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HPV16/18感染导致宫颈癌的分子机制研究
被引量:
11
1
作者
苗小艳
孔繁斗
+2 位作者
石敏
李超华
赵春艳
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2015年第10期1152-1155,共4页
目的探讨高危型HPV16/18感染对宫颈组织中抑癌基因Rap1GAP的影响,揭示HPV16/18感染导致宫颈癌的分子机制。方法收集因子宫肌瘤手术切除的正常宫颈组织20例和宫颈癌组织20例。检测HPV16/18感染情况后,Trizol法提取组织总RNA,RT-PCR检测...
目的探讨高危型HPV16/18感染对宫颈组织中抑癌基因Rap1GAP的影响,揭示HPV16/18感染导致宫颈癌的分子机制。方法收集因子宫肌瘤手术切除的正常宫颈组织20例和宫颈癌组织20例。检测HPV16/18感染情况后,Trizol法提取组织总RNA,RT-PCR检测组织中Rap1GAP mRNA;提取基因组DNA,PCR检测Rap1GAP第11和19号外显子(E11、E19)。SPSS 18.0软件进行统计学分析。结果 (1)正常宫颈组织中,不论是否HPV16/18感染,均能检出Rap1GAP mRNA,检出率为100%。宫颈癌组织中,HPV16/18感染标本Rap1GAP mRNA的检出率为0%,未感染标本检出率为60%,HPV16/18感染和Rap1GAP mRNA检出率呈负相关(P<0.05)。(2)正常宫颈组织和宫颈癌中E11、E19的检出率均分别为100%、90%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。宫颈癌HPV16/18感染标本E11和E19的检出率均为87%,未感染标本检出率均为100%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HPV16/18感染下调Rap1GAP mRNA表达可能是其导致宫颈癌的机制之一。
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关键词
HPV16/18
宫颈癌
Rap1GAP
原文传递
HPV16 E6对HeLa细胞中Rap1GAP蛋白水平下调的研究
被引量:
1
2
作者
苗小艳
孔繁斗
+4 位作者
孙悦
李岩
李超华
魏巍
赵春艳
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2015年第5期527-530,538,共5页
目的探讨HPV16E6对细胞中Rap1GAP蛋白水平的影响,为阐明宫颈癌发生发展的分子机制提供实验依据。本研究组前期实验显示,宫颈癌石蜡切片组织中Rap1GAP蛋白水平下降,且与高危型HPV16/18感染相关。本文将进一步探讨HPV16 E6是否导致Rap1GA...
目的探讨HPV16E6对细胞中Rap1GAP蛋白水平的影响,为阐明宫颈癌发生发展的分子机制提供实验依据。本研究组前期实验显示,宫颈癌石蜡切片组织中Rap1GAP蛋白水平下降,且与高危型HPV16/18感染相关。本文将进一步探讨HPV16 E6是否导致Rap1GAP蛋白下调的原因。方法通过将HPV16 E6基因插入pGEX-KG的BamHI和Hind Ⅲ酶切位点构建GST标记的HPVE6质粒,采用脂质体转染法将其转染入HeLa细胞中,Westernblot方法观察GST-tagged-HPV16 E6在HeLa细胞中的表达,并观察其对HeLa细胞中内源性Rap1GAP蛋白水平的影响。结果测序表明成功构建GST标记的HPV16E6质粒;Western blot检测表明HPV16E6在HeLa细胞中成功表达;并且发现HeLa细胞中过表达HPV16 E6后,Rap1GAP蛋白相对含量(0.602±0.205)明显低于未转染组(1.130±0.163),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论HPV16 E6下调Rap1GAP蛋白水平。
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关键词
Rap1GAP
HPV16
E6
宫颈癌
原文传递
Rap1GAP基因表达上调对HL-60细胞体内及体外侵袭能力的影响
3
作者
邱婷婷
李德鹏
+4 位作者
李振宇
徐开林
祁小飞
岑建农
陈子兴
《中华血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期570-574,共5页
目的 探讨上调Rap1 GAP基因表达对白血病细胞株HL-60细胞体外侵袭能力的影响,并构建白血病动物模型验证体外实验的结果.方法 采用实时定量PCR及Western blot法检测已构建的Venus/HL-60细胞(空载体对照组)及Rap1 GAP过表达单克隆细胞株...
