页岩气生产液细菌计数方法对比研究

针对部分油气田服务企业以平板计数法、ATP荧光快速检测法代替绝迹稀释法(MPN)进行页岩气生产液中细菌含量检测的现象,将这三种细菌计数方法对相同样品的测定结果进行了对比研究。平板计数法与ATP荧光法操作均比MPN法简便,但是对于页岩气生产液,这两种方法均存在检测出的细菌类型不明确、计数结果不准确、线性关系差等缺点。平板计数法检测出的细菌主要为好氧或耐氧菌腐生菌,无法检测和鉴别与腐蚀密切相关的硫酸盐还原菌。ATP荧光法通过总菌的ATP含量换算得到细菌含量,该法目前更多用于医疗与食品行业的限制类细菌含量的快速检测,尚无明确标准可依,且无法区分菌体的死活。而MPN法可通过鉴别培养基将与腐蚀相关的硫酸盐还原菌(SRB)、铁细菌(IB)和腐生菌(TGB)分别培养后计数,且其检测限远低于另外两种方法,因此更适用于页岩气生产液中特定腐蚀菌种的检测。

微生物快速计数方法及其在化妆品检验中的应用分析

国内外的化妆品菌落总数检验标准方法基本一致,采用的是经典的平板计数法,该方法操作简单,但完成微生物检验过程所需的时间较长。随着微生物学技术的发展,逐渐开发出了基于各种原理的微生物快速计数方法。通过对比平板计数法和各种微生物快速计数方法在微生物检测中的优缺点,综合考虑检验时间、检验准确性以及微生物快速计数方法在化妆品微生物检验中的可行性,得出荧光显微镜计数法和流式细胞仪计数法在化妆品菌落总数检验中具有潜在的应用价值。荧光显微镜计数法和流式细胞仪计数法通过直接计数样品中的微生物数量,检验时间较短;不需要进行微生物培养,无需考虑化妆品中的防腐剂对微生物生长的抑制性,检验准确性较高。将微生物快速计数方法纳入化妆品菌落总数检测标准体系中,作为现行标准的补充,在化妆品菌落总数检验中具有重要的意义。

3M Petrifilm^(TM)快速测试片用于饮料中菌落总数的测定

使用3M Petrifilm^(TM)快速测试片法(3M测试法)和滤膜法对饮料中的菌落总数进行定量测定,分析两种方法的一致性程度。选用大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、爱媛类芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、Asia Siamensis、白色念珠菌和黑曲霉七种菌,对饮料样本进行人工接种并测试。实验结果显示,对于不同菌株及不同污染水平的测试,3M测试法和滤膜法的线性拟合度较好(决定系数R^(2)均>0.95)。且3M测试片法结果回收率均>70%,RSD值(2.9%~34.3%)也均在2020《中国药典》的规定范围内,说明3M测试片法的准确度及精密度较好。对于细菌、真菌分别污染的专属性检验和不同批次的3M测试片的重复性测试中,3M测试片法的回收率>70%,且RSD值(3.6%~34.3%)均在可接受范围之内,表现出良好的专属性和重现性。使用相对正确度和精度剖面分析方法对3M测试片法和滤膜法的结果进行分析,结果显示两种方法具有较好的一致性和等效性。综合以上分析结果,3M测试片法可等效于滤膜法,进行饮料中的菌落总数测定。

Soleris微生物快速检测系统在巴氏杀菌乳中的应用验证

[目的]为了验证Soleris微生物快速检测系统对巴氏杀菌乳中大肠菌群快速检测的时效性,以提高公司巴氏杀菌乳产品的出货时效。[方法]对Soleris微生物快速检测系统和传统国标平板计数法检验巴氏杀菌乳中的大肠菌群的检测结果进行对比验证。[结果]通过实验得出Soleris微生物快速检测系统只需要13.5 h即可出结果,比传统国标方法检出时间大大缩短。[结论]在适宜的条件下,当产品中含有大肠菌群阳性样时,Soleris微生物快速检测系统均能在较短的时间内检出,产品中大肠菌群含菌量越大,检测时间越短,并且与传统国标平板计数法具有良好的一致性,是一种可行的大肠菌群检测方法。

雪茄烟叶中霉菌快速计数测试片的筛选及主要霉菌种类的鉴定

为明确引起雪茄烟叶霉变的主要霉菌种类,并筛选出适用于霉菌快速计数的测试片,分析了市售陆桥ET005、默克MC-Media、环凯HP003、3M 70200775800、美正LR10035种霉菌快速测试片在霉变雪茄烟叶中的计数效果,并采用平板计数法比对分析5种测试片检测结果的可信度及测试周期。同时对主要霉菌进行分离和纯化,并采用形态学、ITS测序和MALDI-TOF MS相结合的方法进行菌种鉴定。结果表明:霉菌快速计数测试片法检测结果略低于平板计数法,但其操作简单,判读清晰。其中,美正霉菌快速测试片综合检测效果最好,可满足日常检测的需要。引起雪茄烟叶霉变的霉菌具有多样性,曲霉属(Aspergillus sp.)是引起雪茄烟叶霉变的主要菌属,土曲霉(Aspergillus terreus)和黄曲霉(Aspergillus flavus)均可引起雪茄烟叶霉变。

