Ras相关的C3肉毒素底物1在草酸所致的肾小管上皮细胞氧化损伤中的作用

目的 观察Ras相关的C3肉毒素底物1（Rac1）在草酸所致的肾小管上皮细胞氧化损伤中的作用.方法 体外培养犬肾小管上皮细胞（MDCK细胞）制成爬片后,随机分为空白对照组（A组）、Rac1抑制组（B组）、草酸组（C组）、Rac1抑制＋草酸组（D组）.B组和D组分别暴露在含Rac1抑制剂NSC23766（100 μmol/L）培养液中,30 min后C组及D组分别更换为含草酸（5 mmol/L）的培养液,余对照更换为磷酸盐缓冲液（PBS）.4h后分别测定各组培养液中过氧化氢（H2 O2）浓度、乳酸脱氢酶（LDH）活性和细胞还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADPH）氧化酶活性,免疫细胞化学染色观察细胞Rac1表达,向培养液中加入草酸钙（0.75 mmol/L）15 min后在倒置显微镜下观察细胞对草酸钙结晶的黏附.结果 A组H2O2浓度、LDH活性及细胞NADPH氧化酶活性分别为（24.23±2.44） mmol/L、（0.62 ±0.06） U/ml、（1 042.83±61.00） RLU/（min＆#183; mg）;B组分别为（24.46±3.39） mmol/L、（0.56±0.06） U/ml、（1 096.67±66.12） RLU/（min＆#183; mg）;C组分别为（67.84±4.25） mmol/L、（1.71 ±0.08） U/ml、（2 852.50±105.71） RLU/（min＆#183; mg）;D组分别为（34.79±3.07） mmol/L、（0.96±0.07） U/ml、（1 118.83±57.56） RLU/（min＆#183; mg）.与A组比较,C组细胞Rac1表达增强（P＜0.05）,NADPH氧化酶活性、H2O2浓度、LDH活性明显增强（P＜0.05）,细胞对草酸钙结晶的黏附数量增多;而与C组比较,D组细胞Rac1表达降低（P＜0.05）,NADPH氧化酶活性、H2O2浓度、LDH活性均显著降低（P＜0.05）,黏附在细胞表面的草酸钙结晶数量减少.结论 草酸通过Rac1调节的NADPH氧化酶致肾小管上皮细胞氧化损伤,抑制Rac1可显著减少活性氧物质的产生及细胞损伤.

Ras相关的C3肉毒素底物1蛋白在胃癌组织中的表达和分布以及与胃癌进展的关系

目的观察胃癌组织中Ras相关的c3肉毒素底物1（Racl）蛋白的表达和分布，探讨Racl蛋白的定位与胃癌进展之间的关系。方法采用免疫组化染色法检测48例胃癌患者肿瘤组织和癌旁组织中Racl蛋白的表达和分布，采用实时荧光PCR法检测48例胃癌组织中T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1（Tiaral）和RaclmRNA的表达水平。结果48例胃癌组织中，Racl蛋白阳性表达38例（79．2％），其中31例（64．6％）定位于细胞核。48例癌旁组织中，Racl蛋白阳性表达9例（18．8％），全部定位于细胞质。Racl蛋白在胃癌和癌旁组织中的阳性表达率差异有统计学意义（u=6．43，P〈0．01），Racl蛋白在胃癌和癌旁组织中的核定位率差异亦有统计学意义（χ2=45．795，P〈0．001）。实时荧光PCR检测结果显示，Racl蛋白核定位胃癌组织中Racl和Tiaml mRNA的阳性表达率和中位数均明显高于Racl蛋白非核定位组（均P〈0．05）。Racl蛋白的细胞核定位与胃癌的分化程度、T分期以及局部淋巴结转移相关。结论在多数胃癌组织中，Racl蛋白定位于细胞核，Racl蛋白的核定位可能是Tiaml／Racl信号通路异常活化的表现，也可能预示着胃癌侵袭能力的增强。