目的 探讨上调Rap1 GAP基因表达对白血病细胞株HL-60细胞体外侵袭能力的影响,并构建白血病动物模型验证体外实验的结果.方法 采用实时定量PCR及Western blot法检测已构建的Venus/HL-60细胞(空载体对照组)及Rap1 GAP过表达单克隆细胞株Rap1 GAP/HL-60 (R1、R2)细胞的Rap1GAP表达水平,Transwell方法检测空载体对照组、R1、R2细胞的体外侵袭能力,实时定量PCR检测各组细胞MMP-9 mRNA表达,并通过明胶酶谱法检测MMP-2及MMP-9活性;将4周龄BALB/c裸鼠进行预处理后接种白血病细胞,观察各组裸鼠生存时间及白血病细胞在其脏器中的浸润情况.结果 R1、R2细胞的Rap1GAP表达水平分别为空载体对照组的16.2、17.3倍,侵袭率分别为(55±5)%、(59±4)%,显著高于空载体对照组的(14±4)%(P值均<0.001).R1和R2细胞的MMP-9 mRNA表达水平增加,约为空载体对照组的12.0倍.动物模型实验结果显示接种R1细胞裸鼠(R1组)生存时间为(32.00±1.85)d,R2组为(33.37±2.50)d,空载体对照组为(43.62±2.32)d,R1组和R2组裸鼠生存时间较空载体对照组缩短(P<0.05).R1组和R2组共有3只裸鼠出现脑膜组织浸润,脑膜组织扩增出Rap1GAP和MMP-9基因,空载体对照组裸鼠各脏器白血病细胞浸润不明显.结论 Rap1GAP增强HL-60细胞侵袭能力,同时伴随MMP-9 mRNA表达水平升高,裸鼠体内实验亦证实Rap1GAP提高了HL-60细胞体内侵袭力.
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关键词
HL-60细胞
基因Rap1GAP
白血病浸润
基质金属蛋白酶类
原文传递
题名
HPV16/18感染导致宫颈癌的分子机制研究
被引量:
11
1
作者
苗小艳
孔繁斗
石敏
李超华
赵春艳
机构
大连医科大学检验医学院
大连医科大学附属第一医院妇产科
出处
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2015年第10期1152-1155,共4页
文摘
目的探讨高危型HPV16/18感染对宫颈组织中抑癌基因Rap1GAP的影响,揭示HPV16/18感染导致宫颈癌的分子机制。方法收集因子宫肌瘤手术切除的正常宫颈组织20例和宫颈癌组织20例。检测HPV16/18感染情况后,Trizol法提取组织总RNA,RT-PCR检测组织中Rap1GAP mRNA;提取基因组DNA,PCR检测Rap1GAP第11和19号外显子(E11、E19)。SPSS 18.0软件进行统计学分析。结果 (1)正常宫颈组织中,不论是否HPV16/18感染,均能检出Rap1GAP mRNA,检出率为100%。宫颈癌组织中,HPV16/18感染标本Rap1GAP mRNA的检出率为0%,未感染标本检出率为60%,HPV16/18感染和Rap1GAP mRNA检出率呈负相关(P<0.05)。(2)正常宫颈组织和宫颈癌中E11、E19的检出率均分别为100%、90%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。宫颈癌HPV16/18感染标本E11和E19的检出率均为87%,未感染标本检出率均为100%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HPV16/18感染下调Rap1GAP mRNA表达可能是其导致宫颈癌的机制之一。
关键词
HPV16/18
宫颈癌
Rap1GAP
Keywords
HPV16/18
Cervical cancer
raplgap
分类号
R379 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
HPV16 E6对HeLa细胞中Rap1GAP蛋白水平下调的研究
被引量:
1
2
作者
苗小艳
孔繁斗
孙悦
李岩
李超华
魏巍
赵春艳
机构
大连医科大学检验医学院
大连医科大学第一附属医院妇产科
出处
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2015年第5期527-530,538,共5页
文摘