3M^(TM) Petrifilm^(TM)快速菌落总数测试片法与食品中菌落总数检测国标方法(GB 4789.2-2010)的比较

目的比较3M^(TM) Petrifilm^(TM)快速菌落总数测试片(RAC)法与食品中菌落总数检测国标方法(GB 4789.2-2010)检测熟肉样品、人工污染熟肉样品中的菌落总数结果的一致性。方法分别用两种方法对129份熟肉样品和166份人工污染熟肉样品进行菌落总数项目检测,并对3M^(TM) Petrifilm^(TM)快速菌落测试片法与国标方法的实验结果进行配对资料t检验、线性回归分析以及对数值差值绝对值(|dlog|)汇总分析。结果第一部分:两种方法检测熟肉样品、人工污染熟肉样品的菌落总数检测结果t=1.5704、P=0.1188,差异无统计学意义;相关系数R2值分别为0.897、0.964;|dlog|≤0.500所占百分比分别为97.7%、100.0%。第二部分:两种方法检测295份样品,t=1.1336,P=0.2586;相关系数R2=0.992;|dlog|≤0.500的结果百分率为99.0%。结论在检测熟肉样品、人工污染熟肉样品时,3M^(TM) Petrifilm^(TM)快速菌落总数测试片法与国标方法检测结果的一致性较好。

Petrifilm^(TM)快速霉菌酵母测试片法与GB 4789.15—2016在酸奶检测中的比较

目的比较Petrifilm^(TM)快速霉菌酵母测试片(RYM)法和GB 4789.15—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数》测定质控样品、标准菌株及野生菌株、酸奶样品和人工污染酸奶样品中霉菌和酵母计数的一致性,研究Petrifilm^(TM)RYM法的特异性。方法选取2份霉菌和酵母计数质控样品、78株霉菌和酵母标准菌株及野生菌株、50份酸奶样品和50份人工污染酸奶样品,利用两种方法进行霉菌和酵母计数的测定,检测结果通过配对资料t检验以及对数值差值绝对值(|dlog|)汇总分析进行统计;同时利用Petrifilm^(TM)RYM法检测15株非霉菌和酵母菌株,考察Petrifilm^(TM)RYM的特异性。结果两种方法对质控样品、标准菌株及野生菌株、酸奶样品和人工污染酸奶样品检测结果的配对t检验均P>0.05,差异无统计学意义;|dlog|≤0.50占比均为100.0%,表明两种方法的检测结果一致性较好。Petrifilm^(TM)RYM法检测非霉菌和酵母菌株,结果显示没有菌落出现,表明Petrifilm^(TM)RYM具有良好的特异性。结论 Petrifilm^(TM)RYM法和GB 4789.15—2016对质控样品、标准菌株及野生菌株、酸奶样品和人工污染酸奶样品中霉菌和酵母计数的检测结果一致性较好,且Petrifilm^(TM)RYM具有良好的特异性。

快速霉菌酵母测试片法与GB 4789.15—2016在3种类型食品中霉菌计数比较

目的比较快速霉菌酵母测试片(RYM)法和GB 4789.15—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数》方法(以下简称国标法)测定3种类型食品样品中霉菌计数的一致性。方法选取90份糕点、面包、饼干样品,30份含乳饮料、植物蛋白饮料、固体饮料样品,30份保健食品样品并对3种类型食品样品进行人工污染得到的人工污染样品,利用RYM法和国标法进行霉菌计数的测定,检测结果通过配对资料t检验以及对数值差值绝对值(|dlog|)汇总分析进行统计。结果两种方法对3种类型食品样品以及人工污染样品检测结果在统计学意义上无显著性差异(P>0.05);|dlog|≤0.50占比均为100.0%,表明两种方法的检测结果一致性较好。结论RYM法和国标法对3种类型的食品样品及其人工污染样品中霉菌计数的检测结果一致性较好。

大肠菌群测试片中冷水可凝凝固剂初步研究

与国标倾注培养法比对,研究自制冷水可凝凝固剂(XGP)的胶体性能,评价其作为大肠菌群测试片凝固剂的可行性.对XGP的保水性能、pH值、微生物分解利用程度和抑菌效果进行研究,组装成测试片后进行特异性、灵敏度和食品样品检验.研究结果显示,XGP对10种试验菌株均无抑制作用,pH为中性,在短时间(5 d)内不支持微生物生长,不易被分解利用.与国标倾注培养法相比,其具有良好的保水性能(P<0.05),所检出的大肠菌群菌落数、灵敏度及食品样品阳性检出率差异均无统计学意义(P>0.05).XGP具有特异性强、灵敏度高及经济性好等优良特性,可作为培养基载体应用于大肠菌群测试片中.

液体食品中菌落总数快速检测的初步研究

目的:建立液体食品中菌落总数快速检测基本方法,缩短检测时间。方法:采用ATP生物发光技术,对菌落总数进行快速检测。结果:将ATP生物发光快速检测技术应用于液体食品的快速检测,显著提高了检测效率,同时ATP生物发光法与平板计数法有良好的相关性。结论:该项研究成果可直接应用于快速检测液体食品中菌落总数指标。