｔ－０２分离物表现为黄斑花叶型症状，称为花叶型株系（ＴｕＭＶ－ｊｍ）；Ｔ－０５为枯斑系统坏死症状，称为坏死型株系（ＴｕＭＶ－ｊｎ）。提纯研究表明，Ａ＿（２６０）／Ａ＿（２８０）为１.２２；Ａ＿（ｍａｘ）／Ａ＿（ｍｉｎ）为１.１２；粒子长度为７２０—８００ｎｍ。ＳＤＳ聚丙烯酸胺凝胶电泳测定外壳蛋白亚基的分子量为２７.５ｋｄ。还研究了外壳蛋白１７种氨基酸的含量及比例关系。以提纯ＴｕＭＶ－ｊｎ制备抗血清，研究其免疫分析方法及其与马铃薯Ｙ病毒组某些病毒的血清学关系。

用免疫电镜技术研究长叶车前花叶病毒株系的血清学关系

应用免疫吸附和免疫修饰电镜技术研究了长叶车前花叶病毒杭州株(RMvha)、油菜花叶病毒北京株(YMV15)、烟草花叶病毒上海株(TMVⅠ及TMVⅡ)、烟草花叶病毒浙江农科院番茄分离株(TMVno)等的血清学关系。以抗血清吸附的病毒量和病毒被抗血清修饰的强弱,确定各毒株间的血清学关系发现,RMVha与YMV15关系较近;TMVⅠ与TMVno有一定的血清学关系;伹RMVha、YMV15与TMVⅠ、TMVno之间的血清关系较远,其中以RMVha与TMVno关系最远。结果表明病毒被同源及异源抗血清吸附及修饰的差异可用以研究不同TMV、RMV间的血清关系。

用感染病毒细胞超微结构的差异区分RMV及TMV株系

通过透射电镜观察被长叶车前草花叶病毒(RMV)和烟草花叶病毒(TMV)不同株系感染的普通烟叶肉细胞的超微结构,发现两种病毒的粒子分布、内含体类型、被感染细胞超微结构的病变均存在差异.病毒粒子分布有成束、分散、环状、膜包被及角状成层或平行成层排列等类型,存在于细胞质及液泡中,但未见于细胞核、线粒体及叶绿体等细胞器中.内含体的X-小管形状有长杆状、短杆状及颗粒状,数量各异.细胞壁常引起增厚、结构松散及扭曲等变化.叶绿体聚集成堆或分布于细胞边缘,其数量、大小、形状及所含淀粉粒、嗜锇颗粒等存在差异,有些还有颗粒状物质积累.线粒体及内质网等在不同株系间也存在差异.本项研究表明,被感染细胞超微结构的差异可作为RMV和TMV株系区分的依据.

油菜芜菁花叶病毒株系鉴定

芜菁花叶病毒是引起我国油莱病毒病的主要毒原。在我国南方冬油菜产区采集了数百个芜菁花叶病毒(TuMV)病株样品,经寄主鉴定和毒原纯化后,选择具有代表性的分离物30个,通过Provvidenti的一套鉴定品种进行株系鉴定,并用酶联免疫吸附测定(ELISA)双抗体夹心法检测以及寄主范围试验,鉴定出三个不同株系即TuMV—CRL、TuMV—CR2和TuMV—CR3。除TuMV—CR3与Provvyidenti,R.在纽约和Green,S.K.在台湾对十字花科蔬菜上TuMV鉴定的五个株系中的TuMV—C1株系相同外,余均不同;与我国以往各地对十宇花科作物上TuMV株系鉴定的结果比较,由于国内鉴定工作未用此同样的鉴定方法进行鉴定,因此尚不能肯定油菜上的三个株系与国内已经鉴定的十字花科蔬菜上的株系的异同。

99植宝控制油菜病毒病(Tumv)试验初报

选用国家专利产品 99植宝 ,对人工接种的油菜病毒病 (Tumv) ,从发病初期开始用不同浓度叶面喷雾 2～ 3次 ,以 30 0倍 5 0 0倍液最好 ,30 0倍盆栽防制效果 87 5 %～ 89 9% ,大田 85 1%～ 92 3% ;5 0 0倍盆栽 75 %～ 84 8% ,大田 88 5 %～ 90 9% ,均与空白对照差异显著 ,效果等于或略好于对照药病毒王 30 0倍、5 0 0倍液。

番茄乌心果病病原的进一步研究

对番茄乌心果病病原进行深入的研究表明,温室中栽培的番茄,在用番茄乌心果病的汁液摩擦后,出现了与田间乌心果病相同症状。从而进一步证实长叶车前草花叶病毒(Ribgrass Mo-saic Virus(RiMV))是番茄乌心果病的病原之一。通过调查发现,该病害已在中国许多地区发生。