目的探讨HPV16E6对细胞中Rap1GAP蛋白水平的影响,为阐明宫颈癌发生发展的分子机制提供实验依据。本研究组前期实验显示,宫颈癌石蜡切片组织中Rap1GAP蛋白水平下降,且与高危型HPV16/18感染相关。本文将进一步探讨HPV16 E6是否导致Rap1GAP蛋白下调的原因。方法通过将HPV16 E6基因插入pGEX-KG的BamHI和Hind Ⅲ酶切位点构建GST标记的HPVE6质粒,采用脂质体转染法将其转染入HeLa细胞中,Westernblot方法观察GST-tagged-HPV16 E6在HeLa细胞中的表达,并观察其对HeLa细胞中内源性Rap1GAP蛋白水平的影响。结果测序表明成功构建GST标记的HPV16E6质粒;Western blot检测表明HPV16E6在HeLa细胞中成功表达;并且发现HeLa细胞中过表达HPV16 E6后,Rap1GAP蛋白相对含量(0.602±0.205)明显低于未转染组(1.130±0.163),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论HPV16 E6下调Rap1GAP蛋白水平。
关键词
Rap1GAP
HPV16
E6
宫颈癌
Keywords
raplgap
HPVI6 E5
Cervix carcinoma
分类号
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
Rap1GAP基因表达上调对HL-60细胞体内及体外侵袭能力的影响
3
作者
邱婷婷
李德鹏
李振宇
徐开林
祁小飞
岑建农
陈子兴
机构
苏州大学附属第一医院、江苏省血液研究所
徐州医学院附属医院血液科
出处
《中华血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期570-574,共5页
基金
国家重点基础研究发展计划(973)(2011cB933501)
国家自然科学基金面上项目(81070402,81170468)
+2 种基金
江苏省高校重点学科建设项目
江苏省科教兴卫工程一I盎床医学中心(zx201102)
江苏省科技厅生命健康专项(BL2012005)
文摘
目的 探讨上调Rap1 GAP基因表达对白血病细胞株HL-60细胞体外侵袭能力的影响,并构建白血病动物模型验证体外实验的结果.方法 采用实时定量PCR及Western blot法检测已构建的Venus/HL-60细胞(空载体对照组)及Rap1 GAP过表达单克隆细胞株Rap1 GAP/HL-60 (R1、R2)细胞的Rap1GAP表达水平,Transwell方法检测空载体对照组、R1、R2细胞的体外侵袭能力,实时定量PCR检测各组细胞MMP-9 mRNA表达,并通过明胶酶谱法检测MMP-2及MMP-9活性;将4周龄BALB/c裸鼠进行预处理后接种白血病细胞,观察各组裸鼠生存时间及白血病细胞在其脏器中的浸润情况.结果 R1、R2细胞的Rap1GAP表达水平分别为空载体对照组的16.2、17.3倍,侵袭率分别为(55±5)%、(59±4)%,显著高于空载体对照组的(14±4)%(P值均<0.001).R1和R2细胞的MMP-9 mRNA表达水平增加,约为空载体对照组的12.0倍.动物模型实验结果显示接种R1细胞裸鼠(R1组)生存时间为(32.00±1.85)d,R2组为(33.37±2.50)d,空载体对照组为(43.62±2.32)d,R1组和R2组裸鼠生存时间较空载体对照组缩短(P<0.05).R1组和R2组共有3只裸鼠出现脑膜组织浸润,脑膜组织扩增出Rap1GAP和MMP-9基因,空载体对照组裸鼠各脏器白血病细胞浸润不明显.结论 Rap1GAP增强HL-60细胞侵袭能力,同时伴随MMP-9 mRNA表达水平升高,裸鼠体内实验亦证实Rap1GAP提高了HL-60细胞体内侵袭力.
关键词
HL-60细胞
基因Rap1GAP
白血病浸润
基质金属蛋白酶类
Keywords
HL-60 cells
Gene,
raplgap
Leukemic infiltration
Matrix metalloproteinases
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HPV16/18感染导致宫颈癌的分子机制研究
苗小艳
孔繁斗
石敏
李超华
赵春艳
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2015
11
原文传递
2
HPV16 E6对HeLa细胞中Rap1GAP蛋白水平下调的研究
苗小艳
孔繁斗
孙悦
李岩
李超华
魏巍
赵春艳
《中国微生态学杂志》
CAS
CSCD
2015
1
原文传递
3
Rap1GAP基因表达上调对HL-60细胞体内及体外侵袭能力的影响
邱婷婷
李德鹏
李振宇
徐开林
祁小飞
岑建农
陈子兴
《中华血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
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