肝细胞肝癌患者癌组织中Ras相关C3肉毒素底物1、转化生长因子β1表达变化及其意义

目的观察肝细胞肝癌(HCC)患者癌组织中Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)的表达变化,并探讨其意义。方法 73例HCC患者,均行HCC切除术,术中保留HCC组织及相应癌旁组织,采用免疫组化法检测HCC组织、癌旁正常组织Rac1及TGF-β_1,分析其与HCC临床病理特征之间的关系。应用kaplan-Meier生存曲线分析Rac1和TGF-β_1共同表达与HCC预后的关系。结果 HCC组织、癌旁正常组织Rac1的阳性表达率分别为37.0%(27/73)、20.5%(15/73),二者比较,P<0.05;HCC组织、癌旁正常组织TGF-β_1的阳性表达率分别为61.6%(45/73)、28.8%(21/73),二者比较,P<0.05。HCC组织TGF-β_1的表达与肿瘤直径、血清甲胎蛋白表达、门静脉癌栓、TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)。Rac1与TGF-β_1在HCC中的表达呈正相关(r=0.313,P<0.01),Rac1与TGF-β_1的共同高表达与HCC TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.01)。Rac1与TGF-β_1共同高表达与HCC患者的不良预后呈正相关(r=0.499,P<0.05)。结论 HCC组织中Rac1、TGF-β_1均呈高表达。Rac1、TGF-β_1共同高表达与HCC的进展及不良预后有关。

Ras相关的C3肉毒素底物1在神经嵴细胞中的作用研究进展

Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)是Rho三磷酸鸟苷(GTP)酶家族的成员,具有GTP酶活性,是多种细胞信号转导过程中的"分子开关",可参与细胞迁移、黏附、增殖及凋亡等过程。Rac1可通过调控神经嵴细胞的肌动蛋白的聚合、膜突起的形成等过程影响神经嵴细胞的迁移,进而可能与先天性巨结肠、心脏流出道缺陷等神经嵴迁移异常的疾病有关。现就Rac1的主要生物学功能及其在肠神经嵴细胞发育机制中的研究进行综述。

T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1和Ras相关的C3肉毒素底物1蛋白在骨肉瘤和良性骨肿瘤中的表达及意义

目的探讨T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1（Tiaml）和Ras相关的C3肉毒素底物1（Racl）蛋白在骨肉瘤和良性骨肿瘤组织中的表达。方法采用免疫组化卵法检测53例骨肉瘤和20例良性骨肿瘤Tiaml和Rac、I蛋白表达。结果53例骨肉瘤Tiaml和Racl蛋白阳性表达率分别为60．7％和52．8％；20例良性骨肿瘤中Tiaml和Racl蛋白阳性表达率分别为10．0％和15．0％，骨肉瘤组织和良性骨肿瘤组织Tiaml和Racl蛋白表达比较差异有统计学意义（x^2=15．203及8．505，P均〈0．05），二者在骨肉瘤组织中的蛋白表达呈正相关（γp=0．476，P〈0．05）。结论在骨肉瘤中Tiaml和Rael蛋白的过表达可能共同参与骨肉瘤的发生。

Ras相关的C3肉毒菌毒素底物1在孕期脂多糖暴露诱导子代大鼠血压升高中的作用

目的探讨Ras相关的C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)在孕期脂多糖暴露诱导子代大鼠血压升高中的作用及机制。方法 12只SD孕鼠随机均分为2组,于孕第8天、第10天、第12天接受等体积生理盐水或脂多糖(0.79mg/kg)腹腔注射,对应子代雄鼠编为对照组(n=18)和脂多糖组(n=18)。4周龄时断奶,5周龄起以袖尾法连续监测血压。16周龄每组随机选取6只进行Rac1特异性抑制剂NSC23766[4mg/(kg·d)]连续皮下注射,每周记录血压、尿钠代谢变化。20周龄时,2组各随机选取6只未接受抑制剂注射的大鼠用于连续监测血压至48周,其余处死、取材,并测定随机血糖、肌酐、尿素氮;HE及Masson染色观察肾脏病理改变;Western blot检测肾脏Rac1表达、胞浆盐皮质激素受体(c-MR)含量和核转位盐皮质激素受体(n-MR)等。结果与对照组比较,脂多糖组出生体质量较低,而20周龄体质量较高(均P<0.01)。20周龄时,与对照组比较,脂多糖组收缩压水平、肾脏Rac1表达和n-MR含量较高;而24h尿量、24h尿钠排泄量和c-MR含量较低(均P<0.01)。20周龄时,与脂多糖组比较,脂多糖+NSC23766组收缩压[(116.6±2.2)比(133.6±3.2)mm Hg]和n-MR含量(1.11±0.10比1.93±0.21)明显下降(均P<0.01);而24h尿量[(32.21±3.65)比(14.12±3.23)mL/(kg·d)]、24h尿钠排泄量[(1.44±0.22)比(0.50±0.18)mmol/(kg·d)]和c-MR含量(0.96±0.05比0.52±0.05)明显升高(均P<0.01)。结论孕期脂多糖暴露可致子代大鼠血压增高,尿钠排泄障碍,Rac1表达增高,Rac1-MR信号过度活化参与孕期脂多糖刺激诱导子代血压增高的过程。