油菜的车前草花叶病毒

在油菜病毒病病株标样中,有一类分离物寄主范围广,能侵染除菜豆、黄瓜以外所有的供试寄主(39种)。在普通烟草(黄苗榆品种)和心叶烟上引起局部枯斑病状,在长叶车前草上呈轻花叶病状,对十字花科植物有较强的侵染力。采用车前革病毒(RMVsh)的Balb/c小鼠腹水抗体,在琼脂双扩散试验中只能与本分离物形成一条清晰的沉淀线。经鉴定该分离物为车前草花叶病毒。

油菜花叶病毒的研究进展及其防治

油菜花叶病毒是一种能够侵染十字花科、茄科、葫芦科等植物的植物RNA病毒,其属于烟草花叶病毒属的亚属Ⅲ型病毒。油菜花叶病是油菜的主要病毒病害,在我国各大油菜产区均有分布,每年因此造成较大经济损失。研究油菜花叶病毒对缓解油菜病毒病及其他蔬菜病毒病害的防治有重大意义。本文详细介绍ORMV-SX、ORMV-Wh、ORMV-Sh、ORMV-Br四种类型油菜花叶病毒,并对油菜花叶病毒的防治进行总结。

油菜花叶病毒Wh株系的鉴定

依据病毒的寄主植物反应、血清学性质和 RNA 3′末端含 cp 和 mp 基因1554 bp cDNA 片段序列分析,明确一个侵染油菜的烟草花叶病毒属 Tobamovirus 病毒分离物是油菜花叶病毒(Oilseedrape mosaic virus,ORMV)的一个株系,定名为 Wh 株系。ORMV-Wh 侵染油菜、白菜和大白菜等十字花科的作物,初期产生典型明脉症状,对辣椒、番茄和烟草等茄科植物致病性弱;血清学与烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)有明显差异。ORMV-Wh mp、cp 基因和3′UTR 区段大小分别为798、474和235个核苷酸,mp 和 cp 基因有77个核苷酸重叠;与 TMV 序列同源性在60％以下,与侵染十字花科 Tobamovirus 属病毒株系序列同源性在80％以上;其中与 ORMV 的不同株系 RMV-CAB、RMV-Sh、YoMV、YoMV-Cg 和 CTMV-W 的同源性在90％以上。

油菜花叶病毒武汉株系基因组全序列分析

油菜花叶病毒(Oilseed rape mosaic virus,ORMV)武汉株系(Wh)基因组全序列分析表明,该株系基因组全长6 301nt,与烟草花叶病毒属(Tobamovirus)亚组Ⅲ病毒基因组结构相似,含4个开放阅读框架(open reading frame,ORF),ORF 2与ORF 3有77 nt的重叠区。与该属其他病毒对应ORF的核苷酸及编码蛋白氨基酸序列比对,ORMV-Wh与亚组Ⅲ的ORMV、车前草花叶病毒上海株系(Ribgrass mosaic virus,RMV-Sh)、车前草花叶病毒凤仙花株系(RMV-Imp)和烟草花叶病毒十字花科和大蒜株系(Tobacco mosaic virus,TMV-Cg)一致性最高,均超过95%。4种蛋白的氨基酸序列系统进化树构建将Tobamovirus亚组Ⅲ株系分为3个群,ORMV-Wh归为ORMV代表的株系群。

长叶车前花叶病毒上海株(RMVsh)外壳蛋白基因的克隆、序列分析及原核表达

长叶车前花叶病毒上海分离株 (RMVsh)是从上海郊区的青菜 (Brassicachinensis)上分离鉴定的 .以提纯的病毒为材料 ,SDS 酚法纯化的基因组RNA作为模板 ,通过RT PCR方法克隆了该病毒的外壳蛋白基因(CP) .DNA序列测定结果表明 ,外壳蛋白基因全长 4 74个碱基 ,编码 15 7个氨基酸 .将CP基因插入原核表达载体pBAD/His C中 ,转化E .coliTop10后 ,诱导表达 ,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析呈一特异性的蛋白条带 .West ernblot检测表明 ,表达产物与RMVsh抗血清呈阳性反应 .RMVshCP基因的核苷酸序列及氨基酸序列与烟草花叶病毒属中其他能侵染十字花科作物的成员相比 ,同源率分别为 83.5 %～ 98.9%和 87.9%～ 99.4 % ,并讨论了RMVsh的分类地位为烟草花叶病毒属侵染十字花科植物