快速LacZ检测法提高酵母双杂交试验的敏感度

目的 :建立快速简单敏感准确的LacZ检测法。方法 :将在SD/ -Trp -Leu培养液中过夜培养的待检测酵母菌直接点样在滤纸上进行LacZ检测 ,筛选出LacZ阳性克隆。结果 :将小鼠 3T3文库转化含有WWP1的酵母菌 ,选出 10个较大的SD/ -Trp -Leu -His培养阳性的克隆 ,利用快速LacZ检测法检测这 10个酵母克隆 ,结果在 5h内不同程度地变蓝 ,呈阳性结果 ;而作为对照的传统检测方法在 8h内的检测结果均显示为阴性。结论 :采用快速LacZ检测法检测蛋白质之间的相互作用可以大大缩短筛选的时间 ,简化筛选的步骤 。