莱菔子提取物基于PI3K/AKT信号通路改善糖尿病牙周炎大鼠炎症反应的作用研究

目的探究莱菔子提取物在糖尿病牙周炎大鼠模型中对牙周炎症的改善作用并分析其与PI3K/AKT信号通路之间的关联性。方法40只SD雄性大鼠随机等量分为5组:空白对照组(N组)、牙周炎模型组(P组)、牙周炎莱菔子治疗组(P+Q组)、糖尿病牙周炎模型组(DP组)、糖尿病牙周炎莱菔子治疗组(DP+Q组)。除N组外,其余4组大鼠均通过口腔正畸丝牙周结扎法与菌液涂布法联合建立牙周炎模型;DP组和DP+Q组辅以一次性腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病牙周炎模型。建模成功后,P+Q组和DP+Q组通过灌胃给药的方式分别给予莱菔子提取物2.5g/(kg·d),N组、P组和DP组则给予等量生理盐水。连续给药8周,过程中观察大鼠一般状况并跟踪大鼠的空腹血糖变化。给药结束后处死取材,处死前记录大鼠牙龈指数、龈沟出血指数;记录牙槽骨吸收高度;利用酶联免疫吸附法检测血清中白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α水平;采用苏木精-伊红染色观察并比较大鼠牙周组织病理形态变化;运用Western blot法测定大鼠牙周组织中PI3K/AKT信号通路中相关蛋白的表达水平。结果P组和DP组白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α水平显著高于N组,DP组白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α水平显著高于P组(P<0.05)。P+Q组和DP+Q组白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α水平分别低于P组和DP组(P<0.05)。DP组PI3K、AKT表达量显著低于N组(P<0.05)。DP+Q组PI3K、AKT表达量显著高于DP组(P<0.05)。结论莱菔子提取物可基于PI3K/AKT信号通路改善糖尿病牙周炎大鼠炎症反应,保护牙周组织。

炒莱菔子中萝卜苷与芥子碱乙醇提取工艺的优选

目的对炒莱菔子中萝卜苷与芥子碱的乙醇提取工艺进行优选。方法对炒莱菔子脱脂处理后,以萝卜苷与芥子碱提取率为指标,单因素考察结合正交试验优选脱脂炒莱菔子萝卜苷与芥子碱的乙醇提取工艺。结果确定乙醇取提工艺为75%乙醇,12倍量,提取2次,每次2 h。结论优选的醇提工艺对脱脂炒莱菔子中萝卜苷与芥子碱的提取率均达到80%以上,工艺稳定可行。

正交试验法优选莱菔子水溶性生物碱提取工艺

目的优选莱菔子水溶性生物碱的提取工艺。方法以80%醇浸出物得率和莱菔子水溶性生物碱的雷氏盐沉淀量为考察指标,对加水量、提取次数、提取时间3个因素进行正交试验。结果通过正交试验优化确定的提取条件为:药材以10倍水提取3次,每次1.5 h。结论优选确定的工艺可用于提取莱菔子水溶性生物碱。

莱菔子化学成分研究

目的：研究莱菔子的化学成分。方法：利用多种色谱技术对莱菔子中化合物进行分离、纯化,通过理化性质测定、光谱分析等鉴定其结构。结果：从莱菔子乙醇提取物中分离鉴定出10个化合物,分别为：β-谷甾醇（1）、2-O-β-D呋喃果糖基-α-D-异吡喃糖酯（2）、反式-芥子酸乙酯（3）、3,4-二羟基-2-氧-吲哚-3-乙腈（4）、反式-芥子酸（5）、4-羟基-3-吲哚醛（6）、β-D-（3-芥子酰基）果糖基-α-D-（6-芥子酰基）葡萄糖苷（7）、阿魏酸（8）、反式-芥子碱硫氰酸盐（9）、5-羟甲基糠醛（10）。结论：化合物4、6为首次从莱菔子中分离得到。

辽宁产莱菔子化学成分研究

对辽宁产莱菔子的化学成分进行研究,并对分离得到的化合物进行结构鉴定。采用硅胶、ODS和LH-20等柱色谱以及半制备HPLC对莱菔子的正丁醇部位进行分离纯化。分离得到8个化合物,通过谱学数据鉴定为蔗糖(Ⅰ),胡萝卜苷(Ⅱ),腺苷(Ⅲ),芥子酸(Ⅳ),莱菔硫苷(Ⅴ),邻羟基苯甲酸(Ⅵ),S-6-(methysul-finyl)-3-thiazinan-2-thione(Ⅶ),β-D-(3-芥子酰基)果糖基-α-D-(6-芥子酰基)葡萄糖苷(Ⅷ)。结论:化合物Ⅲ和Ⅵ为首次从莱菔子中分离得到。