溃疡性结肠炎患者血清Rac1、ACE2水平与肠道功能损害的相关性

目的探讨溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者血清Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)、血管紧张素转化酶2(ACE2)水平与肠道功能损害的相关性。方法选取2020年3月至2022年3月驻马店中心医院就诊的UC患者60例为病例组,依据Mayo评分将病例组分为活动期组(36例)、缓解期组(24例),同时以同期健康体检者40例为对照组。分别静脉抽取所有研究对象空腹血液,ELISA法检测血清ACE2水平;q RT-PCR检测血清中Rac1 m RNA水平;同时检测肠道屏障指标(血清二胺氧化酶、细菌内毒素、D-乳酸)水平;采用Pearson法分析UC患者血清中ACE2、Rac1 m RNA水平的相关性以及两者分别与血清二胺氧化酶、细菌内毒素、D-乳酸的相关性。结果与对照组相比,病例组血清中ACE2、Rac1 m RNA水平显著下降,二胺氧化酶、细菌内毒素、D-乳酸水平显著增加(P<0.05);与缓解期组相比,活动期组ACE2、Rac1 m RNA水平显著下降(P<0.05);Pearson法结果显示,UC患者血清中ACE2与Rac1水平呈明显正相关(r=0.390,P<0.05),且分别与二胺氧化酶、细菌内毒素、D-乳酸呈负相关(P<0.05)。结论UC患者血清中ACE2与Rac1水平呈正相关,且分别与肠道屏障指标呈负相关,检测两者水平对于评定肠道功能损害可能具有一定临床价值。

1,25二羟维生素D3对哮喘小鼠的Rac1-IL33-ILC2通路的作用

目的观察1,25二羟维生素D31,25-(OH)2-D3对哮喘小鼠Ras相关的C3肉毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,Rac1)、白细胞介素-33(IL-33)和2型固有淋巴细胞(type 2 innate lymphocytes,ILC2)的影响。方法将30只7周龄BALB/c雌性小鼠随机分为对照组、哮喘组、干预组,每组各10只小鼠,卵清蛋白混合液致敏并雾化吸入建立哮喘小鼠模型,干预组每次激发前腹腔注射1,25(OH)2-D3混合液0.08 ml,对照组和哮喘组以生理盐水代替。末次激发24 h后对小鼠肺组织中IL-33、Rac1、ILC2进行检测并比较。结果与对照组比较,哮喘组Rac1下降,IL-33水平增高,ILC2数目升高。且Rac1与IL-33、ILC2呈明显的负相关性(r=-0.954、r=-0.957,P<0.05)。干预组IL-33及ILC2数目较哮喘组显著下降,Rac1较哮喘组显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论哮喘小鼠存在Rac1下降,IL-33水平增高,ILC2数目升高的免疫变化;1,25-(OH)2-D3可能通过上调哮喘小鼠Rac1的表达,导致IL-33等细胞因子水平产生减少,进而抑制ILC2的活化、减轻哮喘的免疫炎症。

胰腺癌患者血清中RAC3基因启动子区甲基化的检测及临床意义

目的:探讨Ras相关的C3肉毒素底物3(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 3,RAC3)基因启动子区甲基化修饰与胰腺癌发生发展的相关性。方法:选择胰腺癌患者35例为观察组,健康体检者35例为对照组,采用甲基化特异性PCR法(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)分别检测两组研究对象血清中RAC3基因启动子区甲基化的状态,分析RAC3基因启动子区甲基化与胰腺癌患者临床病理特征之间的关系。结果:观察组血清中RAC3基因启动子区甲基化的检出率为77.14%(27/35),而对照组血清中未检出,观察组RAC3基因启动子区甲基化明显高于对照组(P<0.01)。进一步统计分析显示,RAC3基因启动子区甲基化与胰腺癌的大小、肿瘤病理分期、远处转移相关(P<0.05),与患者的性别、年龄、临床分级无明显相关性。结论 :RAC3基因启动子区高甲基化修饰与胰腺癌的发生及恶性进展密切相关。

Rac1和NF-κBp65的表达与非小细胞肺癌转移及预后的关系

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)和核转录因子(NF)-κBp65的表达及其临床意义。方法采用免疫组化Super Pic TureTM Polymer二步法,检测112例石蜡包埋的NSCLC组织及112例相同患者石蜡包埋的正常余肺组织Rac1和NF-κBp65的表达。结果 NSCLC组织中Rac1及NF-κBp65的表达明显高于正常余肺组织,且两者的表达强度在NSCLC组织中呈正相关(r=0.549,P<0.001)。在肿瘤不同分化程度、TNM分期及淋巴结转移情况的NSCLC患者的Rac1的表达强度差异有统计学意义;在不同TNM分期及淋巴结转移情况的NSCLC患者的NF-κBp65的表达强度差异有统计学意义;而在低分化、高分期及有淋巴结转移的NSCLC患者组织中,2种指标协同表达的现象更容易出现,且差异有统计学意义(P<0.05)。Rac1高表达组的3年生存率(35.29%)低于低表达组(79.07%);NF-κBp65高表达组的3年生存率(40.28%)低于低表达组(74.36%);Rac1与NF-κBp65共同高表达组的3年生存率(37.70%)低于仅1种蛋白高表达(61.11%)及共同低表达者(81.25%)。Rac1和NF-κBp65共同高表达及淋巴结转移是预后的不良因素(P<0.05)。结论在NSCLC组织中,Rac1和NF-κBp65的表达呈现较好的相关性,检测两者的表达会对NSCLC患者的临床病理学特征及预后起一定的提示作用。

Rac1、Cdc42在肿瘤方面的研究

近年来对Rho家族蛋白的研究进展很快,其中以RhoA、Rac1、Cdc42最为人们所关注。这些小分子量G蛋白具有GTP酶活性,参与细胞周期调控和基因转录的调节。在调节细胞骨架、细胞运动、细胞凋亡、细胞恶性转化及肿瘤的浸润、转移等方面发挥重要作用。

Tiam1-Rac1在乳腺癌组织中的表达及意义

目的探讨T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)和Ras相关的C3肉毒素底物1(Racl)在乳腺癌发生发展中的作用。方法采用免疫组化学法检测20例正常乳腺组织(正常组)、20例乳腺增生组织(增生组)及97例乳腺癌术后标本(乳腺癌组)中Tiam 1和Rac1表达。分析Tiam1和Rac1表达与乳腺癌临床病理参数的关系及二者表达的相关性。结果正常组、增生组和乳腺癌组Tiam1和Rac1表达阳性率明显高于正常组及增生组(P<0.05);Tiam 1和Rac1表达与乳腺癌组织分级、TNM分期、淋巴结转移密切相关(P均<0.01),与患者年龄、肿瘤大小、病理类型等无关;两者在乳腺癌组织中的表达呈明显正相关;其在乳腺癌组织中的共表达及其表达强度与乳腺癌的淋巴结转移密切相关。结论 Tiam1和Rac1可促进乳腺癌的转移,在此过程中可能存在协同作用。联合检测Tiam1和Rac1在乳腺癌组织中的表达及其阳性强度对于预测乳腺癌的预后具有重要意义。

Rac1和Pak1在胃癌中的表达及意义

目的:探讨胃癌组织中Ras相关的C3肉毒素底物1(Ras related C3 botulinum toxinsubstrate 1,Racl)和p21蛋白活化激酶1(p21-activated kinase 1,Pak1)蛋白的表达特点及其与胃癌侵袭、转移的关系。方法:收集60例胃癌及20例癌旁正常组织标本,采用免疫组织化学方法检测Rac1和Pak1的蛋白表达水平。结果:在胃癌组织中Rac1和Pak1的表达阳性率均高于周围正常组织(P<0.05);Rac1和Pak1的表达呈正相关(r=0.383,P<0.01),它们的表达均与肿瘤分化程度、浸润深度、Lauren分型和有无淋巴结转移有关。结论:Rac1和Pak1的表达与胃癌浸润、转移密切相关,并有可能作为反映其生物学行为的一种新型标志物。