炒莱菔子中萝卜苷提取工艺的优化

目的：优选炒莱菔子中萝卜苷的提取工艺。方法：以提取时间、提取次数和加液量为考察因素,以萝卜苷提取率为评价指标,在单因素试验基础上,通过正交试验优化炒莱菔子中萝卜苷的提取工艺。结果：炒莱菔子中萝卜苷的提取工艺为加水20倍量,提取3次,每次15 min,萝卜苷提取率为3.876%。结论：该方法稳定可行,可用于炒莱菔子中萝卜苷的提取。

超声辅助低共熔溶剂提取莱菔子中萝卜硫素的工艺优化及其铜绿假单胞菌生物膜抑制活性研究

目的采用超声辅助低共熔溶剂(deep eutectic solvents,DESs)提取莱菔子中的萝卜硫素,并对其提取工艺、提取效率、溶剂回收利用率及其对铜绿假单胞菌生物膜抑制活性进行研究。方法采用响应面法(response surface methodology,RSM)实验优化莱菔子中萝卜硫素提取工艺,并结合大孔树脂吸附法回收DESs。结果由氯化胆碱和乳酸合成的DESs具有最高提取率,经响应面实验优化后,在乳酸与氯化胆碱物质的量比3.16∶1、含水量40.82%、液料比20.96∶1、超声时间39.94 min、超声温度40℃、超声功率400 W下,萝卜硫素的提取率高达22.20 mg/g,回收实验表明,回收后的DESs重复提取的萝卜硫素提取率达20.92 mg/g,回收利用率为95.05%。此外,铜绿假单胞菌生物膜抑制实验表明,在256μg/mL质量浓度下,莱菔子DESs提取物的生物膜抑制率为53.84%。结论DESs作为提取介质具有高效、绿色环保及可重复利用等优点,可用于莱菔子中萝卜硫素的提取,同时,DESs作为提取介质应用于其他中药有效成分的提取提供了新思路。

炒莱菔子饮片质量与萝卜苷含量分析

目的:考察10地市售炒莱菔子饮片质量并进行萝卜苷含量测定。方法:采用HPLC和重量法对10地市售炒莱菔子饮片萝卜苷含量和杂质,水溶性浸出物含量进行测定,并按《中国药典》检测了水分与醇溶性浸出物含量。结果:供试饮片中萝卜苷含量为8.02%～3.35%,杂质在0.3%～3.46%,水浸出物含量在17.32%～18.59%,水分与浸出物基本合格。结论:莱菔子饮片质量标准宜增加杂质检测和萝卜苷含量测定项,以有效控制其饮片质量。

脱脂炒莱菔子提取物HPLC指纹图谱

目的：建立脱脂炒莱菔子提取物的HPLC指纹图谱.方法：依利特C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相乙腈（A）-0.1％磷酸水溶液（B）,梯度洗脱（0～28 min,5％～30％A;28 ～30 min,30％～70％A;30 ～51 min,70％～88％A）,流速1.0 mL· min-1,检测波长225 nm,柱温30℃.结果：建立了脱脂炒莱菔子提取物的HPLC指纹图谱,共标示出10个共有峰;不同产地脱脂炒莱菔子提取物的HPLC指纹图谱相似度＞0.96.结论：该方法准确稳定,重复性好,可为脱脂炒莱菔子提取物的定性鉴别提供依据.

炮制与用法对莱菔子-苦杏仁药对中总成分及芥子碱溶出的影响

目的：探讨炮制、粉碎、分煎与合煎对莱菔子、苦杏仁及其药对中水、醇溶性总成分，芥子碱，脂肪油溶出的影响。方法：采用HPLC测定芥子碱溶出量，流动相乙腈-0．1％磷酸水溶液（15：85），检测波长326nm；重量法测定水、醇溶性浸出物及脂肪油溶出量。利用GC—MS技术鉴定苦杏仁脂肪酸组成及含量，DB-5石英毛细管色谱柱（0．25mm×30m），进样口温度230℃，气化室温度270℃，分流比50：1，程序升温（100～180℃，10℃·min^-1；180～200℃，4℃·min^-1；200～220℃，1℃·min^-1；220～270℃，5℃·min^-1），MS条件为EI离子源，70eV，扫描范围m／z30～500。结果：炮制有利于样品总成分及芥子碱的溶出，其中水溶性成分溶出最高增加9．61％，醇溶性成分141．03％，芥子碱20．00％；粉碎后样品中水、醇溶性成分与芥子碱的溶出量分别增加了0．36～1．85，38．41～62．06，1．40～2．60倍；分煎与合煎对样品中水、醇溶性成分溶出无明显影响，芥子碱溶出量合煎后降低45．16％～68．75％。结论：种子类中药如不粉碎不宜采用醇提取或入酒剂，粉碎能显著增加所测成分的溶出量，莱菔子和苦杏仁合煎不利于莱菔子中芥子碱的溶出。依法炮制与合理使用相结合才能确保中药疗效。