HIF-1α和Rac1在肝细胞癌中的表达及其意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和Ras相关的C3肉毒底物1(Racl)在肝细胞癌中的表达及其临床意义。方法选取正常肝组织20例、肝硬化组织42例及肝细胞癌组织58例,应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法检测组织中HIF-1α和Racl蛋白的表达,分析其表达与临床病理特征的关系,并结合临床资料进行分析。结果 HIF-1α主要为胞核或胞浆着色,Rac1为胞浆着色。HIF-1α蛋白在正常肝组织中的阳性表达率为0.0%(0/20),肝硬化组织为45.2%(19/42),原发性肝癌组织为81.0%(47/58),其中高分化阳性表达率为53.3%,中分化为83.3%,低分化为100.0%。HIF-1α蛋白在原发性肝癌发生、发展中的表达依次升高(P<0.05)。且原发性肝癌组织中HIF-1α蛋白表达与淋巴结转移有关。Rac1蛋白表达在正常肝组织中的阳性表达率为0.0%(0/20),癌旁肝硬化组织为40.5%(17/42),原发性肝癌组织为77.6%(45/58),其中高分化阳性表达率为60%,中分化为73%,低分化为94.7%。Rac1蛋白在肝癌发生、发展中的表达依次升高(P<0.05)。肝癌组织Rac1蛋白表达与淋巴结转移有关。HIF-1α蛋白的阳性表达率与Rac1蛋白的阳性表达率呈正相关(P<0.05)。结论 HIF-1α、Rac1与原发性肝癌癌变及进展有关,联合检测两者蛋白的表达有助于判断肝癌的病变程度及预后。

胃癌组织中RAC1的表达变化与临床病理特征及预后的关系

目的探讨胃癌组织中RAC1的表达变化与临床病理特征及预后的关系。方法从癌症基因组图谱(TCGA)下载RNA表达谱和胃癌患者的临床数据,纳入胃癌样本386份,其中配对样本27对,分析RAC1 mRNA的表达与患者临床病理特征及预后的关系。收集62份胃癌及其配对正常胃黏膜石蜡标本,制备组织芯片;购买组织芯片1张,包含90份胃癌及其配对的癌旁正常胃黏膜组织样本。用RNAscope技术检测芯片中RAC1 mRNA表达,用免疫组化法检测胃癌及其配对正常胃黏膜组织活性RAC1(RAC1-GTP)蛋白表达,分析RAC1 mRNA及RAC1-GTP蛋白表达与患者临床病理特征、预后的关系。结果TCGA数据库中胃癌组织中RAC1 mRNA相对表达量高于癌旁正常胃黏膜组织(P<0.05),RAC1 mRNA表达变化与胃癌发病部位、浸润深度有关(P均<0.05),与生存期无关(P>0.05)。胃癌组织中RAC1 mRNA高表达率高于癌旁正常胃黏膜组织(P<0.05),RAC1 mRNA的表达变化与患者性别、年龄及肿瘤发生部位、最大径、分化程度、浸润深度、病理分期、脉管侵犯、淋巴结转移均无关(P均>0.05)。胃癌组织中RAC1-GTP蛋白高表达率高于癌旁正常胃黏膜组织(P<0.05),RAC1-GTP蛋白表达变化与胃癌浸润深度、病理分期、脉管侵犯、淋巴结转移有关(P均<0.05)。RAC1-GTP蛋白低表达、高表达患者的中位生存期分别为80、20个月,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析显示,胃癌患者预后与肿瘤分化程度、浸润深度、病理分期、脉管侵犯、淋巴结转移及RAC1-GTP蛋白表达有关(P均<0.05);多因素Cox回归分析显示,肿瘤病理分期高、RAC1-GTP蛋白高表达是胃癌预后不良的独立风险因素(P均<0.05)。结论胃癌组织中RAC1 mRNA及RAC1-GTP高表达,RAC1-GTP可能参与胃癌进展,影响患者预后。

NSC23766改善大鼠脑缺血后认知功能缺陷

目的：探讨Rac1在大鼠海马CA1区缺血性神经元损伤中的作用.方法：健康成年雄性SD大鼠制作四动脉闭塞全脑缺血模型,实验动物随机分为Sham、缺血再灌组（ischemia/reperfusion,I/R）、溶剂对照（Vehicle）组（I/R＋生理盐水）、NSC23766组（I/R＋NSC23766）.采用激光共聚焦显微镜技术观察海马CA1区生存神经元.利用Morris水迷宫观察脑缺血再灌注后大鼠的空间学习记忆功能的变化情况.结果：与缺血再灌注组相比,Rac1抑制剂NSC23766组海马CA1区神经元生存数量增加;大鼠缺血后的空间学习记忆缺陷明显得到改善.结论：Rac1的激活可能是导致大鼠缺血再灌注后神经元损伤的重要因素,其抑制剂NSC23766可有效减轻这种损伤,为临床治疗缺血性脑中风提供理论依据.

Rac1基因在子宫内膜癌组织表达及其临床意义

目的探讨Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)基因在子宫内膜癌组织中表达情况及其临床意义。方法应用实时荧光定量PCR检测96例子宫内膜癌和40例正常子宫内膜组织Rac1基因的表达,并分析其与子宫内膜癌病人生存的关系以及子宫内膜癌病人预后的影响因素。结果子宫内膜癌组织Rac1 mRNA相对表达量为1.75±0.16,显著高于正常子宫内膜组织(1.38±0.14),差异有统计学意义(t=14.095,P<0.01)。子宫内膜癌组织Rac1 mRNA相对表达量与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移和血管浸润有关(t=5.322~9.739,P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,Rac1低表达组病人平均生存时间为58.82个月,高表达组为45.98个月,两组比较差异有显著性(χ2=4.972,P<0.05)。Cox比例风险回归模型分析显示,肿瘤分化程度、淋巴结转移和Rac1 mRNA相对表达量是影响子宫内膜癌病人预后的风险因素(HR=2.449~13.582,P<0.05)。结论Rac1基因在子宫内膜癌组织中呈高表达,是影响预后的风险因素之一。

四君子汤含药血清通过抑制RhoA/Rac1/Cdc42通路影响卵巢癌细胞的上皮间质转化

目的探索四君子汤含药血清对卵巢癌细胞增殖迁移、侵袭及上皮间质化的影响,并初步研究其作用机理。方法体外培养人卵巢癌细胞(SKOV3)和人卵巢上皮细胞,随机分为空白对照组、舒尼替尼组、四君子汤Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组。噻唑蓝法检测各组SKOV3细胞和人卵巢上皮细胞增殖变化情况;划痕实验和侵袭(transwell)实验检测各组SKOV3细胞迁移和侵袭能力;蛋白免疫印迹分析法检测各组SKOV3细胞上皮型钙粘蛋白(Ecadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Ras相关的C3肉毒素底物1(Rac1)和细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)蛋白表达情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组SKOV3细胞RhoA、Rac1和Cdc42 mRNA表达变化。结果各组人卵巢上皮细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组相比,舒尼替尼组SKOV3细胞存活率、划痕愈合率、侵袭数量、N-cadherin、Vimentin蛋白、RhoA、Rac1、Cdc42 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05)。四君子汤Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组SKOV3细胞存活率、划痕愈合率、侵袭数量、N-cadherin、Vimentin蛋白、RhoA、Rac1、Cdc42 mRNA和蛋白表达依次降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达依次升高(P<0.05),呈剂量依赖性。四君子汤Ⅲ组上述指标和舒尼替尼组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论四君子汤含药血清能够抑制人卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质化,可能与RhoA/Rac1/Cdc42信号通路激活受阻相关。

Rac1在小鼠哮喘发病前后的变化及其影响

目的:建立小鼠哮喘动物模型,检测在哮喘发病前后相关组织中Ras相关的C3肉毒素底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1, Rac1)表达水平的变化,分析其和2型固有淋巴细胞(type 2 innate lymphocytes, ILC2)相关细胞因子如白细胞介素(interleukin, IL)-5、IL-13之间的相关性,以探讨Rac1在小鼠哮喘发病机制中的作用。方法:用卵蛋白(ovalbumin, OVA)诱发小鼠产生哮喘,采用免疫荧光法在蛋白表达水平检测Rac1的改变,同时用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR, qRT-PCR)分析哮喘前后Rac1、IL-5、IL-13 mRNA水平变化。结果:在哮喘发病后,Rac1的水平呈明显下降趋势,而ILC2相关的细胞因子表达水平升高,且Rac1与IL-5、IL-13之间均呈明显负相关。结论:小鼠在哮喘发病后,Rac1呈低表达,同时刺激ILC2的活化,诱导IL-5和IL-13的表达,从而影响哮喘的免疫病理过程。

RAC2对黑色素瘤细胞辐射敏感性的影响

黑色素瘤具有恶性程度高、转移早、死亡率高等特点,而且对常规放射治疗不敏感,因此,提高黑色素瘤细胞的辐射敏感性对于此种疾病的治疗具有重要意义。本研究中构建了辐射诱导型过表达Ras相关的C3肉毒素底物2(RAC2)和敲低RAC2的黑色素瘤细胞系,通过测定其辐照后的克隆存活率、γH2AX foci水平、ROS产额以及NADPH氧化酶活性研究了RAC2基因对于黑色素瘤细胞辐射敏感性的影响及可能的作用机制,发现RAC2能通过增强NADPH氧化酶活性和提高ROS产额显著增强黑色素瘤细胞的辐射敏感性。